6.6. Іммобілізація ізольованих клітин

Іммобілізація клітин у вигляді монокультур. Після отримання суспензії ізольованих клітин готують повтори монослоїв, які в подальшому використовують для біотесту. Для цього в в необхідну кількість лунок вносять необхідну кількість кліткової суспензії.

Припускають, що клітини в суспензії розміщені рівномірно і залишки тканин та агрегати відсутні; в таких умовах можна отримати монослої з щільністю клітин варіюючи в межах 1 – 2 %.

Приготовані плити поміщають в інкубатор (37^о С) в атмосферу «повітря + 5 % СО₂». Атмосфера в інкубаторі має бути насичина водяними парами, щоб запобігти випаровуванню середовища.

Обробка клітин після іммобілізації. Кожні 3 – 4 діб видаляють з поверхні монослоїв культур за допомогою стерильної пастерівської піпетки, яка з’єднана з нагрітою свіжою порцією того ж середовища.

Зазвичай клітини іммобілізовані таким способом використовують на 7 – 10 добу, коли властивість клітин реагувати на дію гормону максимальна.

Рис. 6.3. Приготування суспензії ізольованих життездатних клітин з зразка тканини