8.1.3. Приготовление препаратов крови

Исходная проце- дура

Форменные элементы крови изучают на мазках крови.

При этом

на предметное стекло наносят каплю крови и с помощью края второго стекла равномерно размазывают её по поверхности.

Дальней- шая обра- ботка

Затем осуществляют (в соответствии с изложенным в теме 1)

фиксацию препарата метанолом,окраску по Романовскому изаключение в консервирующую среду (кедровое масло).

При окраске по Романовскому используют два красителя – азур II (основной краситель) и эозин (кислый).

Общий вид

а) При изучении готового препарата оказывается, что

основная часть форменных элементов крови представлена эритроцитами

(которых, как отмечалось, в 1000 раз больше, чем лейкоцитов).

б) В частности, есть поля зрения, где видны только одни эритроциты.

1. Препарат - мазок крови: эритроциты в мазке. Окраска по Романовскому.

а) На светооптическом уровне эритроциты отличаются характерной морфологией:

лишены ядер,

эозином окрашиваются в розовый цвет,

имеют на препарате округлую форму и характерное просветление   в центре.

Полный размер

б) Электронная микроскопия показывает, что в зрелых эритроцитах нет

не только ядер, но и всех прочих органелл (кроме элементов цитоскелета).

в) По форме 85 % эритроцитов представляет собой

двояковогнутые диски диаметром 7,5 мкм.

Этим объясняется просветление в центре. Такие зрелые формы называются дискоцитами.

Морфо- логия

а) Кроме зрелых эритроцитов, в крови могут находиться их непосредственные предшественники -

ретикулоциты (2 - 8 % от общего числа эритроцитов).

б) Они

тоже лишены ядер, но содержат зернисто-сетчатые структуры - стареющие митохондрии, остатки эндоплазматической сети и рибосом.

Выявле- ние

а) При обычной окраске (по Романовскому, т.е. азур II-эозином)   ретикулоциты неотличимы от эритроцитов.

б) Наличие зернисто-сетчатых структур выявляется при специальной окраске - крезиловой синькой.

Состав

Перечисляемые ниже специфические молекулярные компоненты (гемоглобин, карбоангидраза, мембранные белки)  у ретикулоцитов уже имеются,   хотя некоторые из них - в меньшем количестве.

Эхино- циты и сферо- циты

а) При т.н. кренировании  

образуются  выпячивания плазмолеммы  (в виде шипов), а форма клетки приближается к эллипсоидной  и затем сферической.

б) В результате дискоциты  превращаются в

эхиноциты (эллипсоидные клетки с "шипами"; 6% от всех  эритроцитов) и затем всфероциты (сфероидные клетки без  шипов; 1%).

Стомато- циты

а) Во втором случае

двояковогнутая форма клетки меняется на вогнуто-выпуклую  или куполообразную.

б) Это приводит к  образованию т.н.

стоматоцитов (2%).