
- •Биохимия
- •Содержание
- •Введение
- •Техника безопасности в лаборатории биологической химии
- •Раздел 1 Белки
- •Лабораторная работа № 1 Простые белки. Цветные реакции на белки и аминокислоты.
- •Приготовление реактивов:
- •Опыт 1 Биуретовая реакция
- •Опыт 2 Нингидриновая реакция
- •Опыт 4 Реакция Миллона
- •Опыт 5 Реакция Сакагучи
- •Опыт 6 Реакция Адамкевича (на триптофан)
- •Опыт 7 Реакция Фоля
- •Опыт 8 Реакция на остаток аргинина (Сакагучи)
- •Опыт 9 Диазореакция
- •Опыт 10 Реакция на присутствие углеводных компонентов
- •Опыт 11 Реакция Вуазене (на триптофан)
- •Опыт 12 . Реакция Паули (на гистидин и тирозин)
- •Лабораторная работа № 2 Тема: Реакции осаждения белков
- •Необратимое осаждение белков.
- •Опыт 1 Осаждение белка кипячением
- •Опыт 2 Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Опыт 3 Осаждение белков органическими кислотами
- •Опыт 5 Осаждение белков органическими растворителями.
- •Опыт 6 Осаждение белков реактивами на алкалоиды.
- •Обратимое осаждение белков Опыт 5 Обратимое осаждение белков.
- •Опыт 5 Альбумины и глобулины в природных белках
- •Опыт 7 Определение изоэлектрической точки белка
- •Лабораторная работа № 3 Тема: Сложные белки
- •Реакции на нуклеопротеиды
- •Приготовление гидролизата дрожжей
- •С гидролизатом проводят следующие реакции:
- •Реакции на фосфопротеиды.
- •Выделение казеиногена из молока
- •Доказательство белковой природы казеиногена
- •Реакции на гликопротеиды
- •Открытие углеводного компонента в яичном белке
- •Выделение муцина из слюны
- •Раздел 2 Ферменты
- •Лабораторная работа № 4 Ферментативный гидролиз крахмала
- •Лабораторная работа № 5 Тема: Свойства ферментов
- •Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов.
- •Лабораторная работа № 6 Протеолиз
- •Опыт 1 Определение активности протеиназ
- •Амилолитические ферменты
- •Опыт 2 Определение амилазной активности слюны
- •Опыт 3 Определение амилазной активности мочи
- •Окислительно-восстановительные процессы
- •Опыт 3 Качественная реакция на каталазу
- •Опыт 4 Качественные реакции на дегидрогеназы
- •Опыт 5 Открытие липазы
- •Опыт 7 Количественное определение активности ферментов
- •Раздел 3 Витамины
- •Лабораторная работа № 7 Тема: Открытие витаминов
- •Опыт 1 Водорастворимые витамины
- •Открытие аскорбиновой кислоты в шиповнике
- •Обнаружение аскорбиновой кислоты в соке картофеля или капусты
- •Количественное определение аскорбиновой кислоты в моче
- •Примечание. Данную работу можно рекомендовать на группу в 3-4 учащихся. Причем экстракция чая делается одна на группу, а титрование и расчет производит каждый Опыт 2 Жирорастворимые витамины
- •Открытие ретинола (витамина а) в рыбьем жире
- •Открытие токоферола (витамин е)
- •Раздел 4 Углеводы Лабораторная работа № 8 Тема: Открытие углеводов
- •Открытие крахмала
- •Тема: Свойства углеводов
- •Раздел 5 Липиды Лабораторная работа № 9 Тема: Открытие липидов (жиров)
- •Опыт 1 Растворимость жиров и масел
- •Опыт 2 Гидролиз жиров и масел
- •Опыт 3 Выделение жира из молока
- •Опыт 4 Обнаружение глицерина в жирах (акролеиновая проба)
- •Опыт 5 Определение ненасыщенности кислот в составе жира
- •Опыт 6 Определение йодного числа
- •Опыт 7 Определение кислотного числа
- •Опыт 8 Омыление жиров
- •Опыт 9 Определение числа омыления
- •Раздел 6 Взаимосвязь обмена веществ и энергии
- •Задания теста:
- •Конечные продукты метаболизма:
- •4 Распад
- •Реакции цикла Кребса
- •Лабораторная работа № 1 Тема: Обмен простых белков
- •Хроматографический метод определения аминокислот. Разделение смеси аминокислот с помощью радиальной хроматографии
- •Лабораторная работа № 2 Обмен сложных белков
- •Обмен нуклеопротеидов
- •Обмен хромопротеидов
- •Открытие билирубина
- •Реакции на желчные пигменты
- •Лабораторная работа №3 Переваривание белка Опыт 1 Действие желудочного сока на белки
- •Опыт 2 Переваривание белка пепсином
- •Опыт 3 Переваривание белка трипсином
- •3.1 Переваривание фибрина
- •3.2 Переваривание казеина
- •3.3 Выделение триметиламинооксида
- •Практическая работа: Белки Задание № 1
- •Задание № 2
- •Задание № 3
- •Лабораторная работа № 4 Тема: Обмен углеводов
- •Опыт 1 Переваривание углеводов в пищеварительном тракте
- •Лабораторная работа №5 Обмен липидов
- •Опыт 1 Качественная реакция на желчные кислоты.
- •Опыт 2 Действие фосфолипаз поджелудочной железы.
- •Опыт 3 Эмульгирование жира
- •Опыт 4 Проба на понижение поверхностного натяжения
- •Опыт 5 Реакции на ацетоновые тела а) Реакция на образование йодоформа
- •Б) Реакция с нитропруссидом натрия
- •В) Реакция на ацетоуксусную кислоту
- •Лабораторная работа № 6 Переваривание жиров
- •Практическая работа: Обмен липидов Решение тестовых заданий
- •Лабораторная работа № 7 Водный и минеральный обмен
- •Открытие хлоридов
- •Открытие сульфатов
- •Открытие фосфатов
- •Вопросы к зачету по биохимии
- •Вопросы к экзамену по биохимии
- •Проверка и контроль знаний по биохимии
- •1 Химия белков и аминокислот
- •2 Химия нуклеиновых кислот
- •Как называются входящие в состав нуклеиновых кислот гетероциклические основания?
- •3 Химия углеводов
- •4 Химия жиров и липидов
- •5 Витамины
- •6 Ферменты
- •7 Обмен веществ и энергии
- •8 Обмен липидов
- •9 Обмен белков
- •11 Водный и минеральный обмен
- •12 Задания на повторение темы « Обмен энергии»
- •13 Задания на повторение темы « Обмен углеводов»
- •Темы курсовых работ по биохимии
- •Задачи по биохимии
- •Примеры тестовых заданий
- •Рекомендуемая литература
Открытие хлоридов
Количественное определение хлоридов в моче. Количество хлоридов в моче определяют количеством миллилитров нитрата ртути, пошедшим на титрование.
Ход работы. В сахарный стаканчик приливают 1,8 мл дистиллированной воды, 0,2 мл мочи, 4 капли индикатора, перемешивают и раствор титруют нитратом ртути до появления сине-фиолетового окрашивания. В качестве контроля используют стандартный раствор хлора, к 2 мл которого добавляют 4 капли индикатора и раствор оттитровывают нитратом ртути (2 г нитрата ртути растворяют в 200 мл дистиллированной воды и добавляют 20 мл 2н азотной кислоты, доводят общий объем до 1 л)
Расчет:
,
где 0,02 –миллиэквиваленты хлора в 2 мл стандартного раствора; 5х1000 – коэффициент пересчета на 1 л; А – количество раствора нитрата ртути, пошедшее на титрование опыта (мочи); Б – количество миллилитров раствора нитрата ртути, пошедшее на титрование контроля (стандартный раствор хлора). В норме хлора в моче 170-210 мэкв/л.
Открытие хлоридов в моче. С мочой хлоридов за сутки выделяется около 15 г из расчета на хлорид натрия. Реакция основана на образовании белого осадка хлорида серебра, нерастворимого в азотной кислоте.
Ход работы. К 10 каплям мочи добавляют 2 капли 1%-ного раствора нитрата серебра и 3 капли 10%-ного раствора азотной кислоты. Выпадает белый осадок.
Открытие сульфатов
В организме сера принимает участие во многих процессах обмена, в том числе и в синтезе некоторых гормонов (инсулина, окситоцина), в обезвреживании токсических продуктов (фенола, крезола и др.)
Ход работы. К 10 каплям мочи добавляют 5 капель 10%-ного раствора соляной кислоты и 5 капель 5%-ного раствора хлорида бария. Выпадает белый осадок.
Открытие фосфатов
Значение фосфатов для организма трудно переоценить. Он является одной из составных частей костной и зубной ткани, обнаруживается в составе почти всех органов и тканей, поддерживает осмотическое давление, а его соли, особенно АТФ, представляют собой основной аккумулятор энергии в организме, обеспечивающий активирование глюкозы, жирных кислот, аминокислот, процессы синтеза, избирательную проницаемость клеточных мембран.
В основе опре6деления фосфатов лежит их способность образовывать желтый осадок с молибденовым реактивом.
Ход работы. В пробирку наливают 20 капель молибденового реактива, нагревают почти до кипения и добавляют несколько капель мочи. Выпадает желтый кристаллический осадок фосфорных солей молибдата аммония.
Вопросы к зачету по биохимии
Предмет, методы и задачи биохимии. Характеристика живой материи.
Уровни организации живой материи. Химические компоненты организма.
Аминокислоты. Общая характеристика свойств и классификация.
Белки. Их особенности, свойства и биороль в организме.
Характеристика кислотно-основных свойств белка.
Буферные свойства белков. Роль буферной системы в организме.
Реакции осаждения и гидролиза белков. Роль данных реакций в пищеварении.
Цветные реакции на белки. Химизм.
Классификация белков (с примерами).
Принципы организации первичной структуры белковой молекулы.
Характеристика вторичной структуры белковых молекул, принципы её организации и влияние на свойства белковой молекулы.
Третичная структура белковой молекулы, принципы её организации и влияние на свойства белка.
Четвертичная структура белковых молекул. Роль данной структуры в биологической активности белка.
Коллагеновые белки, их характеристика, роль в организме.
Нуклеиновые кислоты, строение, функции.
Уровни организации нуклеиновых кислот.
Виды РНК, их структурная организация и биороль в организме.
ДНК, её структурная организация и биороль в организме.
Вирусы, их строение, особенности жизнедеятельности.
Строение моносахаридов, их свойства.
Функции углеводов в клетке.
Строение поли- и дисахаридов, их свойства.
Липиды и жиры. Строение, классификация.
Функции липидов в клетке.
Каталитические реакции. Природа ферментов, их характеристика в сравнении с катализаторами.
Ферментативный катализ. Факторы, влияющие на скорость ферментативных реакций.
Структура ферментов. Характеристика активных центров ферментов.
Классификация ферментов. Коферменты. Биороль ферментов в организме.
Механизм действия ферментов и образования фермент-субстратного комплекса.
Характеристика лиаз. Биороль данных ферментов в организме (примеры химических реакций, идущих с участием данных ферментов).
Характеристика гидролаз. Биороль данных ферментов в организме (примеры химических реакций, идущих с участием данных ферментов).
Характеристика трансфераз. Биороль данных ферментов в организме (примеры химических реакций, идущих с участием данных ферментов).
Характеристика изомераз. Биороль данных ферментов в организме (примеры химических реакций, идущих с участием данных ферментов).
Характеристика оксиредуктаз. Биороль данных ферментов в организме (примеры химических реакций, идущих с участием данных ферментов).
Витамины, их роль в обмене веществ. Классификация.
Витамин А. Особенности химического строения и биороль в организме.
Витамин Д. Особенности химического строения и биороль в организме.
Витамин Е. Особенности химического строения и биороль в организме.
Витамины группы В. Особенности химического строения и биороль в организме.
Витамин С. Особенности химического строения и биороль в организме.
Гормоны, общая характеристика, принципы классификации.
Гормоны, механизм их действия.
Гормоны мозгового слоя надпочечников. Роль данных гормонов в организме.
Гормоны поджелудочной железы. Особенности их химического строения и биороль в организме.
Гормоны половых желез. Особенности их химического строения и биороль в организме.
Гормоны щитовидной железы. Особенности их химического строения, синтеза и биороль в организме.