Вопрос 2. Рост отдельных мо и рост популяции

Рост-необратимое увеличение количества живого ве­щества,связанное с увеличением и делением клеток. У одноклеточных растет число клеток. Однако и у одноклеточных следует отличать уве­личение числа клеток от увеличения клеточной массы.

При определении числа или массы бактерий пользуются обычно го­могенной суспензией клеток в какой-либо жидкой среде и определяют концентрацию бактерий (число клеток на 1 мл) или плотность бактерий (вмг/мл). Во время роста периодической (статической) культуры может не быть строгой пропорциональности между увеличением числа клеток и увеличением бактериальной массы. В популяции бактерий не все клетки жизнеспособны. Живыми клетки-которые могут обра­зовывать колонии в агаризованной среде, либо суспензию в пи­тательном растворе. Общее число клеток. 1.Самым распространенным методом определения об­щего числа клеток-подсчет под микроскопом в тонком слое с по­мощью «счетной камеры». 2. Один из самых старых методов состоит в сравнении с из­вестным числом каких-либо других малых частиц, например эритроцитов.3.элек­троный «счетчик Каултера». Действие его основано на снижении проводимости раствора электролитов при прохождении одной бактерии через узкое отверстие. Число живых клеток. Обычно подсчитывают число колоний, образуемых жизнеспособными клетками. Если поль­зуются чашечным методом Коха, то равные доли соответственно разбавленной гомогенной суспензии клеток смешивают с расплавленной агаризованной сре­дой (40-45°С) и выливают на чашки Петри. Можно также размазать суспензию по поверхности агара в чашке Петри с помощью (треугольного) шпателя Дригальского или же осадить клетки после фильтрования на агаризованную срду или на картонные диски с питательной средой. Во всех случаях после надлежа­щей инкубации подсчитывают число колоний. Определение бактериальной массы. Для оценки урожая обычно взвешивают сырые или сухие отцентрифугированные клетки. При определении интенсивности обмена или ферментативной активности исходят из содержания в клет­ках белка или азота. В повседневной практике предпочтение отдается не прямым, а косвенным методам (после со­ответствующей калибровки).

Прямые методы. 1. Сырую биомассу определяют после осаждения кле­ток центрифугированием. После центрифугирования отмытых клеток можно определить сухую массу. Оба метода не свободны от довольно больших систе­матических ошибок. 2. Определение общего азота (метод микро-Кьельдаля и микродиффузионный метод определе­ния аммиака), а также определение общего содержания углерода (по ван Слай-ку-Фолчу). 3.определяют содержание бакте­риального белка. 4.Хорошие результаты дают колориметрические методы. Микрометоды основаны на измерении ко­личества характерных компонентов белка: тирозина, триптофана (по Лоури или Фолину).

Косвенные методы. 1.методы, основанные на измерении мутности клеточных суспензий. 2.определение оптической плотности суспензии.3.определе­ние светорассеяния. 5. Показатели интенсивности метаболизма, связанные с ростом (поглощение 0₂, образование С0₂ или кислот),-ме­ра бактериальной массы. К такого рода определениям прибегают в тех слу­чаях, когда другие методы оказываются непригодными, например при очень малой плотности клеточных суспензий. 6.титрометрические, 7.манометрические, 8.электрохимические и др.

Экспоненциальный рост и время генерации

Бактерии размножаются чаще всего делением надвое, и поэтому число их растет в геометрической прогрессии: 2° -> 2¹ -> 2² -+ 2³ -...- 2ⁿ. N₀-количество клеток культуры до деления в единице объема.п- число делений. N₀-2ⁿ-число клеток после деления. Логарифмируя, получаем

v- число клеточных делений за 1 ч(константа скорости деления):

Время, необходимое для одного цикла деления(время генерации)

Отложив по оси ординат число клеток в экспоненциально растущей популяции, а по оси абсцисс - время,получим экспоненциальную кривую роста. Наклон прямой характе­ризует скорость деления: она тем больше, чем больше наклон.

Популяции на плотных средах растут в виде колонии,штриха или газона.В жидких средах образуется помутнение,осадок или пленка.Иногда образование газа,запаха или пигментация среды.