1)Светлопольная микроскопия

Микроскоп биологический рабочий, МБР-1. Назначение-определение формы клеток, их размер, подвиж­ность, степень морфологической гетерогенности, а также способность к дифференцирующему окрашиванию.

Особенности: оптическая часть-включает осветительный аппарат, объектив и окуляр.

Осветительный аппарат =зеркало+конден­сор. Вогнутое зеркало собирает и кон­центрирует в плоскости препарата пучок лучей.Конденсор, укрепленный непосредственно над зер­калом, состоит из нескольких линз и предназначен для собирания параллельных лучей света.

Объектив дает увеличенное и обратное изо­бражение изучаемого объекта. Объектив состоит из системы линз. Увеличение складывается из увеличения обьектива и окуляра от 8 до тысяч крат.

Разрешающая способность-min расстояние между двумя точками, при котором еще можно различить каж­дую из них. 1-0.2 мкм.

2)Микроскопия в темном поле

Микроскопия в темном поле основана на освещении объекта косыми лучами света. Эти лучи не попадают в объектив, поэтому поле зрения выглядит темным. Если препарат содержит клетки микроорганизмов, то косые лучи, проходя через такой препарат отражаются от поверхности клеток и уклоняются от своего первоначального направления, что попадают в объектив. Тогда наблюдатель видит на черном фоне интенсивно светящиеся объекты. Особенности и назначение:можно увидеть объек­ты, величина которых измеряется сотыми долями микрометра.Однако позволяет различить только их контуры,и не дает возможности рассмотреть внутреннее строе­ние.

3)микроскопия с фазово-контрастным устройством основана на том, что с его помощью различия в фазе световых лучей при прохождении через прозрачные объекты, превра­щаются в амплитудные, в результате чего объекты становятся контрастными. Особенности:позволяет сделать прозрачный объект контрастным и различимым без окрашивания и фиксации!обьекты живы!

Применение: не позволяет увеличить разрешаю­щую способность микроскопа, но дает возможность увидеть прозрачные объекты более четко и выявить некоторые структуры и включения в клетках крупных бактерий.

4)люминесцентная микроскопи основана на способности мно­гих веществ биологического происхождения и красителей све­титься под воздействием падающего света. Молекулы веществ, способных к люминесценции, поглощают энергию света и переходят в возбужденное состояние, которое ха­рактеризуется более высоким энергетическим уровнем. В таком состоянии они находятся непродолжительное время и возвращаются к исходному энергетическому уровню. Применение:в цитологических исследованиях, выявления живых и мертвых клеток, для изучения микроорганизмов в почвах, илах и ризосфере растений.

Для МБ исследований наиболее удо­бен люминесцентный микроскоп, в котором люминесценция воз­буждается сине-фиолетовыми лучами. Объективы 40Х, 70Х или 90Х. 5)электронная микроскопия

Разреш.способность- 0.5-1 нм.Увеличение 5000—50000 крат Особенности-позволяет ис­следовать только неживые высушенные объекты, т.к. образец находится в условиях высокого вакуума и интенсивного электрон­ного облучения. а)Просвечивающий(трансмиссионный) электронный микроскоп, создает изображение благодаря прохождению (просвечиванию) электронов сквозь образец.Применение-выявление деталей внутреннего строения МО,особенности их взаимодействия в анали­зируемом образце. Предварительно образец фиксируют химичес­ки, заливают в различные смолы и контрастируют солями тяже­лых металлов. Микроорганизмы и вирусы можно наблюдать и без заливки в смолы. Для этого каплю суспензии поме­щают на пленку-подложку, высушивают и контрастируют хими­чески или физически — косым напылением металлов.

б)сканирующий электронный микроскоп- электронный луч, сканируя поверхность об­разца Увеличение меньше, чем в просвечивающей=50 000 крат,Разреш.способность 3—5 нм. Применение-получение трехмерного изображение и наиболее эффективна для выяв­ления поверхностных структур МО, определения формы и архитектоники объекта.