Задача 11
1
.
Адонизид - новогаленовый препарат из
травы горицвета весеннего. Действующими
веществами горицвета являются сердечные
гликозиды, основные из которых – цимарин
и адонитоксин, состоящий из агликона
адонитоксигенина и сахара рамнозы.
Гликозиды горицвета относят к карденолидам
с общей формулой (где: Х1
– Н, Х2
– Н и Х3
– ОН; R
– CH3
или ):
L-рамноза
карденолиды
Агликон имеет циклопентанпергидрофенантреновую систему, связанную с пятичленным лактонным циклом.
Фармакологическая группа – сердечные гликозиды; кардиотонические средства.
Подлинность индивидуальных сердечных гликозидов можно объективно установить по ИК-спектрам, снятым после прессования в таблетках с бромидом калия в области 4000-400 см-1, по удельному вращению, по УФ-спектрам (в области 215-220 нм сердечные гликозиды имеют максимумы поглощения).
Могут быть использованы для идентификации реакции на различные фрагменты молекул.
Наличие стероидного цикла устанавливают по реакциям:
а) Либермана-Бурхардта: под действием уксусного ангидрида и концентрированной серной кислоты наблюдается зеленое окрашивание слоя уксусного ангидрида.
б) в смеси фосфорной и серной кислот с хлоридом железа (III) или в растворе перхлората железа в серной кислоте наблюдаеться флюоресценция.
в) с концентрированной серной кислотой появляется зеленое окрашивание.
Наличие пятичленного лактонного цикла с двойной связью в α,β–положении в молекуле карденолидов устанавливают с помощью следующих реакций:
а) Легаля: при взаимодействии сердечного гликозида с раствором нитропруссида натрия в щелочной среде наблюдается красное окрашивание.
б) Раймонда: при взаимодействии гликозида с нитропроизводными ароматического ряда в щелочной среде, например, с м-динитробензолом, появляется красно-фиолетовое окрашивание.
в) Балье: при взаимодействии гликозидов со щелочным раствором пикриновой кислоты появляется оранжево-красное окрашивание.
Для обнаружения сахарного компонента в сердечных гликозидах используют реакции, основанные на восстановительных свойствах сахаров после гидролиза.
а) реакция “серебряного зеркала”:
На стенках пробирки выделяется серебро.
б) с реактивом Фелинга (смесь водного раствора сульфата меди и щелочного раствора натрия-калия тартрата), после нагревания выпадает кирпично-красный осадок оксида меди (I):
красный
в) реакция Келлера – Килиани (на специфические сахара). Лекарственное вещество растворяют в смеси ледяной уксусной кислоты и раствора хлорида железа (III). Полученную смесь осторожно вливают в пробирку с концентрированной серной кислотой и наблюдают окраску верхнего слоя (синий или сине-зеленый цвет) и на границе двух слоев (малиново-красный или бурый).
г) реакция Пезеца. При нагревании ксантгидрола с гликозидом в присутствии ледяной уксусной кислоты и последующим прибавлении нескольких капель серной или фосфорной кислоты появляется красное окрашивание.
2. Биологическим методом устанавливают активность сравнением испытуемых сердечных гликозидов с препаратами-стандартами и выражают в ЛЕД (лягушачьих), КЕД (кошачьих) или ГЕД (голубиных) единицах действия. При биологическом методе устанавливают наименьшие дозы стандартного и испытуемого лекарственного препарата, которые вызывают систолическую остановку сердца подопытных животных. Затем рассчитывают активность в ЕД/мл. Этот метод наиболее адекватно отражает фармакологическую активность.
Для количественной оценки адонизида используют метод ВЭЖХ, отличающийся высокой чувствительностью и позволяющий определить не только основные, но и сопутствующие гликозиды, а также УФ-спектрофотометрию.
Фотоколориметрический метод основан на измерении оптической плотности окрашенных продуктов реакции с пикриновой кислотой.
Полярографический метод используют для количественного определения гликозидов в их лекарственных формах. Определение возможно за счет восстановления двойной связи, сопряженной с карбонильной группой лактонного цикла. Широкие возможности достигаются при применении полярографии в сочетании с предварительным хроматографическим разделением.