
- •Тема 1. Техника гистологического исследования
- •1.1. Световая микроскопия
- •1.1.1. Устройство микроскопа
- •1.1.2. Приготовление гистологического препарата
- •1.1.2.1. Взятие и фиксация материала
- •1.1.2.2. Обезвоживание и уплотнение материала
- •1.1.2.3. Приготовление срезов
- •1.1.2.4. Окрашивание препаратов
- •1.1.2.5. Заключение препарата в консервирующую среду
- •1.1.2.6. Мазки и тотальные препараты: особенности приготовления
- •1.1.2.7. Экспресс-метод приготовления срезов
- •1.1.3. Методы окрашивания гистологических препаратов
- •1.1.3.1. Типы красителей
- •1.1.3.2. Общие методы окраски
- •1.1.3.3. Выявление неклеточных структур соединительной ткани
- •I. Выявление коллагеновых волокон
- •1.1.3.4. Выявление элементов нервной системы
- •1.1.4. Гистохимические методы исследования
- •1.2. Электронная микроскопия
- •1.2.1. Принцип работы электронного микроскопа
- •1.2.1.1. Особенности: электронная волна, электромагнитные "линзы"
- •1.2.1.2. Типы электронных микроскопов
- •1.2.1.3. Ход "лучей" в трансмиссионном микроскопе
- •1.2.2. Особенности приготовления препарата
1.1.3.2. Общие методы окраски
I. Окраска гематоксилин-эозином
1.а) Самый распространённый метод окраски. б) Сочетает основной и кислый красители. в) Поэтому позволяет выявить почти все клетки и многие неклеточные структуры. 2. При этом
3. Замечание: используемый гематоксилин готовится по методу Эрлиха: окисляется до гематеина калийными квасцами. | |
1. Препарат - срез тонкой кишки. Окраска гематоксилин-эозином. (*) а) На снимке видны кишечные ворсинки (1): они находятся на внутренней поверхности тонкой кишки. б) Ворсинки покрыты одним слоем эпителиальных клеток. в) Ядра (2) этих клеток – фиолетового, а цитоплазма (3) – розового цвета. |
Полный размер |
(*) Препараты, отмеченные в теме 1 звёздочкой и имеющие порядковый номер, изучаются на практическом занятии, а также входят в тесты по этой теме.
II. Окраска мазков по Романовскому
1. Применяется для окраски мазков крови и красного костного мозга. Здесь тоже используются 2 красителя:
2. Отличия от приготовления срезов таковы:
3. В результате
| |
Препарат – мазок крови. Среди многочисленных эритроцитов видны:
|
|
III. Окраска железным гематоксилином (по методу Генденгайна)
1. Препарат
2. Структуры приобретают коричневато-серый цвет. 3. Хорошо выявляются | |
Препарат - срез языка. В мышечных волокнах видны ядра (1) и отчётливая поперечная исчерченность. |
|
1.1.3.3. Выявление неклеточных структур соединительной ткани
I. Выявление коллагеновых волокон
А. Окраска по методу Маллори. 1. Краситель – смесь кислого фуксина, анилинового синего и оранжевого G. 2. Коллагеновые волокна окрашиваются в синий цвет. | |
Препарат - срез мышцы.
|
|
2. Препарат - срез яичника кролика. Окраска по Маллори. (*) а) На снимке - женская половая клетка (ооцит), находящаяся в фолликуле яичника.
|
Полный размер |
б) Синий цвет блестящей оболочки свидетельствует о том, что в ней, помимо прочих компонентов, содержатся коллагеновые волокна. 3. Окраска по Маллори используется не только для выявления компонентов соединительной ткани, но и в иных целях –
| |
Б. Окраска по методу Ван Гизона. Красители – пикриновая кислота и кислый фуксин:
|
II. Выявление ретикулярных волокон – импрегнация серебром.
1. Препарат обрабатывают аммиачным раствором серебра, а затем – восстановителями. 2. Выделяющееся серебро осаждается на ретикулярных (аргирофильных) волокнах (богатых SH-группами), и волокна приобретают чёрный цвет. | |
Препарат - срез лимфоузла. Видны многочисленные ретикулярные волокна (1), образующие густую сеть. |
|
III. Выявление эластических элементов
А. Окраска орсеином:
| |
Препарат - срез аорты. В её средней оболочке (II) обнаруживаются многочисленные эластические мембраны (1) – в виде толстых извилистых линий, расположенных концентрически. |
|
Б. Окраска пикрофуксином и гематоксилином:
| |
Препарат - срез эластической связки. Видны пучки эластических волокон (1) и между ними – клетки (фиброциты) (2). |
|
IV. Выявление элементов костной ткани – окраска по методу Шморля
1. Вначале кусочек кости для размягчения подвергают декальцинации (с помощью кислоты). 2. Краситель – раствор тионина. 3. Стенки костных полостей и канальцев (выстланные сетью коллагеновых волокон) окрашиваются в тёмно-коричневый цвет; остальной фон – светло-коричневый. | |
3. Препарат - срез трубчатой кости. Окраска по Шморлю. (*) В костном веществе видны
|
Полный размер |