
- •Биохимия
- •Содержание
- •Введение
- •Техника безопасности в лаборатории биологической химии
- •Раздел 1 Белки
- •Лабораторная работа № 1 Простые белки. Цветные реакции на белки и аминокислоты.
- •Приготовление реактивов:
- •Опыт 1 Биуретовая реакция
- •Опыт 2 Нингидриновая реакция
- •Опыт 4 Реакция Миллона
- •Опыт 5 Реакция Сакагучи
- •Опыт 6 Реакция Адамкевича (на триптофан)
- •Опыт 7 Реакция Фоля
- •Опыт 8 Реакция на остаток аргинина (Сакагучи)
- •Опыт 9 Диазореакция
- •Опыт 10 Реакция на присутствие углеводных компонентов
- •Опыт 11 Реакция Вуазене (на триптофан)
- •Опыт 12 . Реакция Паули (на гистидин и тирозин)
- •Лабораторная работа № 2 Тема: Реакции осаждения белков
- •Необратимое осаждение белков.
- •Опыт 1 Осаждение белка кипячением
- •Опыт 2 Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Опыт 3 Осаждение белков органическими кислотами
- •Опыт 5 Осаждение белков органическими растворителями.
- •Опыт 6 Осаждение белков реактивами на алкалоиды.
- •Обратимое осаждение белков Опыт 5 Обратимое осаждение белков.
- •Опыт 5 Альбумины и глобулины в природных белках
- •Опыт 7 Определение изоэлектрической точки белка
- •Лабораторная работа № 3 Тема: Сложные белки
- •Реакции на нуклеопротеиды
- •Приготовление гидролизата дрожжей
- •С гидролизатом проводят следующие реакции:
- •Реакции на фосфопротеиды.
- •Выделение казеиногена из молока
- •Доказательство белковой природы казеиногена
- •Реакции на гликопротеиды
- •Открытие углеводного компонента в яичном белке
- •Выделение муцина из слюны
- •Раздел 2 Ферменты
- •Лабораторная работа № 4 Ферментативный гидролиз крахмала
- •Лабораторная работа № 5 Тема: Свойства ферментов
- •Влияние активаторов и ингибиторов на активность ферментов.
- •Лабораторная работа № 6 Протеолиз
- •Опыт 1 Определение активности протеиназ
- •Амилолитические ферменты
- •Опыт 2 Определение амилазной активности слюны
- •Опыт 3 Определение амилазной активности мочи
- •Окислительно-восстановительные процессы
- •Опыт 3 Качественная реакция на каталазу
- •Опыт 4 Качественные реакции на дегидрогеназы
- •Опыт 5 Открытие липазы
- •Опыт 7 Количественное определение активности ферментов
- •Раздел 3 Витамины
- •Лабораторная работа № 7 Тема: Открытие витаминов
- •Опыт 1 Водорастворимые витамины
- •Открытие аскорбиновой кислоты в шиповнике
- •Обнаружение аскорбиновой кислоты в соке картофеля или капусты
- •Количественное определение аскорбиновой кислоты в моче
- •Примечание. Данную работу можно рекомендовать на группу в 3-4 учащихся. Причем экстракция чая делается одна на группу, а титрование и расчет производит каждый Опыт 2 Жирорастворимые витамины
- •Открытие ретинола (витамина а) в рыбьем жире
- •Открытие токоферола (витамин е)
- •Раздел 4 Углеводы Лабораторная работа № 8 Тема: Открытие углеводов
- •Открытие крахмала
- •Тема: Свойства углеводов
- •Раздел 5 Липиды Лабораторная работа № 9 Тема: Открытие липидов (жиров)
- •Опыт 1 Растворимость жиров и масел
- •Опыт 2 Гидролиз жиров и масел
- •Опыт 3 Выделение жира из молока
- •Опыт 4 Обнаружение глицерина в жирах (акролеиновая проба)
- •Опыт 5 Определение ненасыщенности кислот в составе жира
- •Опыт 6 Определение йодного числа
- •Опыт 7 Определение кислотного числа
- •Опыт 8 Омыление жиров
- •Опыт 9 Определение числа омыления
- •Раздел 6 Взаимосвязь обмена веществ и энергии
- •Задания теста:
- •Конечные продукты метаболизма:
- •4 Распад
- •Реакции цикла Кребса
- •Лабораторная работа № 1 Тема: Обмен простых белков
- •Хроматографический метод определения аминокислот. Разделение смеси аминокислот с помощью радиальной хроматографии
- •Лабораторная работа № 2 Обмен сложных белков
- •Обмен нуклеопротеидов
- •Обмен хромопротеидов
- •Открытие билирубина
- •Реакции на желчные пигменты
- •Лабораторная работа №3 Переваривание белка Опыт 1 Действие желудочного сока на белки
- •Опыт 2 Переваривание белка пепсином
- •Опыт 3 Переваривание белка трипсином
- •3.1 Переваривание фибрина
- •3.2 Переваривание казеина
- •3.3 Выделение триметиламинооксида
- •Практическая работа: Белки Задание № 1
- •Задание № 2
- •Задание № 3
- •Лабораторная работа № 4 Тема: Обмен углеводов
- •Опыт 1 Переваривание углеводов в пищеварительном тракте
- •Лабораторная работа №5 Обмен липидов
- •Опыт 1 Качественная реакция на желчные кислоты.
- •Опыт 2 Действие фосфолипаз поджелудочной железы.
- •Опыт 3 Эмульгирование жира
- •Опыт 4 Проба на понижение поверхностного натяжения
- •Опыт 5 Реакции на ацетоновые тела а) Реакция на образование йодоформа
- •Б) Реакция с нитропруссидом натрия
- •В) Реакция на ацетоуксусную кислоту
- •Лабораторная работа № 6 Переваривание жиров
- •Практическая работа: Обмен липидов Решение тестовых заданий
- •Лабораторная работа № 7 Водный и минеральный обмен
- •Открытие хлоридов
- •Открытие сульфатов
- •Открытие фосфатов
- •Вопросы к зачету по биохимии
- •Вопросы к экзамену по биохимии
- •Проверка и контроль знаний по биохимии
- •1 Химия белков и аминокислот
- •2 Химия нуклеиновых кислот
- •Как называются входящие в состав нуклеиновых кислот гетероциклические основания?
- •3 Химия углеводов
- •4 Химия жиров и липидов
- •5 Витамины
- •6 Ферменты
- •7 Обмен веществ и энергии
- •8 Обмен липидов
- •9 Обмен белков
- •11 Водный и минеральный обмен
- •12 Задания на повторение темы « Обмен энергии»
- •13 Задания на повторение темы « Обмен углеводов»
- •Темы курсовых работ по биохимии
- •Задачи по биохимии
- •Примеры тестовых заданий
- •Рекомендуемая литература
Раздел 5 Липиды Лабораторная работа № 9 Тема: Открытие липидов (жиров)
Цель работы: ознакомить студентов с методиками проведения качественных реакций на липиды; закрепить представления о структурах липидов; выработать навыки обращения с химической посудой, реактивами; ознакомить со способами утилизации отработанных реактивов; привить навыки работы со справочной литературой и оформления отчета по лабораторной работе.
Липиды (от греч. липос – жир) – низкомолекулярные органические соединения, практически нерастворимые в воде, которые могут быть извлечены из клеток неполярными органическими растворителями (хлороформ, бензол, петролейный эфир). Отличительным свойством липидов является их гидрофобность (липофильность). Липиды представляют собой разнородные химические соединения
I Простые липиды:
1 ацилглицеролы (жиры, триглицериды и т.п.);
2 воска.
II Сложные липиды:
1 фосфолипиды
• глицерофосфолипиды (фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол, фосфатидилглицерол, кардиолипин, плазмалоген);
• сфингофосфолипиды (сфингомиелин);
2 стероиды (холестерол, эргостерол, ланостерол, стигмастерол, экдистероиды);
3 гликолипиды (цереброзиды, ганглиозиды, сульфатиды).
Для характеристики жира используют константы или жировые числа:
Кислотное число – масса КОН (мг), необходимая для нейтрализации свободных жирных кислот в 1 г жира.
Число омыления – это масса КОН (мг), необходимая для гидролиза нейтральных липидов (омыления) и нейтрализации всех жирных кислот (в том числе и свободных), содержащихся в 1 г жира. Чем выше число омыления, тем больше низкомолекулярных кислот входит в состав жира.
Йодное число – это масса йода (г), связываемая 100 г жира. Йодное число характеризует степень ненасыщенности, так как присоединение йода происходит по месту разрыва кратных связей в остатке жирной кислоты. Чем больше йодное число, тем выше ненасыщенность жира.
Липиды широко применяют в медицине и технике. Из них получают основу для мазей, мыло (соли жирных кислот), масляные краски, олифу и т.п.
Реактивы и оборудование:
Жиры (говяжий, свиной, бараний) 10 г, масло (подсолнечное, касторовое, растительное) 10 г, толуол, ацетон, петролейный эфир, диэтиловый эфир, гексан, этиловый спирт, серная кислота (конц.), соляная кислота (0,5н), соляная кислота (разб. 1:1), гидроксид калия (водный 0,1 н), гидроксид калия, (спиртовой раствор 0,5н), раствор гидроксида натрия (разб.), раствор карбоната натрия 10%, гидросульфат калия (безвод.), раствор нитрата серебра, аммиак (водный раствор), раствор фуксинсернистой кислоты, спиртовой раствор йода (0,2н), раствор тиосульфата натрия (0,1н), раствор крахмала 1 %, бромная вода, раствор гидроксида натрия 35 %; пробирки, колбочки для титрования, держатель, спиртовка, водяная баня, кристаллизатор со льдом, часовое стекло, бюретки.
Опыт 1 Растворимость жиров и масел
а) в 5 пробирок поместите по небольшому кусочку твердого жира (свиного, говяжьего и т.п.) и прилейте по 1 мл: 1 – воды, 2 – этанола, 3 – толуола, 4 – петролейного эфира, 5 – ацетона. Если жир не растворяется, пробирку поместите в водяную баню на 5 минут. Сделайте вывод о растворимости жира на холоде и при нагревании.
б) в 5 пробирок поместите по 0,5 мл растительного масла (подсолнечного, оливкового, кукурузного и т.п) и прилейте по 1 мл: 1 –воды, 2 – этанола, 3 – толуола, 4 – петролейного эфира, 5 – ацетона. Если масло не растворяется, пробирку поместите в водяную баню на 5 минут. Сделайте вывод о растворимости растительного масла на холоде и при нагревании.