
- •Лекция 1. Основные направления биотехнологии
- •Биоэнергетика
- •Перспективы развития биотехнологии
- •Лекция 2 Основные принципы промышленной организации биотехнологических процессов. Стадии биотехнологического производства.
- •Технология приготовления питательных сред для биосинтеза
- •Получение засевной дозы
- •Лекция 3
- •Простейшие в биотехнологии
- •Водоросли.
- •Лекция 4 Стадии бт производства. Рост микроорганизмов. Кривая роста. Системы культивирования микроорганизмов (Ферментация, устройство ферментера).
- •Лекция 5 Стадии бт производства. Производство белка микроорганизмов (биомассы). Продуценты белка
- •Субстраты для культивирования микроорганизмов с целью получения белка
- •Лекция 6. Биотехнология получение органических кислот.
- •Получение уксусной кислоты
- •Лекции 7.
- •Промышленное производство аминокислот
- •Получение l-аминокислот ферментативным гидролизом рацематов
- •Способы синтеза l-аминокислот с использованием ферментов
- •Основные способы получения аминокислот биотрансформацией с использованием живых клеток [
- •Производство незаменимых аминокислот
- •Лекция 8 Классификация ферментов. Общая характеристика. Технология получении ферментных препаратов.
- •Глубинный метод производства ферментов
- •Производство ферментов при поверхностном культивировании продуцентов
- •Общая характеристика иммобилизованных ферментов
- •Методы иммобилизации ферментов
- •Применение иммобилизованных ферментов
- •Иммобилизация клеток
- •Лекция 9 – 10 Селекция биологических объектов-биопродуцентов.
- •1. Повышения стабильности и устойчивости микроорганизма как продуцента,
- •2. Автоматизации процесса
- •3. Снижение затрат на выделение и очистку получаемых продуктов реакции (удешевление производства).
- •1. Изменение числа хромосом
- •2. Изменение числа и порядка расположения генов (перестройка хромосом
- •3. Изменения индивидуальных генов (внутригенные изменения)
- •Лекция 11 Биотехнология в сельском хозяйстве. Вирусные энтомопатогенные препараты. Бактериальные удобрения на основе клубеньковых бактерий.
- •Вирусные энтомопатогенные препараты
- •Бактериальные удобрения на основе клубеньковых бактерий, нитрагин и ризоторфин
- •Технология получения препаратов клубеньковых бактерий
- •Производство азотобактерина
- •Лекция 12
- •Применение микроорганизмов в биотехнологии металлов»
- •Лекция 13 Микробиологическое производство пищевых продуктов и напитков.
- •Характеристика основных представителей микрофлоры молочных продуктов. Молочнокислые стрептококки.
- •Энтерококки.
- •Гетероферментативные молочнокислые стрептококки.
- •Закваски.
- •Роль микроорганизмов
- •Образование сгустка
- •Сорта сыра
- •Производство вина. Винные дрожжи
- •Дикие дрожжи
- •Роль чистых культур дрожжей в виноделии
- •Хересные дрожжи
- •Дрожжевые помутнения
- •Лекция 14
- •Производство антибиотиков
- •2. Микроорганизмы должны быть не патогенны.
- •3. Микроорганизмы должны хорошо и интенсивно размножаться в условиях ферментера.
- •5. Должна быть возможность сделать клетки микроорганизмов компетентными для того, чтобы их клеточная стенка была бы проницаема для плазмид.
- •Интерфероны
- •Гормоны роста человека
- •Вакцины
- •Противоопухолевые антибиотики
- •1. Живые вакцины получают
- •2. Неживые вакцины – это:
- •Получение вакцин
- •Сыворотки
- •Лекция 15
- •Культивирование клеток. История метода
- •Введение клеток в культуру, их происхождение
- •История метода
- •Культивирование соматических клеток - характеристика, введенеие в культуру, пассирование
Получение l-аминокислот ферментативным гидролизом рацематов
Сырье |
Фермент |
Продукт |
N-ацетил-D,L-аминокислоты |
Аминоацилаза |
L-аминокислоты (кроме кислых) |
D,L-аминокапролактам |
Гидролаза |
L-лизин |
D,L-2-амино-2-тиазолин-4-карбоновая кислота (D,L-АТК) |
Рацемаза АТК, гидролаза АТК, карбамоилгидролаза |
L-цистеин |
Производные гидантоина |
Дигидропиримидиназа |
D-аминокислоты (аланин, валин, лейцин, фенилаланин) |
Производные гидантоина |
Гидантоиназа, карбамоилгидролаза |
L-аминокислоты |
Эфиры D,L-аминокислот |
Эстеразы |
L-аминокислоты |
Ферментативный гидролиз N-ацетил-D,L-аминокислот привлекает возможностью получения целого спектра аминокислот при условии замены сырья и использования одного и того же биокатализатора.
Гидролиз производных гидантоина позволяет получать ряд оптически активных аминокислот. Так, фермент дигидропиримидиназа гидролизует ряд монозамещенных гидантоинов с образованием N-карбамоиламинокислот. С помощью фермента подвергаются гидролизу гидантоиновые производные аланина, валина, лейцина, серина, фенилаланина; на гидролиз производных лизина и аспарагиновой кислоты он не влияет.
Комбинированный способ получения L-лизина предложен японской фирмой «Тойо Рейон». На первой стадии циклогексан в результате химических реакций превращается в смесь D,L-α-амино-ε-капрлактама. На второй стадии осуществляют разделение оптических изомеров с помощью ферментов; происходящий при этом асимметрический гидролиз с участием гидролазы аминокапролактама приводит к образованию L-лизина.
Необходимость дополнительной стадии рацемизации непрореагировавшей D-аминокислоты или ее производных делает такие процессы менее предпочтительными по сравнению с прямым ферментативным синтезом.
Энзиматический синтез
По данному способу процесс получения аминокислот заключается в синтезе предшественника аминокислоты и последующей его трансформации в целевую аминокислоту с использованием либо выделенных ферментов (табл. 15.7.91), либо микроорганизмов (табл. ).
Способы синтеза l-аминокислот с использованием ферментов
Предшественники |
Фермент |
Продукт |
Фумарат аммония |
Аспартаза |
L-аспарагиновая кислота |
Коричная кислота |
Фенилаланинаммиаклиаза |
L-фенилаланин |
Фенилпировиноградная и L-аспарагиновая кислоты |
Трансаминаза |
L-фенилаланин и пировиноградная кислота |
α-Кето и α-оксикислоты |
Дегидрогеназа |
L-аминокислоты |
L-Аспарагиновая кислота |
Аспартат-β-декарбоксилаза |
L-аланин |
Фенол, пировиноградная кислота, аммиак |
Тирозинфеноллиаза |
L-тирозин |
Фенол, серин |
Тирозинфеноллиаза |
L-тирозин |
Индол, пировиноградная кислота, аммиак |
Триптофаниндоллиаза |
L-триптофан |
Индол, серин |
Триптофаниндоллиаза |
L-триптофан |
β-Хлор-L-аланин, сульфид натрия |
Цистеиндесульфгидраза |
L-цистеин |
Глицин, метанол |
Сериндегидраза |
L-серин |
Глицин, тетрагидрофолат |
Серинтрансметилаза |
L-серин |