Анализ лекарственного растительного сырья

Лекарственное растительное сырье не имеет государственного знака качества или сорта. По всем показателям оно должно соответст­вовать требованиям НТД. Качество сырья определяется с помощью анализа. Его результаты имеют государственную юридическую силу. В аптечной сети нашей страны эту работу выполняют про­визоры на базе около 300 контрольно-аналитических лабораторий и более 30 000 аналитических кабинетов и столов.

Цель анализа — установить подлинность, чистоту и до­брокачественность сырья.

Определение подлинности сырья означает доказательное подтверждение правильного (подлинного) его назва­ния. При сборе сырья возможны ошибки. Например, сборщик сдает сырье под названием «листья мать-и-мачехи», а фактически это листья другого растения рода Подбел. Часто такие ошибки происходят при сборе водяного перца, почечуйной травы, полевого хвоща, череды. Подлинность сырья устанавливается по внешним (макроскопический анализ) и анатомо-диагностическим признакам (микроскопический анализ), а также путем постановки качест­венных химических реакций в соответствии с требованиями НТД. Микроскопический анализ проводят, когда по внешним признакам и качественным реакциям подлинность сырья не определяется. Методы определения подлинности различных растительных органов приведены в соответствующих статьях ГФ XI («Листья», «Травы»,

«Цветки» и др.).

Для определения чистоты сырья устанавливают в нем наличие примесей и определяют их содержание. Оно выражается в про­центах и не должно превышать разрешаемых НТД. Согласно ГОСТ 14143—69, в траве хвоща допускается измельченных ча­стей размером менее 1 см до 10%, других частей хвоща — 1%, органических примесей — 1%, неорганических — 0,5% и др.

Доброкачественность сырья определяется степенью пораженности его амбарными вредителями, содержанием влаги, золы (общей и нерастворимой в 10% хлороводородной кислоте), действующих веществ. В листьях толокнянки по ГФ XI допускается содержание влаги не выше 12%, золы общей — не более 4%, арбутина — не менее 8%. В аптеках чаще прибегают к макроскопическому и товароведческому анализу. В аналитических лабораториях про­водят микроскопический, биологический, фитохимический и другие

виды анализа.

В первом выпуске ГФ XI описаны макроскопический анализ внешних признаков сырья, микроскопия, люминесцентная микро­скопия, гистохимические реакции, качественные реакции, опреде­ление числовых показателей (действующие вещества, биологиче­ская активность, влажность, содержание золы, измельченность, примеси).

Макроскопический анализ. Основан на определении внешних признаков сырья невооруженным глазом или под лупой для до­казательства подлинности сырья (цельного, резаного). Главная цель — найти в общей картине морфологических признаков специфические, особенные, присущие данному объекту, отличающие его от других.

При изучении внешних признаков сырья обращают внимание на его форму, размеры, цвет, вкус, запах. Размеры сырья устанавливают линейкой или с помощью мил­лиметровой бумаги, цвет — только при дневном освещении. Запах определяют в образцах сырья, растирая его между пальцами или в ступке. Запах усиливается после смачивания горячей водой. Вкус разрешается определять только у известного или неядовитого сырья. На вкус испытывают кусочек сырья или его 10% отвар. С помощью макроанализа определяют подлинность и некоторые показатели доброкачественности. Внешние признаки для каждого вида сырья описаны в соответствующей НТД.

Микроскопический анализ. Проводится для определения по­длинности цельного, резаного или порошкованного сырья и ос­нован на выявлении в кем диагностических признаков, по ко­торым данный объект отличается от других. Все эти признаки указаны в НТД, например, для корня ревеня — многочисленные крупные друзы оксалата кальция, зерна крахмала, обломки со­судов, для листьев ландыша — вытянутые клетки эпидермы с устьицами и оксалат кальция в виде призматических и иголь­чатых кристаллов. Микроскопический анализ проводят с по­мощью микроскопов различных конструкций. Предварительно го­товят микропрепараты из различных видов сырья, для чего сырье подвергают специальной обработке. Обычно его просвет­ляют кипячением в течение 1—3 мин в жидкостях, извлекаю­щих пигменты и другие вещества (растворы NaOH, хлоралгид­рата), затем промывают в воде. Подземные части растения вме­сто просветления размачивают в водно-спиртоглицериновой смеси. Коры вываривают в растворах NaOH. Из листьев и трав готовят поверхностные микропрепараты, из кор — давленые, из под­земных частей растений — поперечные и продольные срезы. Иногда для лучшей видимости препараты окрашивают специаль­ными химическими реактивами, описанными в ГФ XI. Анато­мические признаки сначала изучаются под малым увеличением микроскопа, а затем детально под большим увеличением . Микроскопическую картину сравнивают с описанием НТД и окончательно устанавливают подлинность сырья. Особенности микроскопического и макроскопического анализов корней, трав, листьев и других органов изучаются на практических лабора­торных занятиях по фармакогнозии.

Фитохимический анализ. Производят для определения добро­качественности сырья. При этом проводят качественные реакции и определяют содержание биологически активных веществ. Методы анализов более детально описаны в НТД, ГФ XI, руководстве к практическим занятиям по фармакогнозии. Не найдены биологи­чески активные вещества или не разработаны методики их опре­деления в 94 видах лекарственного сырья. В таких случаях обычно определяется сумма экстрактивных веществ.

Элементы качественного фитоанализа доступны в условиях первичных приемных пунктов и аптек. В сырье при помощи качественных химических реакций определяют алкалоиды, слизи, дубильные вещества, антрагликозиды и др. Эти реакции вы­полняют с водными извлечениями сырья или реактив наносят непосредственно на сырье. Водное извлечение из коры крушины при добавлении раствора NaOH окрашивается в красный цвет. Если на внутреннюю поверхность коры крушины нанести каплю NaOH, то появится красное окрашивание (антрагликозиды).

Для обнаружения (идентификации) биологически активных веществ в сырье в настоящее время наряду с качественными хи­мическими реакциями широко используют хроматографическис пробы (бумажная, тонкослойная хроматография и др.) и люми­несцентную микроскопию.

Люминесцентная микроскопия. С помощью люминесцентного микроскопа изучают сухое растительное сырье, из которого готовят толстые срезы или препараты порошка. Рассматривают через опак-иллюминатор или объектив в падающем сверху свете. Можно приспособить обычный биологический микроскоп, снабдив его лю­минесцентным освещением. Люминесцентная микроскопия отдель­ных органов детально описана в ГФ XI.

Определение числовых показателей. Количественное содержа­ние биологически активных веществ в сырье определяется путем химического анализа по методикам, описанным в НТД. Если химические методы разработаны недостаточно, то проводится би­ологическая стандартизация сырья (сырье, содержащее сердечные гликозиды и др.).

Активность лекарственного растительного сырья и препаратов из него определяют на лягушках, кошках, голубях и выражают в единицах действия – ЕД. Определение биологической активности всегда проводят в сравнении с образцами (стандартами). Устанав­ливают наименьшие дозы испытуемого образца сырья, которые вызывают систолическую остановку сердца у подопытных живо­тных. В зависимости от того, на каком животном проводился эксперимент, дозы называют лягушачьими (ЛЕД), кошачьими (КЕД) и голубиными (ГЕД) единицами действия. Затем рассчи­тывают содержание единиц действия в 1 г сырья. Например, 1 г листьев наперстянки пурпурной содержит 50—60 ЛЕД или 10,3—12,6 КЕД.

Методы биологической стандартизации подробно изложены в НТД. Органы санитарного надзора владеют методами определения радиоактивности сырья и при необходимости проводят такие из­мерения. Возникает необходимость в разработке методик по оп­ределению содержания ядохимикатов и пестицидов в лекарственной растительной продукции.

Товароведческий анализ. Производится для всестороннего оп­ределения качества сырья. Этот анализ комплексный и включает макроскопические, микроскопические, химические и другие ис­следования. Без данных товароведческого анализа сырье не может быть признано качественным и использоваться как лекарственное средство. Товароведческий анализ производят при первичной при­емке сырья, по истечении сроков его хранения, при подозрении на потерю должного качества в случае подмоченности, засорения, увлажнения, повышенной измельченности.

При проведении анализа применяются специальные термины:

партия сырья — количество его в массе 50 кг и более одного наименования, однородного по всем показателям и оформленного одним документом о качестве; единица продукции — одно грузовое место с сырьем или одна упаковка сырья;

точечная проба — количество сырья, взятого от единицы про­дукции рукой или щупом для анализа за один раз;

объединенная проба — смесь всех точечных проб, отобранных от анализируемых мест;

средняя проба — часть объединенной пробы, отбираемая для полного товароведческого анализа. Масса средней пробы для каж­дого вида сырья указана в ГФ XI.

В первом выпуске ГФ XI в разделе «Методы анализа лекар­ственного растительного сырья» разработан подраздел «Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб для анализа». Методикой предусматривается анализ норма­тивного (стандартизованного) сырья партиями 50 кг и более. Это приемлемо для складов, баз, крупных ЦРА в процессе хранения или движения нормативного лекарственного сырья.

Фармацевт аптеки принимает и анализирует растительное сырье сборщика (заготовителя в период сбора), которое поступает в свежем или высушенном состоянии и обычно небольшими объе­мами. Эта продукция еще не является лекарственным сырьем. В соответствии с ГФ XI и требованиями соответствующего НТД на сырье фармацевт ведет его приемку, а затем, иногда спустя недели или месяцы (в конце заготовительного сезона), отбирает пробы для дальнейшего анализа и подтверждения его лекарственных свойств.

Товароведческий анализ в соответствии с ГФ XI проводится в три основных этапа.