
- •Лекция 1. Основные направления биотехнологии
- •Биоэнергетика
- •Перспективы развития биотехнологии
- •Лекция 2 Основные принципы промышленной организации биотехнологических процессов. Стадии биотехнологического производства.
- •Технология приготовления питательных сред для биосинтеза
- •Получение засевной дозы
- •Лекция 3
- •Простейшие в биотехнологии
- •Водоросли.
- •Лекция 4 Стадии бт производства. Рост микроорганизмов. Кривая роста. Системы культивирования микроорганизмов (Ферментация, устройство ферментера).
- •Лекция 5 Стадии бт производства. Производство белка микроорганизмов (биомассы). Продуценты белка
- •Субстраты для культивирования микроорганизмов с целью получения белка
- •Лекция 6. Биотехнология получение органических кислот.
- •Получение уксусной кислоты
- •Лекции 7.
- •Промышленное производство аминокислот
- •Получение l-аминокислот ферментативным гидролизом рацематов
- •Способы синтеза l-аминокислот с использованием ферментов
- •Основные способы получения аминокислот биотрансформацией с использованием живых клеток [
- •Производство незаменимых аминокислот
- •Лекция 8 Классификация ферментов. Общая характеристика. Технология получении ферментных препаратов.
- •Глубинный метод производства ферментов
- •Производство ферментов при поверхностном культивировании продуцентов
- •Общая характеристика иммобилизованных ферментов
- •Методы иммобилизации ферментов
- •Применение иммобилизованных ферментов
- •Иммобилизация клеток
- •Лекция 9 – 10 Селекция биологических объектов-биопродуцентов.
- •1. Повышения стабильности и устойчивости микроорганизма как продуцента,
- •2. Автоматизации процесса
- •3. Снижение затрат на выделение и очистку получаемых продуктов реакции (удешевление производства).
- •1. Изменение числа хромосом
- •2. Изменение числа и порядка расположения генов (перестройка хромосом
- •3. Изменения индивидуальных генов (внутригенные изменения)
- •Лекция 11 Биотехнология в сельском хозяйстве. Вирусные энтомопатогенные препараты. Бактериальные удобрения на основе клубеньковых бактерий.
- •Вирусные энтомопатогенные препараты
- •Бактериальные удобрения на основе клубеньковых бактерий, нитрагин и ризоторфин
- •Технология получения препаратов клубеньковых бактерий
- •Производство азотобактерина
- •Лекция 12
- •Применение микроорганизмов в биотехнологии металлов»
- •Лекция 13 Микробиологическое производство пищевых продуктов и напитков.
- •Характеристика основных представителей микрофлоры молочных продуктов. Молочнокислые стрептококки.
- •Энтерококки.
- •Гетероферментативные молочнокислые стрептококки.
- •Закваски.
- •Роль микроорганизмов
- •Образование сгустка
- •Сорта сыра
- •Производство вина. Винные дрожжи
- •Дикие дрожжи
- •Роль чистых культур дрожжей в виноделии
- •Хересные дрожжи
- •Дрожжевые помутнения
- •Лекция 14
- •Производство антибиотиков
- •2. Микроорганизмы должны быть не патогенны.
- •3. Микроорганизмы должны хорошо и интенсивно размножаться в условиях ферментера.
- •5. Должна быть возможность сделать клетки микроорганизмов компетентными для того, чтобы их клеточная стенка была бы проницаема для плазмид.
- •Интерфероны
- •Гормоны роста человека
- •Вакцины
- •Противоопухолевые антибиотики
- •1. Живые вакцины получают
- •2. Неживые вакцины – это:
- •Получение вакцин
- •Сыворотки
- •Лекция 15
- •Культивирование клеток. История метода
- •Введение клеток в культуру, их происхождение
- •История метода
- •Культивирование соматических клеток - характеристика, введенеие в культуру, пассирование
Лекции 7.
Получение аминокислот.
Аминокислоты используют во многих отраслях промышленности, с/х, медицине и быту. В наибольших количествах в мире вырабатывается L-глутаминовая кислота, L-лизин, DL-метионин, L-аспарагиновая кислота, глицин.
Основными способами получения АК являются следующие: экстракция из белковых гидролизатов растительного или животного сырья (это наиболее старый способ, основным недостатком кот-го являются нерациональное использование сырья), химический синтез – достаточно эффективен, позволяет получить соединения любой структуры и организовать непрерывное производство при высокой автоматизации, используется непищевое сырье, однако процесс многостадийный и требует сложной аппаратуры; микробиологический синтез растущими клетками, при использовании иммобилизованных микробных клеток или ферментов, выделенных их м-в. Микробиологический синтез АК более эффективен, чем химический.
Способность к синтезу аминокислот среди м-в широко распространена, несмотря на это продуцентов, обеспечивающих экономически выгодные выходы этих продуктов, не так много. Наиболее использующиеся продуценты аминокислот – грамположительные бесспоровые бактерии, относимые к родам Corynebacterium, Micrococcus, Arthrobacter, Brevibacterium.
Технология получения аминокислот базируется на принципах ферментации продуцентов и выделении вторичных метаболитов, т.е размножают маточную культуру вначале на агаризованной среде в пробирках, затем – на жидкой среде в колбах, инокуляторах и посевных аппаратах, а затем в головных (основных) ферментаторах. Затем обрабатывают культуральную жидкость и выделяют аминокислоту. Изолированные чистые кристаллы целевого продукта обычно высушивают под вакуумом и упаковывают.
Если аминокислота предусмотрена в качестве добавки к кормам, то процесс включает следующие стадии: ферментацию, стабилизацию аминокислоты в культуральной жидкости перед упариванием, вакуум-упаривание, стандартизацию упаренного раствора при добавлении наполнителя, высушивание и упаковку готового продукта, в котором должно содержаться не более 10 % основного вещества. В промышленности изготавливают сухой кормовой и жидкий кормовой концентраты лизина наряду с кристаллическим лизином. Если концентрат содержат 70-80 % сухих веществ, то он достаточно устойчив против микробной порчи за счет повышенной осмотической концентрации ингредиентов.
Аминокислоты в промышленном масштабе получают химическим (гидролиз белков и синтез из низкомолекулярных соединений) и микробиологическим способами.
Промышленное производство аминокислот
Аминокислоты |
Производство, т/год |
Код технологии |
Применение |
L-аланин |
130 |
1, 3с |
Пищевое производство |
DL-аланин |
700 |
2 |
Пищевое производство |
L-аргинин |
1000 |
1, 3а |
Косметика |
L-аспарагин |
50 |
1,2 |
Медицина |
L-аспартат |
4000 |
1, 3с |
Пищевое производство |
L-валин |
150 |
3a, 3c |
Пищевое производство |
L-гистидин |
200 |
3а |
Медицина |
Глицин |
6000 |
2 |
Органический синтез |
L-глутамат |
370000 |
3а |
Пищевое производство |
L-глутамин |
500 |
3а |
Медицина |
L-изолейцин |
150 |
3а |
Пищевое производство |
L-лейцин |
150 |
1, 3а |
Пищевое производство |
L-лизин |
70000 |
3а, 3с |
Пищевое производство |
DL-метионин |
70000 |
2 |
Пищевое производство |
L-метионин |
150 |
3с |
Медицина |
L-орнитин |
50 |
3а, 3с |
Медицина |
L-пролин |
100 |
3а |
— |
L-серин |
50 |
3а, 3b |
Косметология |
L-тирозин |
100 |
1, 3c |
Пищевое производство, органический синтез |
L-треонин |
160 |
3a |
Пищевое производство |
L-триптофан |
200 |
3a, 3c |
Пищевое производство, медицина |
L-фенилаланин |
3000 |
3а, 3с |
Медицина, органический синтез, пищевые добавки |
L-цистеин |
700 |
1 |
Пищевое производство |
Примечание. Коды технологии: 1 — гидролиз белков, 2 — химический синтез, 3 — микробиологический синтез (a — прямая ферментация, b — микробиологическая трансформация предшественников, c — использование ферментов и иммобилизованных клеток).
Существующие способы получения аминокислот методами биотехнологии можно объединить в три основные группы:
способы ферментативного расщепления смеси D,L-аминокислот и их производных на оптически активные изомеры;
способы энзиматического синтеза оптически активных аминокислот из предшественников;
способы микробиологического (ферментативного) синтеза оптически активных аминокислот.
Ферментативное расщепление рацематов
Обычно для выделения L-аминокислоты из полученной химическим синтезом смеси D- и L-форм получают производные аминокислот, которые затем подвергают обработке тем или иным ферментом или смесью ферментов (табл)