Органы, ткани и клетки иммунной системы

Различают центральные и периферические органы иммунной системы, в которых развиваются, созревают и дифференцируются клетки иммунной системы.

Центральные органы иммунной системы – костный мозг и тимус. В них из стволовых кроветворных клеток лимфоциты дифференцируются в зрелые неиммунные лимфоциты, так наз. наивные лимфоциты (от англ. naive), или девственные (от англ.virgine). кроветворный костный мозг – место рождения всех клеток иммунной системы и созревания B-лимфоцитов (B-лимфопоэз) тимус (вилочковая железа) отвечает за развитие T-лимфоцитов: T-лимфопоэз (реаранжировка, т.е. перестройка генов TCR, экспрессия рецепторов, и т. д.). В тимусе отбираются T-лимфоциты (CD4 и CD8) и уничтожаются высокоавидные к собственным антигенам клетки. Гормоны тимуса завершают функциональное созревание T-лимфоцитов, повышают секрецию ими цитокинов. Периферические лимфоидные органы и ткани (лимфатические узлы, лимфоидные структуры глоточного кольца, лимфатические протоки и селезенка) – территория взаимодействия зрелых неиммунных лимфоцитов с антигенпрезентирующими клетками (АПК) и последующей антигензависимой дифференцировки (иммуногенеза) лимфоцитов. В эту группу входят:

лимфоидная ткань, ассоциированная с кожей (Scin-Associated Lymphoid Tissue – SALT); лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками (Mucosus-Associated Lymphoid Tissue – MALT) желудочно-кишечного, респираторного и мочеполового трактов (солитарные фолликулы, миндалины, пейеровы бляшки и др.). Пейеровы бляшки (групповые лимфатические фолликулы) - лимфоидные образования стенки тонкой кишки. Антигены проникают из просвета кишки в пейеровы бляшки через эпителиальные клетки (М-клетки).

Заполнить немые графы, указав органы и ткани иммунной системы человека и их основные функции.

Ориентировочная карта для самостоятельной работы с литературой по теме «Органы иммунной системы».

Основное задание	Указания	Ответы
Укажите центральные и периферические органы иммунной системы.	Назовите органы и ткани, укажите основные их функции Составьте схему

Самостоятельная работа №8 реакции иммунитета – рск, риф, ифа.

Реакция связывания комплемента.

РСК заключается в том, что при соответствии друг другу антигенов и антител они образуют иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител присоединяется комплемент (С), т.е. происходит связывание комплемента с комплексом антиген-антитело. Если же комплекс антиген-антитело не образуется, то комплемент остается свободным. РСК проводят в две фазы: 1-я фаза – инкубация смеси, содержащей антиген+антитело+комплемент; 2-я фаза - выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана, и гемолитической сыворотка, содержащей антитела к ним.

В первой фазе реакции при образовании комплекса антиген-антитело происходит связывание комплемента, и тогда во второй фазе гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет (реакция положительная). Если антиген и антитело не соответствуют друг другу , комплемент остается свободным и во второй фазе присоединится к комплексу эритроцит-антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз (реакция отрицательная).

РСК применяют для диагностики многих инфекционных болезней, в частности сифилиса (реакция Вассермана).

РСК с сывороткой больного РСК с сывороткой здорового

(реакция положительная) (реакция отрицательная)

Реакция иммунофлюоресценции.

РИФ. Различают две разновидности метода: прямой и непрямой. Это метод экспресс диагностики для выявления антигенов микробов или определения антител.

1. Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, мечеными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминесцирующей сывороткой, светятся по периферии клетки а виде каймы зеленого цвета.

2. Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген-антитело с помощью антиглобулиновой сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся с антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб+антимикробные кроличьи антитела, меченные флюорохромом.

Этот комплекс наблюдают в люминесцентный микроскоп, как и при прямом методе.

Прямая РИФ Непрямая РИФ

Иммуноферментный анализ.

ИФА – выявление антигенов и помощью соответствующих им антител, соединенных с ферментом-меткой. После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат-хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяет цвет продукта реакции – интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител. ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В и др., а также определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других биологически активных веществ, содержащихся в исследуемом материале в минимальных концентрациях.

Твердофазный ИФА – вариант теста, когда один из компонентов иммунной реакции сорбирован на твердом носителе, например, в лунках планшеток из полистирола. Компоненты выявляют добавлением меченых антител или антигенов. При положительном результате изменяется цвет хромогена. Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют несвязавшиеся компоненты путем промывания.

1. П ри определении антител в лунки планшеток с сорбированным антигеном последовательно добавляют сыворотку крови больного, антиглобулиновую сыворотку, меченную ферментом, и субстрат-хромоген для фермента.

Определение антител в сыворотке крови больного (в лунках планшеток с сорбированным антигеном).

2. При определении антигена в лунки с сорбированными антителами вносят антиген (например, сыворотку крови с искомым антигеном), добавляют диагностическую сыворотку против него и вторичные антитела (против диагностической сыворотки), меченные ферментом, а затем субстрат-хромоген для фермента.

Определение в сыворотке крови больного (в лунках планшеток с сорбированными диагностическими антителами).

Ориентировочная карта для самостоятельной работы с литературой по теме.

Основное задание	Указания	Ответы
1. Изучите методику проведения РСК	Составить схему реакции
2. Изучите методику проведения прямой и непрямой РИФ
3. Изучите методику проведения ИФА