Вирус русского весенне-летнего энцефалита Старое название вируса – вирус клещевого энцефалита.

История открытия. Вирусы русского весенне-летнего энцефалита впервые были выделены в 1937 г. Л.А. Зильбером, Е.Н. Левкович, Н.П. Чумаковым и др.

Особенности вирусов. Строение и стратегия размножения вируса типичны для всех флавивирусов. Вирионы сферической формы, диаметром 30-35 нм, с суперкапсидом (рис. 2). Капсид диаметром 20-30 нм. Геномная РНК кодирует 3 структурных белка: капсидный (С), мембранный (М), Е - протективный (суперкапсидный); и 5 неструктурных – NS. Неструктурный белок NS1 является протективным антигеном.

А нтигенная структура. Вирусы русского весенне-летнего энцефалита имеют 3 антигенных варианта (подвида) – западный, восточный и возбудитель двухволнового менингоэнцефалита.

Резистентность. Вирусы устойчивы к низким температурам: при -150˚С жизнеспособны до 1 года, а в высушенном состоянии – много лет, хотя при этом снижаются инвазионные свойства. При +16-18˚С вирусы сохраняются 10 дней, при 37˚С – в течение 1 суток. Повышение температуры до +50˚С инактивирует вирус в течение 20 минут, а кипячение убивает его через 2 минуты, но в молоке при +60˚С вирусы погибают через 20 минут. При рН 1,2 вирусы устойчивы 4 ч, при рН 3 – до 24 ч, при рН 6,8-9,1 - до 7 суток. Вирусы чувствительны к ультрафиолетовому облучению, эфиру.

Культивирование. Для культивирования вирусов используются: белые мыши, куриные эмбрионы, перевиваемые клеточные культуры. Вирусы интенсивно размножаются в мозговой ткани белых мышей; через 4-8 дней после заражения животные заболевают с развитием парезов и параличей конечностей, частыми судорогами и быстрой смертью. Для культивирования используются 8-9-дневные куриные эмбрионы, заражение которых проводится на хорион-аллантоисную оболочку или в желточный мешок с последующей инкубацией при 37˚С в течение 72 ч. В положительном случае через 72 ч наступает гибель эмбриона. Заражение клеточных культур сопровождается гибелью клеток.

Эпидемиология. Вирусы русского весенне-летнего энцефалита распространены от Дальнего Востока до стран Средней и Западной Европы. Встречаются также в западных областях Украины. Резервуаром и источником инфекции являются грызуны (бурундуки, белки, ежи, зайцы, хомяки, кроты, мыши), копытные (лошади, коровы, лоси, козы), псовые (лисы, волки), птицы, клещи. Механизм передачи инфекции – трансмиссивный. Переносчиками вирусов являются иксодовые клещи. Инфицирование человека возможно алиментарным путем при употреблении в пищу некипяченого коровьего и козьего молока. Сезонность весенне-летняя. Человек – тупиковый хозяин вирусов.

Патогенез. Проникновение вирусов в организм человека чаще происходит при нападении клещей. В течение всего периода кровососания вирус непрерывно переходит в организм человека. Реже вирусы проникают в организм через слизистую оболочку кишечника. Первичная репродукция вируса происходит в макрофагах и гистиоцитах кожи. Затем вирусы попадают в регионарные лимфатические узлы, где происходит их дальнейшее размножение. Из лимфатических узлов вирусы попадают в кровь, заносятся во внутренние органы, в том числе и в центральную нервную систему. Размножение вирусов в ткани головного и спинного мозга сопровождается разрушением нейронов с явлениями сателлитоза и нейронофагии. Наиболее выраженные дегенеративно-дистрофические процессы развиваются в передних рогах шейного отдела спинного мозга, в ядрах черепно-мозговых нервов и ретикулярной формации. При алиментарном заражении вначале наблюдается висцеральная фаза с вирусемией и репликацией вирусов во внутренних органах, а в дальнейшем возникает вторичная вирусемия с поражением центральной нервной системы (двухволновой менингоэнцефалит). Во внутренних органах отмечаются полнокровие, кровоизлияния в серозные и слизистые оболочки.

Клиника. Инкубационный период – от 3 до 21 дня (иногда до 60 дней), в среднем – 10-14 дней. Русский весенне-летний энцефалит характеризуется острым началом, лихорадкой, головной болью, тошнотой, рвотой, болью в спине, развитием ригидности затылочных мышц, параличей, парезов (часто повреждаются мышцы шеи и рук). Смертность – 5-30 %.

Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется гуморальный и клеточный иммунитет. Гуморальный иммунитет обеспечивается типоспецифическими антителами, клеточный иммунитет – гиперчувствительностью замедленного типа. Иммунитет напряженный, пожизненный.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат кровь, спинномозговая жидкость, секционный материал (участки ткани мозга, печени, селезенки, почек, лимфатических узлов), клещи, молоко коз, коров, овец. Используются вирусоскопический, вирусологический, серологический и молекулярно-генетический методы исследования.

Экспресс-диагностика заболевания проводится с применением люминесцентной микроскопии, РНГА, ИФА, РИА. Целью экспресс-диагностики является выявление антигена (РНГА, ИФА) и обнаружение Ig М (ИФА, РИА). При русском весенне-летнем энцефалите Ig М в крови больных появляются на 3-4-й день заболевания и сохраняются в высоких титрах на протяжении острого периода инфекции (до конца 5-6 недели), а затем их концентрация в течение 2 последующих лет постепенно снижается.

Вирусологический метод включает выделение вирусов на животных (новорожденные или 3-4-недельные мыши), в культурах клеток (фибробласты куриных эмбрионов, Vero, СПЭВ) или в куриных эмбрионах. Индикацию вирусов проводят по ЦПД, бляшкообразованию под агаровым покрытием, на основании гибели мышей и куриных эмбрионов. Идентификацию вирусов осуществляют в РТГА, РСК, РНГА, ИФА, РИА, РН, а также с помощью метода флюоресцирующих антител. Известным компонентом в реакциях идентификации являются антитела к вирусу русского весенне-летнего энцефалита.

При серологической диагностике следует учитывать, что в сыворотке крови больного ранее всего появляются антигемагглютинины (на 6-7-й день), затем – комплементсвязывающие антитела (на 12-14-й день) и позже всего – нейтрализующие антитела (на 3-4-й неделе). Серологическое исследование проводят в парных сыворотках, взятых с интервалом 10-14 дней. При отрицательном результате кровь берут повторно через 1-2 месяца после начала заболевания. Серологическая диагностика проводится с помощью РТГА, РСК, РН, ИФА, РИА, непрямого варианта метода флюоресцирующих антител. Диагностическим считается четырехкратное нарастание титра специфических антител. Известным компонентом серологических реакций является диагностикум, содержащий вирусы русского весенне-летнего энцефалита.

Молекулярно-генетический метод диагностики проводится с использованием ПЦР.

Лечение патогенетическое и симптоматическое. Показаны ремантадин и интерфероны.

Профилактика. Неспецифическая профилактика включает защиту человека от укусов клещей, использование репеллентов, термическую обработку молочных продуктов. При выходе из леса обязательно проводятся само- и взаимоосмотры. Обнаруженный клещ должен быть немедленно удален. Лицам, подвергшимся укусам клещей, должен быть введен противоклещевой иммуноглобулин (взрослым – по 3 мл, детям 10-15 лет – 2 мл) внутримышечно. Такая же доза должна быть введена повторно через неделю. Ведущую роль в профилактике играет вакцинация тканевой инактивированной вакциной (получена А.А. Смородинцевым и коллегами в 1939-40 гг.). Вакцинный штамм инактивирован формалином или ультрафиолетовым облучением с последующей хроматографической очисткой на макропористом стекле. Вакцина вводится подкожно двухкратно под лопатку. Детям от 4 до 7 лет вводят по 0,5 мл, детям старше 7 лет и взрослым – 1 мл. Вакцинация начинается в возрасте 4 лет. Полный курс вакцинации состоит из 4 инъекций. Первые 2 прививки делаются с интервалом 7-10 дней, третья – через 14-20 дней. Четвертая прививка проводится спустя 4-6 месяцев после третьей инъекции. Ревакцинации осуществляются ежегодно однократно перед эпидемическим сезоном в эндемических районах.

Вирус омской геморрагической лихорадки

История открытия. Вирусы омской геморрагической лихорадки были впервые выделены в 1947 г. М.П. Чумаковым.

Особенности вирусов. Строение и стратегия размножения типичны для всех флавивирусов. Вирионы не превышают 40 нм в диаметре, обладают гемагглютинирующей способностью. Вирусы омской геморрагической лихорадки имеют антигенное сходство с вирусами русского весенне-летнего энцефалита, но наряду с этим обладают видоспецифическими антигенами.

Резистентность. Вирусы высокочувствительны к жирорастворителям; при 4˚С инактивируются через 29 суток, при 37˚С – через 2,5 суток, при 56˚С – через 25 минут, при 80˚С - через 7 минут, а при 100˚С – через 3 минуты. Относительно устойчив к изменениям рН среды. Стабилен (более 4 лет) при лиофильном высушивании.

Культивирование. Вирусы высоко патогенны для новорожденных и взрослых ондатр, мышей, водяных крыс и узкочерепных полевок. Вирусы размножаются в куриных эмбрионах и клеточных культурах хомяка, мышей, обезьян, человека, но только в культурах клеток эмбриона свиньи дает выраженный цитопатический эффект с разрушением монослоя клеток. Вирусы, пассированные на ондатрах и белых мышах, становятся высоковирулентными и представляют большую опасность для работающих с ним.

Эпидемиология. Омская геморрагическая лихорадка – природно-очаговое заболевание. Резервуар вирусов – водяные крысы, ондатры и другие грызуны. Механизмы передачи инфекции: 1) трансмиссивный, переносчики – иксодовые клещи; 2) перкутанный (при контакте с ондатрами). В настоящее время очаги омской геморрагической лихорадке известны в Омской, Новосибирской, Тюменской, Курганской, Оренбургской областях и на севере Казахстана.

Патогенез заболевания практически не изучен. Вирусы поражают эндотелий капилляров кожи, слизистых оболочек, внутренних органов. Это приводит к полнокровию, отеку и мелкоочаговым кровоизлияниям в головном и спинном мозге, легких, коже, склерах.

Клиника. Инкубационный период 2-4 суток. Заболевание проявляется лихорадкой, головной болью, миалгиями, геморрагической сыпью на коже и слизистых оболочках, кровотечениями из желудочно-кишечного тракта и других органов. Возможно развитие менингоэнцефалита, пневмонии. Летальность не превышает 1 %.

Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется стойкий пожизненный иммунитет, обусловленный антигенспецифическими гуморальными и клеточными факторами.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются кровь больного, спинномозговая жидкость. Используются вирусологический и серологический методы. Выделение вирусов проводят на мышах или на клеточных культурах, идентификацию – в РТГА, РСК, РН. Эти же реакции используют при серологической диагностике.

Лечение патогенетическое и симптоматическое. Показаны интерфероны.

Профилактика. Неспецифическая профилактика включает защиту от укусов клещами и предотвращение контактов с грызунами. Больной омской геморрагической лихорадкой не является источником инфекции и не нуждается в строгой изоляции. Карантин по поводу омской геморрагической лихорадке не накладывают, дезинфекцию, дератизацию и дезинсекцию в квартире заболевшего не проводят. Специфическую профилактику проводят инактивированной формалином вакциной, приготовленной из мозга белых мышей, зараженных вирусом омской геморрагической лихорадки. Вакцина высокоэффективна и слабо реактогенна. Вакцинация показана в эндемических районах пастухам, охотникам, рыбакам, работникам зверопромхозов. Для экстренной профилактики используют специфический иммуноглобулин.

Вирус японского энцефалита

История открытия. Вирусы японского энцефалита впервые были выделены М. Хаяши в 1924 г. из мозга человека. На территории бывшего СССР вирусы обнаружены в 1940 г. А.К. Шубладзе и А.А. Смородинцевым, и в 1941 г. – В.Д. Неустроевым.

Особенности вирусов. Вирион сферической формы, диаметром 38-50 нм, покрыт суперкапсидом. Капсид кубический, содержит однониточную несегментированную линейную «+»-РНК длиной 10,9_*10³ нуклеотидов. Открытая рамка считывания РНК кодирует 8 вирусных белков, в том числе: С, М, Е, NS1, NS2, NS3, NS4, NS5. С, М и Е являются структурными белками, М-белок расположен внутри суперкапсида; С-белок взаимодействует с РНК-геномом, Е-белок находится на поверхности суперкапсида. NS-белки являются функциональными.

Антигенная структура. Вирусы японского энцефалита имеют 2 антигенных варианта (подвида) – Накаяма и Jagar 0,1. Вирусы перекрестно реагируют с большинством флавивирусов в РГА.

Резистентность. Аналогична таковой для вируса русского весенне-летнего энцефалита.

Культивирование. Для культивирования используют лабораторных животных, клеточные культуры HeLa, Vero и куриные эмбрионы.

Эпидемиология. Резервуаром вирусов являются дикие птицы, грызуны, лошади, крупный рогатый скот и свиньи. Механизм передачи инфекции человеку – трансмиссивный (переносчики – комары рода Culex). Человек – тупиковый хозяин, так как нет существенной вирусемии. Заражения человека от человека не бывает. Ареал вирусов японского энцефалита – Япония, Китай, Корея, Индия, Филиппины, Тайвань, юг Приморья. Сезонность – июнь-сентябрь. Наиболее часто поражаются дети до 14 лет.

Патогенез. Из места инокуляции вирусы гематогенно разносятся по всем системам и органам человека, вызывая поражение эндотелия микрососудов с развитием серозно-геморрагического интерстициального отека и геморрагий в миокарде, почках, печени и других органах. Вирусы японского энцефалита поражают нейроны центральной нервной системы, приводя к их разрушению в процессе своего размножения. В сером веществе головного и спинного мозга наблюдается сосудистый отек, нейронофагия, образование очагов воспаления. Наиболее часто поражаются ядра гипоталамуса, двигательные нейроны ствола и шейного отдела спинного мозга, некоторые подкорковые образования. Вирусы японского энцефалита способны размножаться в клетках паренхиматозных органов и лимфоцитах.

Клиника. Инкубационный период – от 5 до 21 дня. Заболевание проявляется лихорадкой, угнетением сознания вплоть до комы, головной болью, мышечной гипертонией, парезами и параличами. Смертность в зависимости от возраста больных достигает 20-80 %.

Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется стойкий иммунитет, обусловленный преимущественно антигенспецифическими антителами.

Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются кровь, спинномозговая жидкость и ткань головного мозга. Используются вирусологический, серологический и молекулярно-генетический методы диагностики (ПЦР).

Лечение. Специфическую терапию осуществляют иммуноглобулином и гипериммунной лошадиной сывороткой. Показаны интерфероны.

Профилактика. Специфическая профилактика включает использование инактивированных культуральных вакцин. Разработана бивалентная вакцина, включающая смесь вакцин Накаяма (классическая вакцина) и Бейджинг-1. Неспецифическая профилактика заключается в применении инсектицидов, репеллентов, защите от укусов комаров и др.

Вирус желтой лихорадки

История открытия. Желтая лихорадка описана в 1648 г. в Мехико. Заболевание было бичом ХIХ столетия, поражая города-порты обеих Америк, Европы и Африки. В 1848 г. комары стали расцениваться как переносчики возбудителя болезни; сто было подтверждено в 1881 г. кубинским врачом К. Финлеем. В 1900 г. В. Рид с коллегами доказали, что москиты – переносчики возбудителя желтой лихорадки, а сам возбудитель – «фильтрующийся вирус». Вирус желтой лихорадки был изолирован в 1927 г.

Особенности вирусов. Вирионы сферической формы, диаметром 40-50 нм, содержат 66 % белков, 17 % липидов, 12 % карбогидратов и 5 % РНК. РНК длиной 10,2_*10³ нуклеотидов. Геном имеет 1 открытую рамку считывания, которая кодирует 11 вирусных белков, из которых С, М, Е – структурные белки и 8 неструктурных белков (NS1, NS2A, NS2B, NS2K, NS3, NS4A, NS4B, NS5). NS1 – поверхностный белок, являющийся мишенью для антител при элиминации вируса; NS3 обладает активностью геликазы, протеазы и РНК-трифосфатазы, NS5 является РНК-полимеразой. Функция неструктурных белков NS2A, NS2B, NS4A, NS4B неясна.

Антигенная структура. Возбудитель представлен одним серотипом. Перекрестно реагирует с антителами к вирусу лихорадки Денге.

Резистентность аналогична таковой для вирусов русского весенне-летнего энцефалита.

Культивирование. Вирусы желтой лихорадки репродуцируются в первичных и перевиваемых культурах клеток животных (свиньи, хомяка, кролика, обезьяны, кур) и человека (HeLа, КВ, Детройт-6), в клетках комаров рода Aedes, в мозге новорожденных мышей, в куриных и утиных эмбрионах. В куриных фибробластах под агаром на 4-й день после заражения образуются бляшки до 5 мм в диаметре.

Эпидемиология. Ареал вируса желтой лихорадки – тропические регионы Южной Америки и Африки. В Азии желтая лихорадка не встречается, так как есть перекрестный иммунитет с вирусом лихорадки Денге. Резервуаром и источником инфекции являются приматы, в крови которых содержатся вирусы желтой лихорадки. Механизм передачи инфекции к человеку – трансмиссивный (переносчики – комары родов Aedes и Haemagogus). При городском цикле желтой лихорадки источником инфекции является больной человек и вирусоноситель, а переносчиками – комары.

Патогенез. Инокулированный при укусе комара вирус по лимфатическим сосудам достигает лимфатических узлов, в которых размножается во время инкубационного периода. Через несколько дней вирус поступает в кровь и распространяется по всему организму, поражая, главным образом, печень, почки, селезенку, костный и головной мозг. Вирус тропен к эндотелию сосудов этих органов. Размножение вируса в эндотелии и клетках внутренних органов сопровождается их дистрофическими, некробиотическими и воспалительными изменениями. В цитоплазме пораженных клеток обнаруживаются ацидофильные включения – тельца Торреса, в клетках печени – тельца Каунсильмена. Они возникают вследствие размножения вируса в клетках и изменений в их ядрах.

Клиника. Желтая лихорадка характеризуется внезапным началом, двухфазной лихорадкой, головной болью, миалгиями, тошнотой, геморрагическим синдромом, желтухой и печеночно-почечной недостаточностью. В продромальном периоде больной является источником инфекции для комаров. В настоящее время летальность от желтой лихорадки приближается к 5 %.

Иммунитет. Протективные антитела классов Ig М и G появляются в крови больных на 5-7-й день болезни (8-14-й день после инфицирования). Ig G циркулируют в течение 35 лет, возможно, в течение всей жизни.

Лабораторная диагностика аналогична таковой при русском весенне-летнем энцефалите.

Лечение. Используются интерфероны.

Профилактика. Специфическая профилактика желтой лихорадки проводится живой аттенуированной культуральной вакциной, полученной Матиусом и коллегами в 1927 г. методом пассажей на культурах тканей куриных эмбрионов. Вакцинный штамм – 17Д (Дакар). У этого штамма имеется остаточная вирулентность, в силу чего при прививке вначале вводят иммунную сыворотку человека. Вакцина вводится подкожно, 1 доза должна содержать не менее 1000 LD₅₀. Ревакцинацию следует проводить 1 раз в 20 лет. Иммунитет развивается через 7-10 дней. Вакцинация проводится в эндемических по желтой лихорадке районах, а также лицам, которые направляются в данные районы. Разрабатывается генно-инженерная вакцина. Неспецифическая профилактика желтой лихорадки включает борьбу с комарами рода Aedes. Для предупреждения распространения комаров самолеты и корабли, посещающие эндемические по желтой лихорадке местности либо местности, где распространен Aedes aegypti, подвергаются обязательной дезинсекции. Непривитые лица из эндемических районов подвергаются карантину в течение 9 дней.