Ошибки при определении группы крови:

Недостаточная подготовленность рабочего места

• слабая освещенность;

• неблагоприятный температурный режим:

-менее 15С (панагглютинация (холодовая- склеивание эритроцитов со своей сывороткой, раствором хлорида натрия и т. д., а также способность сыворотки склеивать все эритроциты. );

- более 25С (склеивание эритроцитов в "монетные столбики");

• применение нестандартных пластин с низкой смачиваемой поверхностью;

• недостаточное количество палочек, пипеток, стандартных реагентов.

Небрежность в выполнении работы:

• отсутствие маркировки и нарушение порядка нанесения стандартных сывороток, эритроцитов, цоликлонов;

• нанесение различных реагентов одной пипеткой или смешивание различных капель одной палочкой;

• нарушение пропорции - реагент: кровь;

• при определении АВО группы по стандартным сывороткам не добавление физиологического раствора в капли, где наступила агглютинация или добавление в лунки, где она еще не наступила;

• не проведение реакции со стандартной сывороткой группы АВ(IV).

• преждевременный или наоборот поздний учёт результатов определения групп крови.

Изменения активности или специфичности стандартных реагентов:

• предприятием изготовителем не обеспечены необходимые параметры;

• нарушение условий хранения реагентов (несоответствие температурного режима, нарушение герметичности, инфицирование, загнивание сывороток);

использование реагентов с истекшим сроком годности.

• низкие агглютинационные свойства антигенов крови детей и отсутствие агглютининов в течение первого года жизни.

Определение резус-фактора

Современные клиники используют стандартную технологию – экспресс-метод со стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева.

Выполняет определение резус-фактора врач.

Медицинская сестра готовит оснащение:

- штатив для пробирок с кровью донора (реципиента)

- штатив для центрифужных пробирок

- стандартный анти-резус реагент

- пипетки

- перчатки

- песочные часы на 5 минут

- 0,9% физиологический раствор хлорида натрия

- документация

- емкости для дезинфекции.

После смешивания капли стандартного анти-резус реагента с каплей крови, пробирка вращается для смешивания реагента с эритроцитами. Для чтения результата через 3 минуты добавляется 0,9% хлорид натрия в количестве 5-7 мл. Результат визуально оценивает врач в проходящем свете, регистрирует в журнале и истории болезни.

Наличие агглютинации свидетельствует о положительном резус-факторе (Rh+), отсутствие агглютинации свидетельствует об отрицательном резус-факторе (Rh-).

Определение резус фактора экспресс методом с помощью стандартного универсального реагента без подогрева в пробирке.

Для определения резус-фактора может быть использована свежая не свернувшаяся кровь, взятая из пальца непосредственно перед исследованием, или консервированная, без всякой предварительной обработки, а также эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки.

Техника определения.

- 1мл стандартного универсального реагента (антирезусная сыворотка группы AB(IV)+33% раствор полиглюкина);

-1мл исследуемой крови(эритроцитов)

На дно пробирки внести 1 каплю стандартного универсального реагента и 1 каплю исследуемой крови (или эритроцитов).

Содержимое пробирки перемешать встряхиванием и затем медленно поворачивать, наклоняя пробирку почти до горизонтали таким образом, чтобы содержимое растекалось по её стенкам. после 3-минутного покачивания ,

для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавить 2-3мл физиологического раствора хлористого натрия и перемешать, не взбалтывая, путём 2-3-х кратного перевёртывания пробирки. Оценку производить визуально.

Оценка результата.

Резус-(+) -наличие агглютинации в виде крупных хлопьев из эритроцитов на фоне просветлённой жидкости .

Резус-(-) -отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная жидкость).

Определение резус-фактора с помощью моноклонального реагента (цоликлон анти-d , анти-d супер).

Цоликлон анти-D супер выпускается во флаконах по 2,5 или 10 мл (1 мл содержит 10 доз). Срок хранения — 1 год в холодильнике при t 2~8 °С. Вскрытый флакон можно хранить в холодильнике в течение месяца в закрытом виде

Наносят большую каплю (около 0,1 мл) реагента на пластинку или планшет.

Рядом помещают маленькую каплю (0,01-0,05 мл) исследуемой крови и смешивают кровь с реагентом.

Реакция агглютинации начинает развиваться через 10-15 сек, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 сек.

Результаты реакции считывают через 3 мин.

Тарелку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 сек, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации.

Метод агглютинации на чашках Петри.

- исследуемые эритроциты;

-две серии стандартных сывороток антирезус всех групп системы АВО;

-контрольные образцы резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов:

-водяная баня с постоянной температурой 46-48 С°

-чашки Петри

В чашку Петри наносят по 2 капли антирезусной сыворотки, слева - одной серии, справа - другой в 3 ряда для 3 исследований. В каждую серию прибавляют по 1капле эритроцитов (1.исследуемые, 2.контрольные Rh-положительные и 3.контрольные Rh-отрицательные). После смешивания (стеклянными палочками) сывороток в каждой точке с добавленными эритроцитами чашку помещают в водяную баню при t° 46—48° на 7—10 мин, после чего рассматривают в проходящем свете.

Наличие агглютинации свидетельствует о положительном результате, отсутствие ее - об отрицательном. Для контроля в этом методе используют заведомо Rh-отрицательные и Rh-положительные эритроциты.