- •Параграф 1. История культурального метода
- •Параграф 2. Типы питательных сред
- •Параграф 3. Методы получения накопительных культур
- •Метод обогащения
- •Метод нагревания
- •Метод выделения подвижных форм бактерий (метод Шукевича)
- •Методы выделения анаэробных микроорганизмов
- •Параграф 4. Методы выделения чистых культур
- •Метод Пастера (метод предельных разведений)
- •Метод Коха (метод глубинного посева)
- •Метод Дригальского
- •Параграф 5. Теория роста культур
- •Параграф 6. Диссоциация, рост колоний, формы колоний и прочие прелести
Параграф 2. Типы питательных сред
Питательная среда должна содержать все вещества, необходимые для роста микроорганизмов. Специфичность подавляющего числа сред определяют соединения азота и углерода. Среды различаются для авто- и гетеротрофов, хемотрофов и фототрофов, литотрофов и органотрофов.
Натуральными называют среды, в состав которых входят продукты растительного и животного происхождения. К таким средам относятся овощные и фруктовые соки, животные ткани, разведённая кровь, воды морей и минеральных источников, отвары и экстракты. На натуральных средах хорошо растут многие микроорганизмы, поскольку там содержатся все компоненты, необходимые для их питания и роста. Однако среди сие имеют крайне непостоянных химический состав, мало пригодны для изучения метаболической активности, выделить чистую культуру на таких средах невероятно тяжело. Используются главным образом для поддержания культуры, в санитарно-диагностических целях. Из тех сред, что будем делать мы: мясо-пептонный бульон, картофельный агар. Есть дрожжевая среда, если к ней добавить изюм, немного манной крупы и заправить каким-нибудь консерватом (например, пропионовой кислотой), то получится среда для разведения дрозофил.
Синтетические среды – это среды, в которые входят лишь соединения определённого химического состава, взятые точно в указанных количествах. Широко используются для исследования обмена веществ, биохимии, физиологии микроорганизмов.
Наряду с натуральными и синтетическими средами известны полусинтетические среды. В них входят как известные заранее компоненты, так и неизвестные, например, получающиеся в процессе автолиза (дрожжевой автолизат, казеиновый автолизат, почвенный экстракт). Находят применение в промышленной микробиологии для получения антибиотиков, витаминов, аминокислот и др.
По агрегатному состоянию различают:
Жидкие – для накопления микроорганизмами биомассы, продуктов обмена, для поддержания и хранения в коллекции культуры микроорганизмов; для выращивания водных микроорганизмов.
Сыпучие – применяют в промышленной микробиологии для получения физиологически активных соединений: например, отруби, разваренное пшено, пропитанных субстратом кварцевый песок
Плотные – используются для выделения чистых культур, описания колоний, определения количества микроорганизмов, для хранения культур в коллекции;
Полужидкие – для определения подвижности микроорганизмов, для влаголюбывых видов и др.
Параграф 3. Методы получения накопительных культур
Метод обогащения
Делают посев исследуемого материала в элективные питательные среды, которые содержат вещества, стимулирующие рост нужного микроорганизма и угнетающие или задерживающие размножение сопутствующей микрофлоры.
Их часто применяют для выделения чистых культур микроорганизмов (например, бактерий группы кишечной палочки (БГКП), сальмонелл и др.) из материалов, в которых мало выделяемых микроорганизмов, но содержится большое количество сопутствующей микрофлоры.
