
- •На правах рукописи
- •Конопельцев Игорь Геннадьевич
- •Озонотерапия и озонопрофилактика
- •Воспалительных заболеваний и функциональных расстройств матки у коров
- •Сокращения и условные обозначения
- •1 Общая характеристика работы
- •1.1 Актуальность темы.
- •1.8 Основные положения выносимые на защиту:
- •2 Материал и методы исследований
- •3 Результаты собственных исследований
- •3.1 Распространение заболеваний половых органов у коров при разных системах содержания
- •3.2 Сократительная активность и хемореактивность миометрия коров
- •3.3 Микрофлора матки коров при послеродовом эндометрите и её чувствительность к антибиотикам
- •3.4 Разработка способа терапии и профилактики эндометрита у коров с применением озонированного рыбьего жира
- •3.5 Разработка способа терапии больных эндометритом коров с применением озонированного растительного рафинированного масла
- •3.6 Разработка способа профилактики и терапии субинволюции матки и эндометрита у коров с использованием озонированного изотонического раствора хлорида натрия при парентеральном введении
- •4 Выводы
- •5 Практические предложения
- •6 Список опубликованных работ по теме диссертации
3.5 Разработка способа терапии больных эндометритом коров с применением озонированного растительного рафинированного масла
Озонированное растительное рафинированное масло, приготовленное путём барботирования 250,0 мл исходного сырья озоно-кислородной смесью с концентрацией в ней озона 20 мг/л обладает более высокими антимикробными свойствами в сравнении с 10 мг/л и 15 мг/л. Повышение концентрации озона в озоно-кислородной смеси до отметки 25 мг/л имело равноценные показатели по антимикробной активности.
При оценке антимикробного действия озонированного рафинированного растительного масла (ОРРМ) в качестве тест-культур использовались штаммы Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli озонированное растительное рафинированное масло антимикробным действием в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов. Его действие в течение 24 часов снижает количество жизнеспособных микробных клеток на 4-5 порядков. Растительное рафинированное масло после барботированния озоно-кислородной смесью способствует усилению регенеративных процессов, в рекомендуемых дозах не обладает острой и хронической токсичностью и относится к группе низко реактогенных средств.
Результаты клинического испытания ОРРМ при остром послеродовом гнойно-катаральном эндометрите у коров представлены в таблице 4.
Таблица 4 - Сравнительная лечебная эффективность озонированного растительного рафинированного масла и суспензии фуразолидона при остром эндометрите у коров
Показатель |
ОРРМ |
10 %-я суспензия фуразолидона |
|
|
Количество коров |
25 |
25 |
|
|
Выздоровело, % |
88,0 |
84,0 |
|
|
Количество введений |
5,4+0,3 |
5,6+0,4 |
|
|
Оплодотворилось, % |
90,9 |
85,7 |
|
|
Коэффициент оплодотворения |
1,6+0,16 |
2,2+0,20* |
|
|
Количество дней бесплодия |
69,8+5,5 |
88,4+7,2* |
|
* P<0,05.
Из таблицы 4 видно, что при назначении озонированного растительного рафинированного масла клиническое выздоровление наступало у 88% животных, а при использовании с этой целью 10%-ной суспензии фуразолидона – у 84,0%. Кроме того, предлагаемый способ повышает оплодотворяемость коров на 5,2% при более низком коэффициенте (на 0,6; P<0,05) и снижает период бесплодия на 18,6 дня (P<0,05).
3.6 Разработка способа профилактики и терапии субинволюции матки и эндометрита у коров с использованием озонированного изотонического раствора хлорида натрия при парентеральном введении
Барботирование озоно-кислородной смесью 1000,0 мл 0,9%-го раствора хлорида натрия температурой +250С проводили в пластиковой бутылке посредством керамического распылителя. При этом, степень насыщения физиологического раствора озоном была прямопропорциональна его количеству в барботируемой смеси на выходе медицинского генератора озона. Период полураспада озона в изотоническом растворе хлорида натрия при различных исходных его значениях составлял в среднем 30 минут. При этом динамика распада растворенного озона в физиологическом растворе протекала неравномерно. В первые 30 минут распад озона отличался более высокой интенсивностью, а в последующие полчаса резко замедлялся и количество озона уменьшалось всего лишь на 17%.
Величина антимикробной активности озонированного физиологического раствора в отношении музейных штаммов грампозитивных и грамнегативных микроорганизмов прямопропорциональна концентрации растворённого в нём медицинского озона.
Через 48 часов, после третьей внутривенной инфузии ОФР отелившимся коровам, в крови наблюдается достоверное повышение уровня гемоглобина на 2,8% (P < 0,001), количества лимфоцитов на 14,7% (P < 0,05), эритроцитов на 9,9% и коэффициента их деформируемости (IR) на 40,1 % (P<0,001), сегментоядерных нейтрофилов на 7,7%, эозинофилов на 2,2% и моноцитов на 20%, а также снижение числа лейкоцитов на 5%, юных и палочкоядерных нейтрофилов соответственно на 50% и 26,9%, базофилов на 40%. Кроме того, наблюдалось увеличение γ-глобулинов на 32,3% (P<0,01), бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови соответственно на 29,9% (P<0,05) и 32,3% (P<0,001), а также повышение антиоксидантной активности сыворотки крови (Decrement) на 5,8% (P<0,02). Поступивший в сосудистое русло озон обусловил тенденцию увеличения в крови общего белка на 5,8%, α - и β-глобулинов соответственно на 9,9% и 5,9%, произошло усиление процесса фагоцитоза через активацию нейтрофилов на 12,8%.
Следовательно, внутривенное введение 2,0-2,5 мг/л озона растворенного в 0,9%-ном растворе хлорида натрия оказывает положительное влияние на процессы ПОЛ и АОЗ с одновременной активацией факторов клеточной и гуморальной защиты организма при этом улучшается микрогемоциркуляция и не оказывается отрицательного воздействия на процесс гемопоэза в кроветворных органах.
Внутривенное введение озонированного физиологического раствора оптимизирует показатели сократительной деятельности миокарда у коров за счёт улучшения реологических свойств крови и метаболических процессов в сердечной мышце.
Сравнительная оценка влияния озонированного раствора Кребса и обзидана на параметры сократительной активности миометрия больных эндометритом коров приведена в таблице 5.
Как показывает цифровой материал таблицы 5, озон обладает β - адреноблокирующим эффектом. В присутствии ОРК частота сокращений гладких мышц по сравнению с исходным значением увеличилась в 1,6 раза (Р0,05), а в присутствии обзидана в 2,4 раза (Р0,001). В ответ на обработку ОРК амплитуда сокращений миометрия повысилась в 2,1 раза (Р0,05), а на обработку обзиданом в 1,1 раза. Суммарная сократительная активность мышечных структур под воздействием ОРК увеличилась в 3,2 раза (Р 0,01), а под воздействием обзидана в 3,7 раза (Р 0,01).
Таблица 5 - Сократительная активность миометрия больных
эндометритом коров на фоне адреналина под влиянием озонированного
раствора Кребса и обзидана (n=14)
Показатель |
Исходные значения |
На фоне ОРК + адреналин, 10-6 г/л |
Исходные значения |
На фоне обзидана + адреналин, 10-6 г/л |
Частота сокращений / 10 минут |
7,41,3 |
12,01,7* |
6,71,5 |
16,21,4*** |
Амплитуда сокращений, мН |
3,90,7 |
8,41,4* |
9,42,6 |
10,71,9 |
ССА, мН/10 мин |
29,87,5 |
95,621,6** |
51,012,3 |
188,841,0** |
*Р 0,05 по отношению к исходному значению; **Р 0,01 по отношению к исходному значению; ***Р 0,001 по отношению к исходному значению.
Оценивая полученный эффект стимуляции работы миометрия на фоне насыщенного озоном раствора Кребса можно заключить, что озон не уступает по данному показателю одному из представителей препаратов обладающих специфическим β-адреноблокаторным действием.
Результаты испытания показали (таблица 6), что трехкратное применение ОФР и окситоцина профилактирует возникновение субинволюции матки и послеродового эндометрита у коров, в сравнении с животными, которым инъецировали физиологический раствор с окситоцином, в 2 раза.
Таблица 6 - Эффективность сочетанного применения ОФР и окситоцина в
профилактике субинволюции матки и эндометрита у коров
Группы коров |
Применяемые препараты |
Количество коров |
Заболело |
|||
субинволюцией |
эндометритом |
|||||
животных |
% |
животных |
% |
|||
1 |
ОФР + окситоцин |
26 |
2 |
7,7 |
4 |
15,3 |
2 |
ФР + окситоцин |
26 |
4 |
15,4 |
8 |
30,7 |
3 |
Без препаратов |
26 |
9 |
34,6 |
11 |
42,3 |
Экономический эффект профилактических мероприятий на рубль затрат составил 49,7 рубля.
Через 6 часов после внутривенной инфузии ОФР с 20 ЕД окситоцина амплитуда, число сокращений за 10 минут, их продолжительность и контракционный индекс соответственно увеличились в 2,1 раза, в 1,5 раза, в 1,2 раза и 4 раза. Назначение животным изотонического раствора хлорида натрия с окситоцином сопровождалось менее значительными изменениями в сторону повышения амплитуды, числа и длительности сокращений, а также контракционного индекса. Совместное применение ОФР и окситоцина уменьшает период инволюции на 5,4 дня (P<0,001), коэффициент оплодотворения на 0,3 (P<0,05) и период бесплодия на12,9 дня.
3.7 Результаты научно-производственных опытов по определению эффективности сочетанного применения озонированного рыбьего жира, озонированного рафинированного растительного масла и озонированного физраствора при эндометрите у коров
Результаты эффективности сочетанного применения ОРЖ и ОФР при остром послеродовом эндометрите у коров, возникшего на фоне нормального отёла, субинволюции матки и после отделения последа показаны в таблице 7.
Данные таблицы 7 указывают, что в течение 15-ти дневного срока использование ОРЖ и ОФР обусловило клиническое выздоровление 96,4% коров, заболевших после нормального отела, у 80% - после задержания плодных оболочек и у 85,7% - на фоне субинволюции матки. Анализ оплодотворяемости у выздоровевших подопытных коров показал, что в первом, во втором и третьем случаях в течение 4-х месяцев после отёла стали стельными соответственно 92,5 %, 75,0 % и 83,3 % из них, а это на 4,3 %, 11,4 % и 10,6 % больше, чем соответствующие величины у контрольных коров.
Таблица 7 - Показатели эффективности озонотерапии при остром
послеродовом эндометрите
Показатель |
Заболело коров эндометритом … |
|||||
после нормального отела |
после задержания последа |
на фоне острой субинволюции матки |
||||
опыт |
контроль |
опыт |
контроль |
опыт |
контроль |
|
Больных коров |
28 |
28 |
15 |
15 |
14 |
14 |
Выздоровело коров, % |
96,4 |
89,2 |
80,0 |
73,3 |
85,7 |
78,6 |
Оплодотворилось, % |
92,5 |
88,0 |
75,0 |
63,6 |
83,3 |
72,7 |
Индекс оплодотворения |
1,6+ 0,3 |
1,8+ 0,2 |
1,7+ 0,2 |
2,1+ 0,4 |
2,2+ 0,2 |
3,0+ 0,3 |
Кол-во дней бесплодия |
47,1+8,3 |
66,2+ 9,7 |
94,3+ 8,6 |
117,5+ 7,0 |
77,2+ 8,4 |
99,1+ 12,7 |
Коэффициент оплодотворяемости животных опытной группы излечившихся от эндометрита, возникшего после нормального отела, составил 1,6+0,3, после задержания последа – 1,7+0,2 и на фоне острой субинволюции матки – 2,2+0,4. Данные показатели в сравнении с контролем были ниже соответственно на 0,2, 0,4 и 0,8. Количество дней бесплодия у коров, подвергнутых комплексной озонотерапии, оказалось минимальным и составило согласно очередности 47,1+8,3, 94,3+8,6 и 77,2+8,4, что на 19,1, 23,2 и 21,9 дня меньше, чем у контрольных животных.
Результаты применения ОРЖ и ОФР в составе комплексной терапии коров, больных острым эндометритом и цервицитом представлены в таблице 8.
Таблица 8 - Эффективность комплексной озонотерапии при эндометрите,
сопряженным с цервицитом у коров (n = 16)
Показатель |
Опыт |
Контроль |
Количество введений |
5,2+0,3* |
6,4+0,5 |
Период лечения, дн. |
13,6+0,4* |
14,8+0,2 |
Выздоровело коров, % |
87,5 |
81,2 |
Оплодотворилось коров, % |
92,8 |
84,6 |
Коэффициент оплодотворения |
2,0+0,2 |
2,4+0,6 |
Дни бесплодия |
72,2+9,5* |
96,6+6,3 |
*P<0,05 - по отношению к контрольной группе.
Применение ОФР и ОРЖ в составе комплексной терапии обусловило наибольший процент выздоровления и оплодотворения коров с данной патологией. Для этого достоверно меньше потребовалось внутриматочных введений ОРЖ и был короче период лечения. У подопытных оплодотворившихся коров период бесплодия был на 24,4 дня (P<0,05) меньше и в среднем после двукратного осеменения они становились стельными.
Немедикаментозный способ комплексной озонотерапии оказал корригирующее влияние на процессы белкового и липидного обменов, а также иммунобиологическое состояние организма коров. При этом в крови выздоровевших животных произошло достоверное увеличение альбуминов на 48,3%, α-глобулинов на 44,4% и бактерицидной активности ее сыворотки на 28,7%. На данном фоне наблюдалось достоверное снижение количества общих иммуноглобулинов на 33%, β-глобулинов на 31,2%, γ-глобулинов на 24,7%, уровня циркулирующих иммунных комплексов С3 и С4 на 29,5% и 41,5%, а также их инфекционности на 25%. Парентеральное введение растворенного озона сопровождалось достоверной ингибицией процесса ПОЛа (светосумма радикалов снизилась на 15,6%, а интенсивность вспышек на 12,2%) и одновременной активацией звеньев АОЗ (Decrement увеличился на 42,8%). Экономическая эффективность сочетанного применения ОРЖ и ОФР в качестве лечебных процедур при остром эндометрите у коров сопряжённым с цервицитом на рубль затрат составила 25,5 рубля.
Результаты сочетанного применения ОФР и озонированного растительного рафинированного масла при остром послеродовом гнойно-катаральном эндометрите представлены в таблице 9.
Таблица 9 - Эффективность сочетанного применения озонированно- го растительного масла и озонированного физраствора при остром
эндометрите коров
Показатель |
ОРРМ+ОФР |
10 %-я суспензия трициллина + глюкоза |
|
|
Количество коров |
19 |
19 |
|
|
Выздоровело, % |
100 |
100 |
|
|
Количество внутриматочных введений |
4,7+0,23 |
4,8+0,27 |
|
|
Оплодотворилось, % |
94,7 |
89,5 |
|
|
Оплодотворилось после 1-го осеменения, % |
72,7 |
62,5 |
|
|
Коэффициент оплодотворения |
1,4+0,20 |
1,6+0,26 |
|
|
Количество дней бесплодия |
40,3+6,1 |
58,0+8,9 |
|
Из данных таблицы 9 видно, что при одинаковом количестве внутриматочных введений оплодотворяемость коров после озонотерапии была на 5,2%, а после первого искусственного осеменения на 10,2% выше по отношению к коровам контрольной группы. Коэффициент оплодотворения имел тенденцию к снижению на 0,2, а период бесплодия был короче на 17,7 дня.
Экономический эффект на рубль затрат от сочетанного применения озонированного растительного рафинированного масла и озонированного физиологического раствора составил 33,4 рубля.
Результаты комплексной терапии коров, больных хроническим катарально-гнойным эндометритом, представлены в таблице 10.
Из цифровых данных таблицы 10 видно, что лечебный эффект от применения раствора новокаина, суспензии АСД-2 на тетравите, синэстрола, озонированного рыбьего жира и ОФР на 11% превосходит таковой показатель в контроле. Кроме того, оплодотворяемость коров в этой группе была выше на 8,9%, а коэффициент меньше на 0,3. В среднем число дней от начала лечения и до наступления стельности у подопытных животных было достоверно на 23,9 меньше, чем у коров контрольной группы.
При исчезновении признаков хронического воспаления по отношению к исходным значениям наблюдали увеличение на 7,3% ( Р<0,001)
Таблица 10 - Сравнительная эффективность озонированного рыбьего жира и диоксидина при хроническом эндометрите у коров
Показатель |
ОРЖ |
Диоксидин |
Количество коров в группе |
18 |
18 |
Период бесплодия до лечения, дней |
97,110,1 |
92,813,2 |
Наступило клиническое выздоровление,% |
88,8 |
77,8 |
Оплодотворилось коров из числа выздоровевших, % |
87,5 |
78,6 |
Коэффициент оплодотворения |
1,80,1 |
2,10,1 |
Кол-во дней от начала лечения до стельности |
44,63,2 |
68,58,9* |
*Р < 0,05.
общего белка, на 4,1% ( Р>0,1) альбуминов, а α- и γ-глобулинов соответственно на 7,1% (Р>0,1) и 26,2% (Р<0,01).На данном фоне в 1,7 раза (Р<0,001) снизился уровень β-глобулинов и возросло количество в крови опсонинов антигенов на 22,4% (Р<0,001). Повышение в крови иммуноглобулинов активизировало процесс образования комплексов антиген-антитело одинаково в 1,7 раза (Р<0,05 и Р<0,01) и привело к увеличению их размера на 6,7%. Параллельно наблюдалось повышение бактерицидной (в 1,6 раза; Р<0,01) и лизоцимной (в 1,2 раза; Р<0,05) активности сыворотки крови. Затуханию воспаления в слизистом слое матки, повышению защитных функций организма способствовало достоверное ингибирование ПОЛ (на 14,1%) и активирование систем АОЗ (на 12%).
Из достоверных отличий в изучаемых показателях крови выздоровевших и клинически здоровых коров следует отметить более низкое содержание альбуминов (на 18,8%), бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови соответственно на 27,2% и 25,7%, а также на 39,3% было ниже значение I max и, наоборот, на 23,7% оставалось на более высоком уровне количество β-глобулинов.