
- •На правах рукописи
- •Конопельцев Игорь Геннадьевич
- •Озонотерапия и озонопрофилактика
- •Воспалительных заболеваний и функциональных расстройств матки у коров
- •Сокращения и условные обозначения
- •1 Общая характеристика работы
- •1.1 Актуальность темы.
- •1.8 Основные положения выносимые на защиту:
- •2 Материал и методы исследований
- •3 Результаты собственных исследований
- •3.1 Распространение заболеваний половых органов у коров при разных системах содержания
- •3.2 Сократительная активность и хемореактивность миометрия коров
- •3.3 Микрофлора матки коров при послеродовом эндометрите и её чувствительность к антибиотикам
- •3.4 Разработка способа терапии и профилактики эндометрита у коров с применением озонированного рыбьего жира
- •3.5 Разработка способа терапии больных эндометритом коров с применением озонированного растительного рафинированного масла
- •3.6 Разработка способа профилактики и терапии субинволюции матки и эндометрита у коров с использованием озонированного изотонического раствора хлорида натрия при парентеральном введении
- •4 Выводы
- •5 Практические предложения
- •6 Список опубликованных работ по теме диссертации
3.2 Сократительная активность и хемореактивность миометрия коров
У всех полосок, иссеченных из продольного слоя мускулатуры матки нестельных коров, зафиксирована спонтанная СА. Среднее число сокращений за 10 минут у продольных полосок составило 5,95+1,19, амплитуда которых достигала 0,15-0,26 мН/мг сырой массы полоски. Полоски изолированного миометрия нестельных коров обладали выраженной способностью изменять спонтанную СА под влиянием биологически активных веществ. Так, ацетилхолин (10-6г/мл) усиливал частоту спонтанных сокращений полосок на 75 % от исходного уровня, суммарную СА – на 53 %. Окситоцин (5х103МЕ/мл) повышал частоту фоновых сокращений полосок на 66 % от исходных значений, суммарную СА – на 92 %. Аналогичная картина получена в отношении ПГF 2α. Адреналин в концентрации 10-6 г/мл уменьшал частоту спонтанных сокращений полосок на 30%, амплитуду на 40% и суммарную СА на 45%. Кроме угнетения спонтанной СА адреналин (10-6 г/мл) на фоне действия ПГF 2a уменьшал частоту сокращения полосок на 40, амплитуду – на 55, суммарную активность – на 65%. На фоне действия окситоцина адреналин снижал параметры СА на 50, 50, 75% соответственно. Аналогичная картина отмечена при действии адреналина на СА полосок миометрия на фоне ацетилхолина. Значительная степень снижения СА полосок под влиянием адреналина свидетельствует о присутствии значительного количества β - адренорецепторов в мускулатуре рога матки нестельных коров, взаимодействие адреналина, с которыми вызывает угнетение СА матки. Это позволяет говорить о высокой β - адренореактивности миометрия нестельных коров.
Полоски мышц, иссеченные из циркулярного слоя матки по своим свойствам: способности к автоматии, сократимости, хемореактивности и β - адренореактивности не отличались от продольных полосок. Это означает, что в функциональном плане мышечная стенка матки нестельной коровы является гомогенным образованием.
Вызванная СА у циркулярных полосок гладких мышц шейки матки коров появляется только в ответ на действие ацетилхолина (пороговая концентрация 10-8 г/мл). Амплитуда сокращений составляет 0,18 мН/мг сырой массы полоски. В ответ на воздействие других веществ: окситоцина, ПГF2α и адреналина у полосок не зафиксировали генерацию СА. Следует отметить, что ни адреналин, ни ПГF 2a каждый в отдельности не вызывали СА миоцитов шейки матки нестельных коров, а при совместном воздействии (адреналин на фоне ПГF 2a) вызывали у мышц шейки матки сократительную активность.
У стельных коров со сроком стельности не более 4-х месяцев, полоски, иссеченные из продольной мускулатуры матки, обладали спонтанной СА только в 30% случаев. Полоски от животных со сроком беременности 5 и более месяцев не обладали спонтанной СА, что свидетельствовало о потере способности к автоматии у мускулатуры рога матки коров с увеличением срока гестации. Среднее число спонтанных сокращений на 10-минутном интервале у полосок составило 4,80±0,72.
Стимулирующее дозозависимое влияние на СА продольных полосок рога матки стельных коров оказывали ацетилхолин, окситоцин и ПГF 2a. Оно проявлялось в повышении исходного тонуса, учащении и повышении амплитуды спонтанных сокращений, а при их отсутствии - в генерации фазных сокращений. Адреналин, как и на мускулатуре рога матки нестельной коровы, вызывал снижение всех параметров СА. На продольных полосках рога матки стельных коров адреналин угнетал не только спонтанную СА, но и вызванную окситоцином, ацетилхолином и ПГF 2a. Удаление адреналина сопровождалось восстановлением СА. Например, на фоне действия ПГF 2a (10-7 г/мл) адреналин в концентрации 10-6 г/мл угнетал частоту сокращений на 70% от исходного уровня, амплитуду на 90% и суммарную активность на 92% (достоверное угнетение по всем параметрам). На фоне ацетилхолина (10-6 г/мл) адреналин (10-6 г/мл) ингибировал частоту сокращений на 57%, амплитуду - на 56% и суммарную СА - на 66%; на фоне окситоцина (5х10-3 МЕ/мл) - на 35%, 50% и 58% соответственно. Эти данные свидетельствуют, как и в случае с миометрием нестельной коровы, что у стельных коров мускулатура рога матки имеет высокую β - адренореактивность.
Полоски мускулатуры из циркулярного слоя рога матки, в отличие от продольного, при стельности обладали более низкой способностью к автоматии, низкой сократимостью – в 2-3 раза, не повысили свою чувствительность к окситоцину и ПГF 2a. На основании этого можно заключить, что при беременности у коров возникает функциональная гетерогенность мышечной стенки матки.
Циркулярный слой мускулатуры шейки матки стельных коров не обладал способностью генерировать спонтанные сокращения, т.е. у него отсутствовала способность к автоматии. Появление сократительной активности у циркулярной мускулатуры шейки матки стельных коров вызывали: ацетилхолин (пороговая концентрация 10-8 г/мл); окситоцин (в максимальной концентрации – 5 мЕД/мл) и адреналин (пороговая концентрация 10-8 г/мл), который в ранее приведенных случаях выступал ингибитором СА. Свой стимулирующий эффект адреналин сохранял на фоне СА миоцитов шейки матки, вызванной ацетилхолином, окситоцином и на фоне их рефрактерности к ПГF 2a.
Продольный слой мускулатуры рога матки коров, больных эндометритом, обладает частичной способностью к автоматии (73,3%). Кроме того, наблюдается уменьшение сократимости, в сравнении с миометрием нестельных коров (таблица 1).
Таблица 1- Показатели автоматии мускулатуры рога матки коров
Полоски миометрия от коров |
Количество полосок |
Полоски, обладающие ССА, % |
Число сокращений за 10 минут |
Амплитуда, мН |
Нестельных здоровых |
27 |
100,0 ± 0,0 |
5,95 ± 1,19 |
6,40 ± 0,95 |
Больных эндометритом |
30 |
73,3 ± 8,07* |
5,33 ± 0,92 |
3,92 ± 0,98 |
Примечание: *- различия с миометрием нестельных коров достоверны (р<0,05).
Продольные полоски мышц матки коров, больных эндометритом, обладают способностью изменять СА под воздействием различных биологически активных веществ. Тем не менее, сократимость полосок, иссеченных из матки коров с наличием воспаления в эндометрии, в 1,5-2 раза ниже, чем из матки от клинически здоровых нестельных животных.
Установили, что окситоцин, ацетилхолин и ПГF2α усиливали, а адреналин уменьшал частоту и амплитуду сократительной активности полосок мускулатуры матки коров, больных эндометритом (рисунок 1). Так, окситоцин в концентрации 5 МЕ/мл увеличивал от исходного уровня частоту сокращений в 1,8; амплитуду в 1,6; суммарную активность в 2,8 раза. Ацетилхолин в концентрации 1мкг/мл - в 1,9; 1,9; 3,1 раза соответственно. ПГF2α в концентрации 0,1мкг/мл - в 1,3; 1,3; 1,5 раза соответственно. Адреналин оказывал дозозависимое ингибирующее воздействие на СА миометрия. Так, в концентрации 0,1мкг/мл он вызывал снижение частоты в
1
,1
раза, амплитуды - в 1,4 раза и суммарной
СА в 1,2-1,3 раза. Более того, адреналин
(1мкг/мл) снижал тонус до 1,5 мН.
Кроме угнетения спонтанной сократительной активности полосок, адреналин снижал параметры вызванной сократительной активности. Например, на фоне действия окситоцина (5 мЕД/мл) адреналин в концентрации 1мкг/мл уменьшал частоту сокращений от исходного уровня в 1,4; амплитуду в 1,3 и суммарную активность в 1,5 раза. На фоне ацетилхолина (1 мкг/мл) - в 1,1; 1,4; 1,5 раза соответственно. На фоне ПГF 2a (0,1мкг/мл) - в 1,4; 1,5; 1,7 раза соответственно.
Данные о степени угнетения СА полосок адреналином, как и в случае с миометрием нестельных коров, свидетельствуют, что мускулатура матки коров, больных эндометритом, обладает высокой β-адренореактивностью. Основные отличия мускулатуры матки коров, больных эндометритом, от нестельных клинически здоровых заключаются в пониженной в 1,3 раза способности к автоматии и низкой сократимости – в 1,5-2 раза.
Таким образом, в регуляции сократительной активности миометрия коров независимо от физиологического состояния принимает активное участие β - АРИМ. Высокая β-адренореактивность миоцитов, имеющая место при функциональных расстройствах и воспалении матки, объясняет низкую результативность от использования известных миотропных средств, широко применяющихся в условиях практики. Поэтому включение в комплекс терапевтических мероприятий лекарственных веществ, способных блокировать β – адренорецепторы, позволит значительно повысить сократительную способность маточных структур и эффективность выполняемых процедур.