- •Методы анализа биологичеcки активных веществ и их свойства.
- •Химические свойства
- •Группы сырья по бав
- •1. Полисахариды
- •Количественное определение
- •2. Оценка качества сырья, содержащего жиры. Методы анализа.
- •3. Эфирные масла
- •4. Качественные реакции на антраценпроизводные
- •Реакция образования фенолятов со щелочью:
- •2. Реакция микросублимации (микровозгонки).
- •3.Реакция образования лаков.
- •1. Фотоэлектроколориметрический метод.
- •2. Спектрофотометрический метод.
- •5. Качественный анализ дубильных веществ.
- •3. Физико-химические методы.
- •6. Методы анализа сырья, содержащего сапонины.
- •Реакции, основанные на физических свойствах.
- •7. Анализ сырья, содержащего сг.
- •1. Реакции на стероидную структуру.
- •2. Реакции на ненасыщенное лактонное кольцо.
- •3. Реакции на углеводную часть молекулы.
- •8. Методы анализа сырья, содержащего простые фенольные соединения.
- •Простые фенолы и агликоны фенологликозидов дают
- •Специфические реакции (гф х1):
- •Хроматографическое исследование
- •9. Качественное определение.
- •3. Реакция с треххлористой сурьмой.
- •Реакция с 1 %-ным раствором основного ацетата свинца.
- •3. Спектрофотометрический метод (сфм)
- •Хроматоспектрофотометрический метод.
- •Предварительное разделение на колонке с полиамидом (плоды боярышника)
- •3. В траве сушеницы топяной выделяют следующие стадии количественного определения:
- •4. Количественное содержание ксантонов в траве золототысячника:
- •10. Методы анализа кумаринов
- •Качественный анализ
- •1 Группа. Йод и его растворы.
- •2 Группа. Комплексные йодиды металлов:
- •1. Извлечение суммы алкалоидов из сырья.
- •2. Очистка извлечения от балластных веществ.
- •3. Разделение суммы алкалоидов и выделение индивидуальных алкалоидов.
- •Гравиметрический (весовой) метод.
- •2) Титриметрические методы:
- •3) Физико-химические (инструментальные) методы:
- •12. Анализ сырья, содержащего сг.
- •1. Реакции на стероидную структуру.
- •2. Реакции на ненасыщенное лактонное кольцо.
- •3. Реакции на углеводную часть молекулы.
- •13. Оценка качества сырья, содержащего витамины.
1. Реакции на стероидную структуру.
Основаны на способности стероидного ядра СГ подвергаться дегидратации под действием кислотных реагентов (уксусный ангидрид, конц. серная кислота, трихлоруксусная кислота) с образованием окрашенных комплексных соединений. Образующиеся в результате реакций окрашивания меняются во времени, поэтому необходимо наблюдать их в момент соприкосновения реактивов, а затем отмечать изменение окраски в течение 10-15 минут.
Для СГ обычно проводят реакции:
1. Реакция Либермана-Бурхарда. При взаимодействии СГ со смесью уксусного ангидрида и конц. серной кислотой появляется розовое окрашивание, переходящее в зеленое.
2. Реакция Розенгейма. При взаимодействии СГ с 90% водным раствором трихлоруксусной кислоты появляется розовое окрашивание, переходящее в лиловое и затем в синее.
3. Реакция с хлоридом сурьмы (III). СГ при взаимодействии с хлоридом сурьмы в среде уксусного ангидрида образуют лиловое окрашивание
2. Реакции на ненасыщенное лактонное кольцо.
Основаны на способности ненасыщенного лактонного кольца легко окисляться в щелочной среде с образованием окрашенных продуктов реакции. Для СГ обычно проводят реакции:
1. Реакция Балье. При взаимодействии с пикриновой кислотой в щелочной среде СГ образуют комплексы, окрашенные в оранжевый цвет.
2. Реакция Кедде. При взаимодействии с 3,5-динитробензойной кислотой СГ образуют комплексы, окрашенные в красный цвет,
3. Реакция Легаля. При взаимодействии с нитропруссидом натрия в щелочной среде СГ образуют комплексы, окрашенные в красный цвет.
4. Реакция Раймонда. При взаимодействии с мета-динитробензолом СГ образуют комплексы, окрашенные в красно-фиолетовый цвет.
3. Реакции на углеводную часть молекулы.
Основаны на способности моносахаридов углеводной цепи образовывать окрашенные комплексы с различными реактивами.
1. Моносахара, входящие в состав СГ, после предварительного гидролиза вступают во все цветные реакции, свойственные углеводам (Феллинга, серебряного зеркала).
Для дезоксисахаров используют реакцию Келлер-Килиани.
Дезоксисахара в присутствии сульфата железа (III), ледяной уксусной кислоты и конц. серной образуют комплексы, окрашенные в синий или сине-зеленый цвет. Необходимым условием для проведения этой реакции является отсутствие на конце углеводной цепи обычных сахаров (глюкозы).
Достоверное заключение о присутствии в лекарственном растительном сырье СГ можно сделать только при положительном результате всех трех групп качественных реакций на различные части молекулы.
В ГФ-Х1 на сырье наперстянок пурпурной и крупноцветковой, ландыша майского и горицвета весеннего качественных реакций не предусмотрено.
Кроме того, СГ образуют нерастворимые комплексы с растворами дубильных веществ, что используется при отравлениях СГ.
Количественное определение СГ проводят методом биологической стандартизации (ГФ-Х1, вып.2, с. 163-175).
Метод основан на способности СГ вызывать в токсических дозах остановку сердца животных в стадию систолы. В качестве подопытных животных используют лягушек, голубей или кошек. Чувствительность животных к сердечным гликозидам определяют в сравнении со стандартными индивидуальными веществами или экстрактами, которые вырабатывают в специальных научно-исследовательских институтах. Активность выражают в единицах действия (ЕД), которые, в зависимости от вида животных обозначают:
ЛЕД - «лягушачьи» ЕД, КЕД - «кошачьи» ЕД или ГЕД «голубиные» ЕД.
ЛЕД соответствует наименьшей дозе стандартного препарата, вызывающей остановку сердца стандартной лягушки (самец травяной лягушки массой 28-33 г). В нормативной документации на лекарственное сырье и препараты, содержащих СГ, обязательно указывается ВАЛОР (количество ЕД в 1 г сырья).
Недостатками метода биологической стандартизации являются его трудоемкость, высокая стоимость, большая ошибка опыта (до 25%).
Поэтому нормативная документация на некоторые виды сырья и препараты требует определять их количественное содержание физико-химическими методами (хроматофотоэлектроколориметрическим или хроматоспектрофотометрическим) методами. Они основаны на предварительном хроматографическом разделении СГ с последующим фотоэлектроколориметрическим или спектрофотометрическим определением.