2.Виявлення триптофану в складі білків (реакція Адамкевича).

У разі додавання до нерозбавленого білка незначної кількості гліоксилової кислоти в присутності концентрованої Н₂SO₄ з’являється червоно-фіолетове забарвлення, зумовлене здібністю триптофану в кислому середовищі взаємодія-ти з альдегідами, даючи забарвлені продукти конденсації червоно-фіолетового кольору. Як джерело гліоксилової кислоти можна використати льодяну оцтову, в якій гліоксилова кислота завжди присутня в невеликій кількості.

Об'єкт дослідження: 1. Яєчний білок нерозбавлений або сироватка крові;

2. Желатин, 1 %-й розчин.

Обладнання і посуд: 1. Штатив із пробірками;

2. Крапельниці;

3. Піпетки;

4. Нагрівальний прилад.

Реактиви: 1. Концентрована оцтова кислота;

2. Н₂SO₄ концентрована.

Техніка виконання роботи

У дві пробірки вносять по декілька краплин нерозбавленого яєчного білка (або сироватки крові) і розчину желатину. Добавляють до кожної по 1 мл концентрованої оцтової кислоти (діє, як водоотбираюча речовина) і нагрівають до розчинення осаду, що утворився. Після охолодження по стінці пробірки нашаровують 1 мл концентрованої Н₂SO₄. На межі двох рідин спостерігають появу червоно-фіолетового кільця при наявності триптофану.

3.Виявлення наявності метіонину у складі білків

Метіонин є важливим джерелом лабільних метільних груп. Вони потрібні для синтезу ацетілхоліну, адреналіну, креатину та інших біологічно активних речовин. Метіонин відіграє важливу роль в обміні ліпідів, тобто стимулює їхнє окислення і, як наслідок, – зменшення кількості ліпідів у тканинах. Тому харчові джерела метіонину необхідні при захворюваннях печінки, пошкодженому жировому обміні, контакті з пошкоджуючими факторами.

При нагріванні метіонину з концентрованими лугами він руйнується з утворенням Na₂S. При додаванні до нього оцтовокислого свинцю утворюється РbS чорного кольору.

Об'єкт дослідження: 1. Яєчний білок, 10 %-й розчин;

2. Желатин, 1 %-й розчин.

Обладнання і посуд: 1. Штатив з пробірками;

2. Нагрівальний прилад.

Реактиви: 1. Їдкий натрій, 30% - й розчин.

2. Оцтовокислий свинець, 5 % - й розчин.

Техніка виконання роботи

У першу пробірку наливають 1 мл яєчного білка, у другу – 1 мл розчину желатину. У кожну пробірку додають по 5…10 крапель 30 %-го NаОН і по 0,5 мл 5 %-го розчину (СНзСОО)₂РЬ. Обидві проби нагрівають і спостерігають утворювання чорного осаду РЬS при наявності в складі білку амінокислот, що містять сірку.

4.Реакція Ерліха на гістидин.

Під час змішування розчину № 1 (сульфанілова кислота в НС1) з розчином № 2 (NаNО₂, водний розчин) і аміаком утворюється діазобензолсульфонова кислота, яка з гістидином дає вишнево-червоне забарвлення.

Об'єкт дослідження: 1. Яєчний білок , 10 %-ний розчин;

2. Желатин ,1 %-розчин.

Обладнання і посуд: 1. Штатив з пробірками.

Реактиви: 1. Розчин №1 ( сульфанілова кислота в НСІ);

2.Розчин №2 (NаNО₂, водний розчин); 3. NаОН – 30 %-й розчин.

Техніка виконання роботи

У першу пробірку наливають 1 мл яєчного білка, у другу — 1 мл розчину желатину. В обидві пробірки додають по 1 мл реактиву № 1, по 2...3 краплі реактиву № 2 і NаОН – 30 %-й до лужної реакції. Спостерігають зміну забарвлення.

Контрольні запитання

1. Яка роль білків в організації і функціях живої матерії ?

2. Чим відрізняється елементарний склад білків від інших органічних речовин, що містяться в клітинах організму ?

3. Які є структурні одиниці білків, що зумовлюють їх різноманітність ?

4. Які функціональні групи характерні для всіх амінокислот ?

5. Чим зумовлено буферні властивості амінокислот ?

6. Який тип зв’язку між амінокислотами є характерним для білків ?

7. До водного розчину амінокислот доданий універсальний індикатор. Визначе-на кисла реакція. Яким амінокислотам властиві кислі реакції?

8. За допомогою відповідних реактивів в розчині білка визначена сірка. Які амінокислоти її містять?

9. Що таке незамінні амінокислоти і в яких продуктах вони містяться?

10. В чьому полягає біологічна роль гліцина?

11. В чьому полягає біологічна роль аргініна, гліцина і метіоніна?

12. В чьому полягає біологічна роль тирозина і триптофана