Опыт 1 Качественная реакция на желчные кислоты.

Принцип метода. Желчные кислоты можно открыть реакцией Петтенкофера. При взаимодействии желчной кислоты с оксиметилфурфуролом, образующимся из тростникового сахара под действием концентрированной серной кислоты, появляется красно-фиолетовое окрашивание.

Реактивы и оборудование: 1. Сахароза, 20%-ный раствор, свежеприготовленный. 2. Серная кислота концентрированная. 3. Чашка Петри (сухая). 4. Стеклянные палочки. 5. Желчь, разведенная в 2 раза.

Ход работы. На сухую чашку Петри (под которую подложить лист белой бумаги) нанести 2 капли желчи, 2 капли 20%-ного раствора сахарозы и тщательно перемешать. Стеклянной палочкой. Затем прилить 7 капель концентрированной серной кислоты и перемешать той же палочкой. Через 2-3 минуты наблюдается красное окрашивание, которое при стоянии переходит в красно-фиолетовую.

Опыт 2 Действие фосфолипаз поджелудочной железы.

Принцип метода: Об активности фосфолипаз поджелудочной железы судят по появлению свободной фосфорной кислоты, способной образовывать желтый осадок при нагревании с молибдатом аммония.

Реактивы и оборудование . 1. Панкреатин, 5%-ный раствор. 2. Молибденовый реактив. 3. Лецитин, 1%-ная суспензия в воде (1 желток в 150-300 мл воды).

Ход работы. В две пробирки наливают по 5 капель суспензии яичного желтка. В 1-ю пробирку добавляют 2 капли панкреатина, а во вторую – 2 капли воды. Обе пробирки помещают в термостат при 38⁰С на 30 мин. После инкубации в обе пробирки наливают по 5 капель молибденового реактива, нагревают их на пламени спиртовки и охлаждают водой под краном.

Приготовление молибденового реактива: 7,5 г молибдата аммония растворить в 100 мл воды, прибавить 100 мл 32%-ного раствора азотной кислоты (ρ =1,2 г/мл). наблюдать растворение молибдата аммония

Приготовление панкреатина 5%-ный раствор – 5 г. сухого панкреатина растворяют в 40-50 мл 2%-ного раствора NаНСО₃ и приливают 50-60 мл воды так, чтобы реакция среды на фенолфталеин была слабощелочной (рН 8,0).

Опыт 3 Эмульгирование жира

Жиры и другие липиды нерастворимы в воде, но растворяются во многих органических жидкостях. С водой жир может образовать эмульсию, т.е. дисперсную систему из двух несмешивающихся жидкостей. Эмульсия, однако, неустойчива и при стоянии жир вновь всплывает на поверхность, образуя два слоя - жировой и водный. Если же к смеси добавить немного белка или щелочи, мыла, щелочно реагирующих солей (соды), желчи или некоторых других веществ (эмульгаторы, детергенты), то при взбалтывании эмульсия станет устойчивой. Стойкость эмульсии зависит от того, что эти вещества понижают поверхностное натяжение между поверхностными слоями жировых шариков и раствором белка или мыла, получающегося при взаимодействии жира со щелочами. Понижение поверхностного натяжения препятствует слипанию жировых капель и благодаря этому удерживает эмульсию в стойком состоянии. Примером такой эмульсин может служить молоко. Желчь в особенности обладает свойством эмульгировать жиры, так как содержит соли желчных кислот, сильно понижающих поверхностное натяжение. Это свойство желчи имеет большое значение для переваривания жиров в организме, так как во много раз увеличивает поверхность соприкосновения жира с липазой поджелудочной железы.

Реактивы и оборудование:1. Растительное масло, 2. Дистиллированная вода, 3. Желчь 4. Едкий кали 5. Карбонат натрия, 6. Белок 7. Пробирки.

Ход работы: В 5 пробирок помещают по 2 капли растительного масла, по 1 мл дистиллированной воды и по 5 капель соответственно в каждую пробирку, начиная с первой: желчи, едкого кали, карбоната натрия, белка и воды. Пробирки встряхивают и наблюдают образование устойчивых эмульсий во всех пробирках, кроме 5-й, где происходит расслаивание на жир и воду.