Забор материала для бактериологического исследования при дизентерии, сальмонеллезе, Коли-инфекции

Показания. Исследование проводят при заболевании кишечной инфекцией, контакте с больным кишечной инфекцией, наличии признаков поражения желудочно-кишечного тракта. Посев производят с целью выделения микробов-возбудителей, определения их культуральных свойств, чувствительности к антибиотикам и химиопрепаратам.

Аппаратура, инструментарий, медикаменты:

• исследуемый материал (испражнения, рвотные массы, промывные воды, остатки съеденной пищи, кровь, моча, желчь, ликвор);

• питательные среды (бактоагар, трехсахарный агар), среды обогащения (селенитовый бульон);

• стерильный деревянный шпатель, стеклянная палочка или металлическая петля;

• стерильная баночка или пробирка;

• ректороманоскоп.

Техника выполнения

Забор материала для бактериологических исследований должен осуществляться до начала лечения этиотропными средствами, 3-х кратно с интервалом 6-8 ч. Для исследования предпочтительнее брать материал c комочками слизи или гноя, без примеси крови, в связи с ее бактерицидными свойствами.

Забор испражнений (2-3 г) производится деревянным шпателем или стеклянной палочкой из судна, горшка, специального лотка, а также из прямой кишки металлической петлей или через трубку ректороманоскопа. В судне или горшке не должно оставаться следов дезинфицирующего средства, для чего их необходимо тщательно промыть горячей водой.

Испражнения для посева забирают сразу после дефекации (лучше последние порции, т.к. они поступают из верхних отделов кишечника и содержат больше возбудителей). Для забора материала петлей больного просят лечь на бок с приведенными к животу бедрами. Ладонями разводятся ягодицы. Петля осторожным движением вводится в задний проход на глубину 5-6 см и также осторожно вынимается.

Материал для бактериологического исследования помещается в стерильные пробирку или баночку и направляется в лабораторию в первые 2 ч после получения. При невозможности своевременной доставки он помещается в холодильник (2-6 ^оС) и направляется на исследование не позднее 12 ч после забора. Лучше всего сразу же сделать посев материала на питательную среду (бактоагар Плоскирева, Эндо, Левина). При невозможности посева в первые часы можно использовать консерванты или среды обогащения (селенитовый бульон).

Засеянные чашки помещают в термостат на 18-24 ч. Затем подозрительные колонии отсеивают на среду Ресселя или скошенный столбик с мочевиной. Выделенные культуры идентифицируются по морфологическим, биохимическим и серологическим свойствам.

Положительная гемокультура всегда указывает на наличие заболевания, а положительная копро-, урино-, били или дуоденокультура будет иметь диагностическое значение только в сочетании с клиническими симптомами, так как могут быть положительными и у хронических бактерионосителей.

Отрицательный результат получают через 48 ч, предварительный – через 72 ч, окончательный – через 96 ч.

Забор материала для бактериологического исследования при дифтерии

Показания. Бактериологическому исследованию подлежат: 1) с диагностической целью больные с подозрением на дифтерию ежедневно в течение 3-х дней с момента обращения; больные с налетом на миндалинах, дужках, язычке, с подозрением на паратонзиллит, паратонзилярный абсцесс, инфекционный мононуклеоз, стенозирующий ларинготрахеит – однократно; 2) по эпидемическим показаниям все контактные – однократно; 3) с профилактической целью вновь поступающие в детские дома, школы-интернаты, специализированные учреждения для детей с поражением центральной нервной системы, санатории для детей с туберкулезной интоксикацией, психоневрологические санатории – однократно. Исследование направлено на выделение возбудителя и идентификацию его патогенных признаков, включая токсигеннность.

Аппаратура, инструментарий, медикаменты:

• исследуемый материал (слизь и пленки с миндалин, ротоглотки, носа, глаза, уха, раны, кожи, влагалища, пупочной ранки);

• стерильные ватные сухие тампоны или стерильные тампоны, смоченные 5 % раствором глицерина в физиологическом растворе с рН 7,6;

• среды обогащения, питательные среды;

• стерильные шпатели, проволочки, деревянные палочки, пробирки, предметные стекла;

• биксы, теплая грелка или сумка-«термос».

Техника выполнения

Для взятия материала используют стерильные сухие ватные тампоны, а при транспортировке в жаркое время – тампоны, смоченные 5 % раствором глицерина на физиологическом растворе. Материал с миндалин и носа берут отдельными тампонами, натощак или не ранее, чем через 2 ч после еды, при хорошем освещении с использованием шпателя, не касаясь тампоном языка, слизистой щек и зубов.

При наличии налетов материал берут с границы пораженной и здоровой ткани, слегка нажимая на них тампоном. Исследуют пленки с миндалин, гортани и других участков. При редких локализациях дифтерии – поражениях глаза, уха, раны и т.д. – берут материал из мест поражения, а также из зева и носа.

После забора материала на посев его необходимо немедленно доставить в лабораторию. Эффективность бактериологического метода зависит от длительности периода между забором материала и посевом. Положительные результаты высоки при посеве у постели больного и маловероятны при посеве через 2-3 ч после забора материала.

Собранный из мест поражения материал засевают на элективные среды (Леффлера, Клауберга) и помещают в термостат при 37 ^оС. Предварительный ответ об обнаружении бактерий, подозрительных на дифтерию, выдают через 24-48 ч, а окончательный – через 48 ч (культура токсигенная) или через 72 ч (культура нетоксигенная). Токсигенность коринебактерий дифтерии определяют на плотных питательных средах методом преципитации в геле по Оухтерлони.

Для предварительной ориентации можно проводить микроскопию мазков с целью получения немедленного ответа. Для приготовления мазка-отпечатка необходимо приготовить чистое, обезжиренное эфиром предметное стекло. Ватный тампон, укрепленный на деревянной палочке или металлической проволочке, увлажняют изотоническим раствором хлорида натрия и вводят в носовой ход (или со слизистой небных миндалин), делают несколько вращательных движений. После этого тампон помещают на предметное стекло и производят отпечатки. В мазках при микроскопии обнаруживают попарно под углом друг к другу расположенные палочки-возбу­дители заболевания.