Осаждение белков минеральными кислотами.

Концентрированные минеральные кислоты (азотная, серная, соляная) вызывают резкую дегидратацию белковых частиц и нейтрализацию их заряда, при этом происходит образование комплексных соединений. Все это ведет к необратимой денатурации белка. Ортофосфорная кислота не образует осадков с белками.

Осадки, вызванные действием минеральных кислот, растворяются в избытке серной и соляной кислот, но не растворяются в азотной.

Реактивы: а) раствор яичного белка; б) раствор растительного белка; в) серная кислота, концентрированная; г) азотная кислота, концентрированная; д) соляная кислота, концентрированная.

В три пробирки наливают по 1 мл кислот: в первую — серной, во вторую — азотной, в третью — соляной. Пробирки наклоняют под углом 45°С и осторожно (из пипетки) наслаивают по стенке раствор белка (пробирку держат отверстием от себя). На границе белка и кислоты появляется белое кольцо.

Пробирки осторожно встряхивают и добавляют в первую — избыток серной, во вторую — азотной, в третью— соляной кислоты. Осадки белка растворяются в серной и соляной кислотах, но не растворяются в азотной.

Реакция находит применение для быстрого ориентировочного определения белка в биологических жидкостях (например, в моче).

Осаждение белков органическими кислотами.

Органические кислоты необратимо осаждают белок из растворов. Различные кислоты отличаются по силе действия.

Наиболее эффективно и специфично действие сульфосалициловой и трихлоруксусной кислот. Под действием трихлоруксусной кислоты осаждаются только белки, сульфосалициловая же кислота, кроме белков, осаждает также высокомолекулярные продукты их распада — пептоны и полипептиды.

Реактивы: а) раствор яичного белка; б) раствор растительного белка; в) сульфосалициловая кислота, 10%-ный раствор; г) трихлоруксусная кислота, 10%-ный раствор.

В две пробирки наливают по 2 мл раствора белка и добавляют в первую 5—8 капель раствора сульфосалициловой, а во вторую — столько же раствора трихлоруксусной кислоты. В обеих пробирках белок выпадает в осадок.

Осаждение белков солями тяжелых металлов.

Белки осаждаются солями меди, свинца, ртути, цинка, серебра и других тяжелых металлов.

Характер взаимодействия белков с ионами тяжелых металлов сложен и многогранен. Это прежде всего образование комплексных соединений, нерастворимых в воде, но растворяющихся в избытке соли (кроме AgNO₃ и HgCl); соли тяжелых металлов, адсорбируясь на белковых мицеллах, изменяют их электрический заряд (вплоть до полной нейтрализации). Денатурация белков солями тяжелых металлов вызывается глубокими нарушениями вторичной и третичной структур макромолекул белка, изменением положения пептидных цепей, которое обусловливается в основном разрывом связей между ними (главным образом дисульфидных). Дисульфидным связям принадлежит видная роль в поддержании вторич­ной и третичной структур белка. Разрыв их влечет за собой изменение структур — необратимую денатурацию белка.

Растворение осадка белков в избытке соли объясняется явлением адсорбционной пептизации. Ионы металла, адсорбируясь на поверхности белковых мицелл, придают им положительные заряды. Одноименно заряженные мицеллы отталкиваются, что способствует их переходу из осадка в раствор.

Реактивы: а) раствор яичного белка; б) раствор растительного белка; в) ацетат свинеца, 5%-ньш раствор; г) нитрат серебра, 2,5%-ный раствор; д) хлорид железа 5%-ный раствор, е) сульфат меди, 5%-ный раствор.

В четыре пробирки наливают по 1—2 мл раствора белка и по каплям добавляют растворы солей: в первую — ацетата свинца, во вторую — сульфат меди, в третью — хлорида железа, в четвертую — нитрат серебра (до выпадения осадков). Затем прибавляют избыток указанных реактивов и наблюдают растворение осадков в первых трех пробирках. Осадок, вызванный прибавлением азотнокислого серебра, не растворяется в избытке соли.

Свойство белков связывать ионы тяжелых металлов используется в медицине при оказании первой помощи пострадавшим от отравления солями меди, свинца, ртути и др.