Вопрос 3. Методы стерилизации

Стерилизация(лат.обеспложивание)-методы, применяемые для уничтожения всех форм жизни как на поверхности, так и внутри стерилизуемых объектов.

I-термическая стерилизация основана на чувств-ти МО к t^o. При 60⁰С и наличие воды гибнут вегетат.формы,кроме спор, т.к. они имеют свой запас воды и их оболочки плотные.Их гибель наступает при 160-170⁰С.

1)прокаливание –для метал.предметов в пламени горелки или спиртовки.

2)обжигание-для стекл.предметов(шпатель,носики пипеток,палочки).Опускают в спирт,затем спирт поджигают.

3)кипячение-для посуды,покровн. и предметн.стекол.

4)сухожаровая стерилиз-я-для лаборат-ой стеклопосуды в сухожаровом шкафу(шкаф с двойными стенками из металла и асбеста,термометр)/печи Пастера.Режим-1-2часа,160-170⁰С. Недостаток-не все объекты выдерживают высокую t⁰.

5)автоклавировани(пар+давление)-для питат.сред, инструментов,инфекционного материала.АВТОКЛАВ-металл.цилиндр с прочными стенками,имеет 2 камеры:1-парообразующую и 2-стерилизующую.Создается высокое давление и увеличивается t⁰ кипения воды. В МБ практике используют режим-111-138⁰С, 0.5-2.5атм.

А)1атм,20мин-мясопептонные среды,не содерж.сахаров,как синтетические так и полусинтетич.

Б)0.5атм,15-30мин-для легкоразрушающ-ся субстр.,содерж. сахара,витамины,и проч.

6)тиндализация(дробная)-для сред,которые портятся при t⁰ выше 100⁰С.Принцип-(1)-прогрев среды без избыточн.давления несколько раз.Между прогревами экспозиция для проращивания спор,эти проросшие споры прорастают, но не дают новых спор и гибнут при второй обработке.Режимы-1.в парах кипящей воды 3-4раза,20-40мин.;2-в автоклаве с незавинченой крышкой;3-в кипятильнике Коха;4-на водяной бане с хорошо пригнанной крышкой. Между прогревами среды в термостате на 1сутки,30-100⁰С.Для субстр.невыдержив такой t⁰ применяют:1)70-80⁰,1час,3дня или 2)60-65⁰С,1час,5дней.Между прогреваниями экспозиция 25-37⁰С.ПРИМЕНЯЕТСЯ для термолабильных лекар.веществ ли желатины.

7)пастеризация-однократный прогрев материала при t⁰ ниже 100⁰ для уничтжения вегетативных форм МО.Стерильность субстрата на 99-99.5%,остальные 1-1.5%ослабевают и медленно размнож.РЕЖИМЫ-1)60-75⁰,15-30мин,2)80⁰10-15мин.ПРИМЕНЕНИЕ-1-произв-во молока,соков,пива.2-стерилиз-я накопител. и чистых культур спорообраз.МО.

II-холодная стерилизация

1)фильтрование-для субстр.невыдержюнагревания.ПРИНЦИП-пропускание жидкости через мелкопористые фильтры:а-мембранные(коллоидные),б-асбестовые(ф-р ЗЕЙТЦА),

в-фарфоровые(свечи ШАМБЕРЛАНА),г-стеклянные.

2)лучевая- УФ-лучи или Рентген-е излуч.Это бактерицидные лампы для обеззараж. воздуха и поверхностей.

3)химическая-с применением дез.средств. а-хлорсодержащие вещ-ва(хлорная известь,3-5%хлорамин).б-фенольные соединения(3-5%карболка).в-перекисные соед-я.г-четвертичные аммониевые(мертан).д-спирт.е-кислоты.ж-формальдегид.

Аппаратуру обрабат.газовым методом-смесь окиси этилена и метилбромида(1:1,44),50⁰С,1.2атм,влажность80-100%.Все в аппарате в вакууме.Использование через 24часа,что бы все выветрилось под тягой.

Билет №4.