
- •37 Лекция 17. Рентгеновское и нейтронное рассеяние. Кристаллография лекция 17. Рентгеновское и нейтронное рассеяние. Кристаллография
- •Рассеяние рентгеновских лучей и нейтронов
- •Поглощение
- •Сечение рассеяния и размер образца
- •Когерентное и некогерентное рассеяние
- •Упругое и неупругое рассеивание
- •Суммирование волн, преобразование Фурье и обратное пространство
- •Фазовая проблема
- •Одномерные кристаллы
- •Двумерные и трёхмерные кристаллы
- •Разупорядоченные системы
- •Разрешающая способность и контраст
- •Комплементарность
- •Источники излучения и измерительные приборы
- •Активная зона с
- •Подвижным отражателем
- •Обогащенный уран u-235
- •Гренобль, Франция
- •Обратная кристаллическая решетка, сфера Эвальда и структурные факторы
- •В случае кристалла f(q) заменяется на g(q), где
- •Симметрия пространственной группы
- •Электронная плотность
- •Технические задачи и кристаллографическая модель
- •Методы кристаллизации
- •Идентификация кристаллов и преципитатов – размеры и форма кристаллов
- •Криокристаллография и криопротекторы
- •Крепление кристалла
- •Мечение
Мечение
Тяжелоатомные производные
Связывание тяжелых атомов с белком играет значительную роль в получении фаз структурного фактора. Ионы тяжелых атомов, как правило, проникают непосредственно в кристалл, и остается надеяться, что они свяжутся с белком, не разрушая кристалл.
Таблица Е3.2. Перечень наиболее часто упоминаемых реагентов, образующих тяжелые атомы, составленный на основе макромолекулярных структур за 1991-1994 гг. (взято из RouPol, 1997)
-
Реагент
Реагент
Белок со связанными тяжелыми атомами называется тяжелоатомным производным. В Таблице Е3.2 перечисляются некоторые из распространенных реагентов, используемых для получения тяжелоатомных меток.
Введение биосинтетических меток для аномальной дисперсии
Сера, которая естественным образом содержится в метионине и цистеине, и фосфор, который содержится в нуклеиновых кислотах и липидах, могут в принципе использоваться для фазирования путем аномальной дисперсии. Однако край их полосы поглощения приходится на такие длины волн рентгеновских лучей, когда наблюдается высокое поглощение для большинства элементов, и слабые сигналы аномальной дисперсии очень затрудняют проведение экспериментов и даже делают их невозможными. Селен генерирует сильный аномальный сигнал на длинах волн рентгеновских лучей, более подходящих для сбора данных. Использование метода фазирования аномальной дисперсии для белков, содержащих модифицированный селенометиониновый аминокислотный остаток, сегодня является стандартной методикой.