16. Взятие материала и исследование на бледную трепонему

С целью подтверждения диагноза раннего сифилиса проводят поиск бледных трепонем в активных элементахсифилиса (эрозии, язвы, эрозированные папулы, широкие кондиломы) или путем пункции лимфатических узлов.

Опыты окрашивания бледных трепонем утратили свое практическое значение в связи с тем, что бледная трепонемаплохо воспринимает анилиновые краски (откуда и название возбудителя - «бледная» трепонема). Кроме того, при окрашивании теряется очень важный дифференциально-диагностический признак бледных трепонем, позволяющий отделить их от вульгарных трепонем - это виды движения (поступательное, вращательное, волнообразное, маятникообразное, V-образное). Важной является также одинаковость размеров завитка, быстрота движения и приведенные выше виды движений. Поэтому во всех лабораториях проводят исследования бледной трепонемы в живом состоянии, используя для этого обычный световой микроскоп с темнопольным конденсором. При отсутствии такого конденсора делают затемнение кружком черной бумаги (диаметр 1,5 см), который вкладывается на нижнюю линзу развинченного конденсора так, чтобы между краями линзы и бумаги оставался свободный ободок (просвет 1,5-2 мм). Пройдя через это приспособление (конденсор), луч света принимает косое направление под острым углом в месте исследуемой капли серума, не попадает в объектив, чем достигается исследование в темном поле.

Поверхность эрозии, язвы, эрозированной папулы очищают стерильным ватным или марлевым тампоном, сухим или смоченным в изотоническом растворе натрия хлорида. Эту процедуру выполняют несколько раз, так как она имеет существенное значение в поиске бледных трепонем. Это приводит к очищению ячейки от чешуи, гноя, кровянистых корочек и оказывает содействие устранению сапрофитных трепонем, которые находятся на поверхности, тогда как бледная трепонема является внутритканевым паразитом. Потом прожаривают и охлаждают платиновую петлю и проводят ею по поверхности подозрительного элемента до появления серума, каплю которого переносят на предметное стекло, на которое предварительно нанесена капля изотонического раствора натрия хлорида (надо брать материал не на одно стекло, а на несколько). Это предметное стекло должно находиться в лотке, и с этими препаратами надо быть очень осторожными, так как это инфекционный материал. Капли изотонического раствора натрия хлорида надо делать небольшими посреди стекла, чтобы предотвратить загрязнение лотка, рук инфекционным материалом. Каплю взятого материала покрывают покровным стеклом размером 18x18 мм параллельно предметному стеклу, чтобы не порезать руки, не размазать материал по стеклу, не загрязнить руки, лоток. Осторожно прижимают покровное стекло к предметному стеклу спичкой для выдавливания пузырьков воздуха и немедленно доставляют в лабораторию для проведения исследования.

 

Исследование проводится под темнопольным конденсором (объектив х40, окуляр х10-15). На поверхность конденсора наносят каплю вазелинового масла или каплю воды. Сверху на предметный столик помещают препарат и рассматривают его. На темном фоне можно увидеть большое количество разных клеточных элементов и среди них - бледную трепонему, которая имеет вид светлых штопорообразных нитей. Она отличается от других трепонем характерными видами движения, равномерностью завитка. Этот способ очень простой и надежный. Только в том случае, когда видят характерные черты возбудителя (характерную особенность и все виды движений, плавность движения, равномерность завитков), делается вывод, что найдена бледная трепонема. В том случае, когда трепонемы есть, но они неподвижны, выдается заключение, что найдены неподвижные трепонемы, но не утверждается, что это бледные трепонемы. Таким образом, темнопольная микроскопия позволяет рассмотреть бледную трепонему в живом состоянии и дифференцировать ее от других трепонем.