Задача 21

Пиридоксина гидрохлорид. Pyridoxini hydrochloridum

Витамин В₆ (МНН)

2-метил-3-окси-4,5-ди-(оксиметил)-пиридина гидрохлорид

1. Фармакологическое действие. Восполняет дефицит витамина В₆ в организме. Активно участвует в обмене веществ. Входит в состав ферментов, осуществляющих обмен липидов, декарбоксилирование и переаминирование аминокислот и гистамина.

2. Пиридоксина гидрохлорид представляет собой соль слабого органического основания и сильной неорганической кислоты, поэтому легко растворим в воде, умеренно – в этаноле. По внешнему виду – это белый кристаллический порошок, без запаха. Являясь производным пиридина, имеет две полосы поглощения в УФ-области (λ_max = 254 нм, 324 нм).

В структуре вещества содержатся: фенольный гидроксил, две карбинольные группы, третичная аминогруппа, пиридиновый цикл и хлорид-ион.

Фенольный гидроксил обнаруживают по образованию соли красного цвета при взаимодействии с раствором хлорида железа (III) [уравнение реакции – см. задачу № 19].

Как фенол пиридоксина гидрохлорид вступает в реакцию азосочетания в роли азосоставляющего:

красное окрашивание

С огласно ФС подлинность пиридоксина подтверждается реакцией образования индофенольного красителя с 2,6-дихлорхинонхлоримидом (голубое окрашивание):

голубое окрашивание

Наличие в молекуле третичной аминогруппы подтверждают с помощью общеалкалоидных реактивов (Бушарда, Драгендорфа, Майера) по образованию комплексных солей, выпадающих в осадок (бурый, оранжевый, белый соответственно).

Пиридиновый цикл идентифицируют с помощью реакции с 2,4-динитрохлорбензолом [см. задачу № 7].

Хлорид-ион обнаруживают с нитратом серебра, по выпадению белого творожистого осадка:

HCl + AgNO₃ → AgCl↓ + HNO₃

Количественное определение. Так как пиридоксина гидрохлорид является солью слабого основания, то его количественно определяют:

а ) методом неводного титрования в среде безводной уксусной кислоты в присутствии раствора ацетата ртути (титрант – 0,1 моль/л раствор хлорной кислоты, индикатор – кристаллический фиолетовый):

HClO₄ + CH₃COOH → ClO₄^- + CH₃COOH₂⁺

R₃N⁺—H + ClO₄^- → R₃N⁺—H • ClO₄^-

CH₃COO^- + CH₃COOH₂⁺ → 2CH₃COOH

б) методом нейтрализации по связанной хлороводородной кислоте в присутствии спирта для растворения выделяющегося основания лекарственного вещества (титрант – 0,1 моль/л раствор гидроксида натрия, индикатор – бромтимоловый синий) [см. задачу № 9].

Выпускается пиридоксина гидрохлорид в виде 1 и 5% растворов для инъекций в ампулах по 1 мл; в таблетках и драже по 0,002, 0,005 и 0,01 г. Кроме того, входит в состав поливитаминных препаратов.

3. С целью подтверждения подлинности пиридоксина гидрохлорида в лекарственных формах промышленного и индивидуального изготовления используются все приведенные выше реакции. Кроме того, используют УФ- и ИК-спектры поглощения. Например, по ФС раствор пиридоксина гидрохлорида для инъекций идентифицируется по УФ-спектрам, количественное определение осуществляют спектрофотометрически.

Количественное определение вещества в таблетках и драже можно проводить неводным титрованием, УФ-спектрофотометрическим и хроматографическим методами.

Этими же методами проводят количественное определение пиридоксина гидрохлорида в инъекционных растворах.

В индивидуальных лекарственных формах пиридоксина гидрохлорид количественно определяют: аргентометрически (метод Фаянса, Фольгарда), меркуриметрически (титруют 0,1 моль/л раствором нитрата ртути) [см. задачу № 10].

Известна методика фотоколориметрического определения, суть которой заключается в получении продукта реакции пиридоксина гидрохлорида с 2,6-дихлорхинонхлоримидом синего цвета.

Подлинность пиридоксина гидрохлорида в предлагаемой прописи подтверждают с помощью реакции с 2,6-дихлорхинонхлоримидом и по голубой флуоресценции водного раствора при облучении УФ-светом.

Количественное определение пиридоксина гидрохлорида в присутствии кислоты аскорбиновой и кислоты никотиновой проводят аргентометрическим методом (метод Фольгардта).

В связи с тем, что в предлагаемой прописи присутствует кислота аскорбиновая, которая тоже реагирует с раствором нитрата серебра (кислота аскорбиновая окисляется до дегидроаскорбиновой кислоты и выпадает в осадок металическое серебро), необходимо ее предварительно окислить.

С этой целью навеску лекарственной формы растворяют в воде, прибавляют определденный объем железоаммониевых квасцов (кислота аскорбиновая окисляется) и рассчитанный объем тированного раствора тиоцианата аммония. Избыток тиоцианата аммония оттитровывают титрованным раствором нитрата серебра до обесцвечивания раствора.

Расчет содержания пиридоксина гидрохлорида проводят по формуле обратного титрования.

4 . Пиридоксина гидрохлорид, попадая в организм человека, фосфорилируется, превращаясь в пиридоксальфосфат и др. коферменты,

биологическая активность и реакционноспособность которых повышается. Они вступают в различные биохимические реакции.

Антибиотики, поступая в организм человека (например, бензилпенициллины или стрептомицины), также вступают в реакции различного типа.

Если антибиотик получен в процессе биосинтеза (из мицелия гриба), то конечный продукт содержит некоторое количество сопутствующих веществ (продуктов жизнедеятельности гриба), которые защищают антибиотик и препятствуют активному вступлению в реакции взаимодействия с коферментами. Таким образом, активность антибиотика по отношению к коферменту минимальна.

Если антибиотик получен методом органического синтеза, конечный продукт имеет высокую степень чистоты (~ 99,5%) (левомицетин и др). Тогда вероятность вступления в реакцию взаимодействия кофермента с антибиотиком резко повышается и может произойти их инактивация (как антибиотика, так и пиридоксина гидрохлорида в виде кофермента).