
- •Розділ 1. Клональна природа імунної відповіді
- •Імунітет і захворювання
- •Інструктивна версія селекційних теорій утворення антитіл
- •П. Ерліх і теорія бокових ланцюгів
- •Ф.Харовіц і матрична теорія
- •1.2.3. Н.Йерне, д.Таллмадж та м.Бернет: Клональна селекція
- •Розділ 2. Природа антигенів
- •2.2.2 Специфічність серологічних реакцій
- •2.2.3 Перехресна реактивність
- •2.3 Антитіла до білків
- •2.3.1 Роль просторової конфігурації і послідовності амінокислот в антигенності
- •Амінокислотна послідовність і просторова структура лізоциму, що визначає його антигенність
- •2.3.2 Роль рухливості сегментів
- •2.3.3 Гіпотеза множинності детермінант
- •Розділ 3. Основний мономер імуноглобуліну
- •3.1. Антитіла та імуноглобуліни
- •3.2 Ланцюгова структура імуноглобуліну
- •3.2.1 Ранні дослідження з використанням антисироватки: очистка з використанням протеолітичних ферментів
- •3.3 Структурна основа різноманітності антитіл
- •3.3.1 Константні і варіабельні ділянки
- •3.3.2. Гіперваріабельні ділянки
- •3.5 Природа антиген-звязуючої ділянки
- •Розділ 4. Гетерогенність імуноглобулінів
- •Властивості класів імуноглобулінів
- •Розділ 5. Структура генів імуноглобулінів
- •На рисунку 10 показано один із можливих механізмів забезпечення такої різноманітності, а саме відображено механізм поєднання V I j в ланцюг.
- •5.2 Гени константних ділянок
- •Розділ 6. Оцінка реакцій а/г – а/т
- •6.1 Комплекс антиген/антитіло
- •Розділ 7. Комплемент
- •7.1 Відкриття системи комплементу
- •7.2 Класичний шлях активації комплементу
- •9.3 Альтернативний шлях активації
- •Розділ 8. Гемопоез
- •8.1 Походження колоній від однієї клітини
- •Розділ 9. Організація і структура лімфоїдної тканини
- •9.1 Структура лімфоїдних органів
- •9.1.1 Тимус
- •9.2 Селезінка
- •9.1.3 Лімфоїдні судини і лімфоїдні вузли
- •9.1.4 Циркуляція лімфоцитів
- •9.1.5 Ділянки в і т клітин в лімфоїдних органах
- •Розділ 10. Головний комплекс гістосумісності
- •10.1 Відкриття гкг (mhc)
- •10.2 Ознаки, що контролюються гкг
- •10.3 Картування генів гкг за функціями
- •10.4 Поліморфізм гкг
- •10.5 Структура молекул гкг
- •10.5.1 Молукули класу і
- •10.5.2 Молекули класу іі
- •10.6 Суперродина імуноглобулінів
- •Список використаної літератури
На рисунку 10 показано один із можливих механізмів забезпечення такої різноманітності, а саме відображено механізм поєднання V I j в ланцюг.
Тонегава у своїх дослідженнях показав, що є простий V – регіон ген для кожної із двох V – регіон підгруп, причому інший у порівнянні до зародкового гену. Тому це доводить наявність соматичних мутацій.
Рисунок 10. Механізм зв'язування V-J в ланцюг
5.2 Гени константних ділянок
Гени константного регіону є розміщеними в 3’ стороні V, D і J регіонів. Легкі ланцюги людини і миші кодуються С одним із чотирьох С генів. Очевидно, що як багато є Сн генів так і класів і підкласів імуноглобулінів, оскільки ізотип визначає їх константний регіон. Всі С (константні) регіони кодуються прямою послідовністю в ДНК (рис. 11).
Рисунок 11. Організація і структура генів важких ланцюгів імуноглобулінів:відмічено області, де може відбутись зміна/переключення рекомбінації
Розділ 6. Оцінка реакцій а/г – а/т
6.1 Комплекс антиген/антитіло
Взаємодія антиген/антитіло в цілому не відрізняється від будь-якої іншої взаємодії/реакції між лігандом і молекулою, що здатна специфічно зв’язувати ліганд. Цей комплекс формується на основі такої нековалентної взаємодії як гідрогенні зв’язки, полярні гідрофобні зв’язки, іонна взаємодія та Ван Дер Ваальсова. Є ряд методів для визначення такої взаємодії, що вважається зворотною: реакція аглютинації, преципітації, тощо. В основі її виміру лежить визначення афінності зв’язку, яка визначається валентністю імуноглобуліну.
На рисунку 12 показано перехресне зв’язування між антигенними детермінантами та антитілами.
Рисунок 12. Перехресне зв’язування антигенних детермінантів і антитіл
Із усього розмаїття методів найбільш вживаним і показовим є Вестерн-блот. Суть даного методу полягає у здатності високомолекулярних речовин розділятись на окремі фрагменти у гелі шляхом електрофорезу. Після перенесення таких франкціонованих продуктів на спеціальні імобілізовані нітроцелюлозні фільтри можна аналізувати виділені фраменти шляхом гібридизації in situ, і/або використовувати для знаходження специфічних місць взаємодії кон’юговані з пероксидазою (алкалін-фосфатазою) моноклональні антитіла.
Рисунок 13. Вестерн імуноблот аналіз різних тваринних тканин в SDS поліакріамідному гелі з використанням двох різних моноклональних анти – альфа – тубулінових антитіл
Іншим сучасним і найбільш вдалим на нашу думку є метод флюоресцентної мікроскопії, що дозволяє також використовувати для аналізу моноклональні антитіла, мічені відповідним барвником. На рисунку 14 наведено порівняльну характеристику застосування двох методів – флюоресцентної мікроскопії і електронної мікроскопії для оцінки взаємодії антиген/антитіло.
Рисунок 14. Порівняння імунофлюоресцентного методу із імунофотоелектронною мікроскопією
Розділ 7. Комплемент
7.1 Відкриття системи комплементу
Відкриття комплементу зв'язують з ім'ям Жуля Борде, що працював в лабораторії І.Мечникова в Парижі, хоча щось подібне описав і Бухнер. Перші дані вказували, що в сироватці крові тварин є термолабільні речовини, що підсилюють опсонізацію бактерій і в присутності антитіл убивають їх.
Опсонізуюча і лізуюча активності сироватки крові зв'язані з групою білків, об’єднаних у єдину систему комплементу (лат. complementum - доповнення).
Термін "комплемент" спочатку застосував Ерлих для опису "додаткової", сироваткової активності, без якої специфічні антитіла не можуть лізувати бактерії.