8. Методы анализа сырья, содержащего простые фенольные соединения.

Качественный и количественный анализ сырья основан на физических и химических свойствах.

Качественный анализ.

Включает качественные реакции и хроматографические пробы.

Фенольные соединения в виде гликозидов извлекают из растительного сырья водой, затем извлечения очищают от сопутствующих веществ, осаждая их растворами ацетата свинца. С очищенным извлечением выполняют качественные реакции.

Простые фенолы и агликоны фенологликозидов дают

характерные для фенольных соединений реакции:

• с железоаммонийными квасцами

• с солями тяжелых металлов

• с диазотированными ароматическими аминами.

Специфические реакции (гф х1):

- на арбутин (сырье толокнянки и брусники) используют цветные качественные реакции:

• с кристаллическим сульфатом закисного железа.

Реакция основана на получении комплекса, изменяющего окраску от сиреневого до темно­го с дальнейшим образованием темно-фиолетового осадка.

• с 10 %-ным раствором натрия фосфорно-молибденовокислого в кислоте хлористоводородной.

Реакция основана на образовании комплексного соединения синего цвета.

• на салидрозид (сырье родиолы розовой):

• реакция азосочетания с диазотированным сульфацилом натрия с образованием азокрасителя вишнево-красного цвета.

салидрозид азокраситель

Хроматографическое исследование

Используется ТСХ для обнаружения простых фенольных соединений в сырье родиолы розовой (ГФ Х1, вып. 2, ст. 75, с. 364-366).

Проба основана на разделении веществ в тонком слое силикагеля (пластинка «Силуфол») метанольного извлечения из сырья в системе растворителей хлороформ-метанол-вода (26:14:3) с последующим проявлением хроматограммы диазотированным сульфацилом натрия. Пятно салидрозида с Rf = 0,42 окрашивается в красноватый цвет.

Количественное определение.

Для количественного определения простых фенологликозидов в лекарственном растительном сырье используют различные методы: гравиметрические, титриметрические и физико-химические.

1. Гравиметрическим методом определяют содержание флороглюцидов в корневищах папоротника мужского. Метод основан на извлечении флороглюцидов из сырья диэтиловым эфиром в аппарате Сокслета. Извлечение очищают, отгоняют эфир, полученный сухой остаток высушивают и доводят до постоянной массы. В пересчете на абсолютно сухое сырье содержание флороглюцидов не менее 1,8%.

2. Титриметрический йодометрический метод используется для определения содержания арбутина в сырье брусники и толокнянки. Метод основан на окислении агликона гидрохинона до хинона 0,1 М раствором йода в кислой среде и в присутствии натрия гидрокарбоната.

Выделяют стадии определения:

1. Извлечение арбутина из сырья водой

2. Очистка водного извлечения основным ацетатом свинца

3. Кислотный гидролиз арбутина. Гидролиз проводится концентрированной серной кислотой в присутствии цинковой пыли, чтобы выделившийся свободный водород предотвращал собственное окисление гидрохинона.

4. Титрование 0,1 М раствором йода. В качестве индикатора используют раствор крахмала.

3. Спектрофотометрический метод используется для определения содержания салидрозида в сырье родиолы розовой.

Метод основан на способности окрашенного азокрасителя поглощать монохроматический свет при длине волны 486 нм. Стадии определения:

1. Извлечение салидрозида водой

2. Очистка водного извлечения осаждением балластных веществ раствором ацетата свинца и натрия сульфата

3. Получение окрашенного азокрасителя по реакции салидрозида с диазотированным сульфацилом натрия

4. Определение оптической плотности окрашенного раствора с помощью спектрофотометра при длине волны 486 нм

5. удельного показателя поглощения ГСО салидрозида Е^1%_1см = 253.

Содержание салидрозида не менее 0,8 %.