Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
лаб жур 2 част. ukr.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
341.62 Кб
Скачать
  1. Цукровий діабет: типи, клініко-біохімічна характеристика.

Відповідь:

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

  1. Глюкозний нирковий поріг. Глюкозурія, причини, методи визначення глюкози в сечі.

Відповідь:

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Завдання 1. Спостерігати окисленя ПВК в суспензії мітохондрій в модельному досліді.

Техніка роботи: 3 пробірки (1 – дослід, 2 и 3 – контроль) заповнити розчинами в мл за наступною схемою:

Реактиви

Дослід

К1

К2

Суспензія мітохондрій

5

5

Розчин ПВК

2

2

Фосфатний буфер

1

1

1

0,25 н розчин сахарози

5

2

Проби ставлять для інкубації на водяну баню на 10 хв, при 37оС, через 10 хв. в досліджуваній пробірці та К1 визначають ПВК та в досліді і в К2 – кількість АТФ.

Принцип визначення ПВК: в лужному середовищі в присутності 2,4-динітрофенолгідразина з ПВК утворюється забарвлена сполука.

Техніка роботи: З досліда та К1 в 2 пробірки видміряти по 2 мл розчину, додати по 1 мл 2,4-динітрофенолгідразина та по5 мл 0,4 н розчину NaOН. Порівняти інтенсивність забарвлення в пробірках.

Визначення АТФ: АТФ осаджують з розчину солями ртуті, осад розчину розчиняють в НСІ та проводять короткочасний гідроліз, при цьому відщеплюється 2 молекули фосфат іону, за якими визначають кількість АТФ.

Техніка роботи: З досліда и К2 в 2 пробірки відливають по 2 мл розчину та по 1 мл розчину 20% ацетату ртуті. Кількість АТФ визначають за кількістю осаду в пробірках.

Результати роботи заносять в протокол:

Дослід

К1

К2

ПВК

АТФ

Висновки:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Завдання 2: Визначення вмісту глюкози в крові ферментативним, глюкозооксидазним методом (за Городецьким).

Принцип метода: В основі метода покладено ферментативное окисленння глюкози киснем за участю фермента глюкозооксидази. В результаті реакції утворюється перекис водню в кількості, еквівалентній окисленій глюкозі:

глюкозооксидаза

(1) О2 + глюкоза + Н2О  глюконова кислота + 2Н2О2.

Перекис водню в присутності фермента пероксидази окислюється додатковий барвник — о-толуїдин, який набуває синє забарвлення, яке визначається колориметрично.

(2) о-толуїдин (безбарвна форма) + Н2О

о-толуїдин окиснений (синя форма) + 2Н2О

Техніка работи: До 10 мл безбілкового фільтрата крові додають по 1,5 мл робочого реактива (для визначення глюкози), 1,5 мл ацетатного буфера. Спостерігають за розвитком синього забарвлення.

Результати заносять в таблицю.:

Вміст пробірки

Інтенсивність забарвлення з реактивом на глюкозу

1. Безбілковий фільтрат крові здорової людини

2. Безбілковий фільтрат крові хворого на цукровий діабет

3. Безбілковий фільтрат крові після введення інсуліна

Висновки:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]