3.3 Микрофлора матки коров при послеродовом эндометрите и её чувствительность к антибиотикам

В результате выполненных бактериологических исследований установили, что в 96,6% в экссудате матки при остром воспалении эндометрия присутствуют микроорганизмы. Неспецифические возбудители заболевания, с учётом их специфических свойств, были отнесены в 23,2% к стафилококкам (Staph. aureus, Staph. saprophyticus, Staph. epydermidis), в 23,2% - к кишечной палочке, в 27,5% - к стрептококкам (Str. pyogenes, Str. pneumoniae), в 13,9% - к споровым анаэробам (Bac. subtilis, Bas. cereus), в 11,1% - к вульгарному протею и в 1,1% - к синегнойной палочке. Количество микробных клеток в отдельных пробах экссудата колебалось от (5,6+0,2)х10⁴ до (3,2+0,6)х10⁶. В эксперименте показали, что в 95,7% случаев культуры микробных клеток были смешенными и лишь в 4,3% случаев в виде монокультур.

В результате микологических исследований доказали, что в 8,3% случаев в воспалительный процесс могут включаться грибы из рода Mucor, Aspergillus, Penicillinum, Candida, Trichophyton.

Изолированная микрофлора была наиболее чувствительна к стрептомицину, неомицину, гентамицину и резистентна к пенициллину, линкомицину, канамицину и эритромицину. Но всё же использование в лечебной практике пусть даже высоко активных антибиотиков несёт в себе определённую экологическую опасность.

3.4 Разработка способа терапии и профилактики эндометрита у коров с применением озонированного рыбьего жира

Технология приготовления озонированного рыбьего жира (ОРЖ) заключается в барботировании рыбьего жира озоно-кислородной смесью. Предварительно рыбий жир наливают в чистые стеклянные флаконы вместимостью 500 мл в количестве 400,0 мл, закрывают пробкой из черной резины и вставляют две иглы различной длины. Иглу 20198 (И-33) соединяют с полихлорвиниловой (ПХВ) трубкой со штуцером озонатора, через которую пропускают озоно-кислородную смесь. Через иглу типа 2055 осуществляют выпуск отработанного газа в деструктор прибора посредством трубки ПХВ.

Озонированный рыбий жир, приготовленный путём барботирования в течение 60 минут 400,0 мл исходного сырья озоно-кислородной смесью с концентрацией в ней озона 10 мг/л, обладает более высокими антимикробными свойствами в сравнении с 5 мг/л и 8 мг/л.

Выбранный режим барботирования озоно-кислородной смесью рыбьего жира приводит к определённому изменению процентного соотношения в жирнокислотном составе и прежде всего за счёт снижения линолевой кислоты (на 51,1%).

Озонированный рыбий жир является нетоксичным и низко реактогенным, оказывает положительное влияние на регенеративный процесс и не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием. Его антимикробные свойства по отношению к грамположительным и грамотрицательным микроорганизмам музейных и полевых штаммов проявляются по истечению 30 минут совместного инкубирования, которые остаются стабильными в течение шести месяцев при температуре хранения 4+2⁰С.

Результаты электронной микроскопии показали, что ОРЖ вызывает локальные повреждения биополимеров клеточной стенки и цитоплазматической мембраны, которые заключаются в утрате этими структурами на отдельных участках типичного слоистого строения, что, несомненно, способствует нарушению избирательной проницаемости мембран. Развитие последующего лизиса микроорганизмов, очевидно, является следствием активизации собственных ферментных систем клетки в результате указанных структурных нарушений. Кишечная палочка отличается от золотистого стафилококка большей чувствительностью к ОРЖ. Отмеченное явление, по всей вероятности, обусловлено наличием у St. aureus более массивной клеточной стенки и отсутствием у него периплазматического пространства, являющегося у грамотрицательных бактерий местом локализации многих ферментных систем, обеспечивающих, в том числе, транспортные функции и осморегуляцию.

Установили, что при внутриматочном введении озонированный рыбий жир вызывает активизацию моторики матки, которая выражается в увеличении амплитуды сокращений её мышечных структур, повышении числа сокращений и их продолжительности. Через 3 часа после инстилляции ОРЖ средняя высота амплитуды сокращений по сравнению с исходным значением возросла в 7 раз (Р<0,01), частота сокращений увеличилась на 6,5%, а их продолжительность на 21% (Р<0,001) . Контракционный индекс в 9,5 раза был выше своей начальной величины. Через 6 часов от момента начала экспериментальной работы величины всех изучаемых показателей по отношению к предыдущему сроку исследования хотя и снизились, но амплитуда сокращений и их продолжительность соответственно в 3,2 раза (Р<0,001) и на 9,4% (Р<0,01) превосходили изначальные величины. При этом частота сокращений была практически равной изначальной, что и позволило контракционному индексу в 3,5 раза быть выше по отношению к исходному значению. По истечению 24 часов амплитуда сокращений по-прежнему превосходила свой исходный показатель в 1,9 раза (Р < 0,01), но частота сокращений уменьшилась на 13,3% при идентичности в продолжительности сокращений. Поэтому за счёт сохранившейся разницы в величине амплитуды сокращений контракционный индекс всё ещё в 1,6 раза превосходил исходное значение.

Клиническое выздоровление коров на фоне использования озонированного рыбьего жира сопровождалось отчётливо выраженными явлениями репарации в эндометрии, и при этом большая часть маточных желёз полностью восстанавливалась, а в других наблюдался активный процесс деления эпителиальных клеток.

Сопоставляя показатели крови коров в начале развития болезни и при наступлении клинического выздоровления, на фоне озонотерапии, следует отметить, что наиболее существенные сдвиги в сторону снижения, произошли в количестве лейкоцитов (на 5,8 %) и лимфоцитов (на 7,7%), α- глобулиновой фракции белков (на 40,2 %; Р<0,001) и γ-глобулинов (на 8,7%), иммуноглобулина G (на 6,1%), иммуноглобулина М и иммуноглобулина А в одинаковой степени (на 16,7%), показателя светосуммы радикалов (S) (на 11%) и показателя максимальной интенсивности свечения (I_max) липидных субстратов (на 10,5%). Вместе с этим наблюдалось повышение уровня гемоглобина с 92,90,14 до 93,60,04 г/л (Р<0,001) и общего белка с 72,10,27 до 78,20,16 г/л. Увеличилось и количество эритроцитов на 6%, нейтрофилов на 18,5% и их поглотительная активность на 21,6%, альбуминов на 9,3% (Р< 0,05), бета- глобулинов на 19,5% (Р<0,01), лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови возросли соответственно на 62,7% (Р<0,001) и 4,7%, а показатель АОЗ - Decrement на 7,1%. Изучаемые показатели крови у подопытных животных по истечению десяти дней после клинического выздоровления от изначальных показателей имели отличия в сторону повышения по уровню гемоглобина (на 1,2%) и общего белка (на 11,7%; Р < 0,001), числу эритроцитов (на 10%), нейтрофилов (на 25,3%; Р<0,05) и их фагоцитарной активности (на 13%), альбуминов (на 7 %), β-глобулинов (на 5%). Имели более высокие цифровые значения показатели ЛАСК (на 26,6%) и БАСК (на 2,4%), иммуноглобулин G ( на 1,4%), иммуноглобулин М (на 5,5%), иммуноглобулин А (на 33,3% ; Р < 0,05) и Decrement (на 7,1%). Разницу в сторону уменьшения отмечали в количестве лейкоцитов (на 5,8%), лимфоцитов (на 10,1%), α-глобулинов (на 18,7%; Р<0,001), γ-глобулинов (на 4,8%), недоокисленных продуктов ПОЛ (на 11,3%; Р < 0,05), I_max (на 10,5%).

Указанные изменения в содержании гемоглобина, эритроцитов, общего белка и белковых фракций, показателей перекисного окисления липидов, бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови, а также активизация фагоцитоза свидетельствуют о положительном влиянии ОРЖ на процесс клинического выздоровления высокопродуктивных коров, больных острым послеродовым гнойно-катаральным эндометритом. Однако следует отметить, что анализ динамики в морфологическом составе, иммуннобиохимических показателях крови у подопытных животных показал, что местное применение озонированного рыбьего жира (моноозонидотерапия) лишь оказывает благоприятное влияние на затухание локального воспалительного процесса в матке и не обуславливает существенное снижение маркеров патогенеза - гидроперекисей через активацию АОЗ в макроорганизме.

Эффективность применения ОРЖ при остром послеродовом гнойно-катаральном эндометрите у коров показана в таблице 2.

Таблица 2 - Терапевтическая эффективность озонированного рыбьего жира при остром послеродовом эндометрите у коров

Показатель	ОРЖ	10 %-я суспензия трициллина
Количестиво больных коров	37	37
Выздоровело, коров / %	34 / 91,9	32 / 86,5
Количество введений	5,2+0,4	5,4+0,3
Оплодотворилось, коров / %	30 / 88,2	27/ 84,4
Оплодотворилось после 1-го осеменения, коров / %	19 / 63,3	12 / 44,4
Коэффициент оплодотворения	1,6+0,1**	2,0+0,1
Количество дней бесплодия	56,9+6,3	73,7+9,1
Среднесуточный удой в период болезни, кг	18,2+1,2	17,7+0,9

**Р<0,01.

Из представленных в таблице 2 данных видно, что процент клинического выздоровления и оплодотворения коров при использовании ОРЖ был выше на 5,4 и 3,8, чем в результате применения с этой целью 10 %-ной суспензии трициллина. Количество дней бесплодия на одно животное в группе с применением ОРЖ было меньше на 16,8 дня, а среднесуточный удой молока выше на 0,5 кг.

Экономическая эффективность лечебных процедур с использованием озонированного рыбьего жира на рубль затрат составила 64,46 рубля.

Результаты эксперимента по определению терапевтической эффективности озонированного рыбьего жира в составе комплексной схемы при субклиническом эндометрите коров представлены в таблице 3.

Таблица 3 - Эффективность лечения больных субклиническим эндометритом коров озонированным рыбьим жиром

Показатель	ОРЖ	Диоксидин
Количество коров в группе	24	24
Период бесплодия до лечения, дн.	64,47,2	68,110,3
Коэффициент оплодотворения после лечения	1,50,1	1,90,3
Оплодотворилось после 1-го осеменения,%	66,6	58,3
Оплодотворилось всего,%	91,7	83,3
Количество дней от начала лечения до стельности	29,77,3	44,87,8

Как показывает цифровой материал таблицы 3, сочетанное применение озонированного рыбьего жира с раствором новокаина и суспензии АСД-2 на тривите, обладает более высокой эффективностью в сравнении с 1%-ным раствором диоксидина пролонгированного действия. Так, при использовании ОРЖ удалось восстановить воспроизводительную способность у 91,7% высокопродуктивных коров, больных латентной формой воспаления эндометрия, при этом 66,6% из них оплодотворились в первую половую охоту. Стельность у подопытных коров наступила при коэффициенте оплодотворения 1,8. Это позволило в сравнении с контрольными животными повысить оплодотворяемость при данной патологии на 8,4%, а после первого осеменения на 8,3% и снизить коэффициент оплодотворения на 0,4, а период бесплодия на 15,1 дня.

При профилактике острого послеродового эндометрита у коров установили, что однократное внутриматочное введение ОРЖ коровам после нормального отела предупредило развитие эндометрита у 90%, а после оперативного отделения последа – у 60%. Введение в полость матки фуразолидоновых палочек обеспечивало профилактический эффект соответственно у 81,1% и 53,9% животных. Более высокий результат в профилактике воспаления слизистой оболочки матки удалось добиться в результате двукратного использования ОРЖ в 1 и 3-й дни как после самопроизвольного (92,2%), так и оперативного отделения оболочек плода (69,7%).

После применения ОРЖ оплодотворяемость коров, не заболевших эндометритом, по первой опытной группе на фоне нормального течения родового процесса составила 91,7%, а оперативного отделения последа – 66,6%, что выше, чем у контрольных животных соответственно на 8,3% и 9,5%. Двукратное использование ОРЖ позволило добиться оплодотворения 97,2% коров после нормального отела и 75% после ручного отделения плодных оболочек. Коэффициент оплодотворения коров контрольной группы по окончанию профилактических процедур в случаях нормального отела составил 2,0, а после оперативного отделения оболочек плода 2,9, что соответственно выше в сравнении с животными первой опытной группы на 0,2 и 0,3. Коэффициент оплодотворения у животных второй опытной группы после самопроизвольного и оперативного отделения последа соответственно равнялся 1,4 и 2,1. Количество дней бесплодия у коров первой опытной группы в первом случае оказалось равным 45,8, а во втором – 75,9, что в 1,5 и 1,2 раза меньше, чем данные величины у контрольных животных. У коров второй опытной группы, где ОРЖ применяли двукратно после нормальных и патологических родов, период бесплодия в подгруппах был соответственно 39,9 и 64,8 дня.

Следовательно, внутриматочное введение ОРЖ на 27,5 – 53,3% снижает риск возникновения эндометрита у коров в послеродовой период и способствует оптимизации у них воспроизводительной способности.