Оценка результата определения групп крови с помощью моноклональных антител

Наличие агглютинации при реакции с цоликлонами		Группа крови
Цоликлон анти-А (красный)	Цоликлон анти-В (синий)
-	-	О αβ(I)
+	-	А β(II)
-	+	В α(III)
+	+	АВ(IV)

1. Агглютинации нет (-) ни с цоликлоном анти-А, ни с цоликлоном анти-В. Следовательно, исследуемые эритроциты не содержат антигенов А и В и кровь принадлежит к группе 0(I).

2. Агглютинация (+) наблюдается только с цоликлоном анти-А. Следовательно, исследуемые эритроциты содержат только агглютиноген А и кровь принадлежит к группе A(II).

3. Агглютинация (+) наблюдается только с цоликлоном анти-В. Следовательно, исследуемые эритроциты содержат только агглютиноген "В", и кровь принадлежит к группе B(III).

4. Агглютинация (+) наблюдается как с цоликлоном анти-А, так и с цоликлоном анти-В. Следовательно, исследуемые эритроциты содержат оба агглютиногена "А" и "В" и кровь принадлежит к группе AB(IV

В случае положительной реакции агглютинации эритроцитов с обоими цоликлонами, т.е. установлением группы крови AB(IV), необходимо провести дополнительное контрольное исследование данного образца крови с изотоническим раствором хлористого натрия. Для этого смешивают одну большую каплю (0,1мл) изотонического раствора с маленькой каплей (0,01) исследуемой крови. При отсутствии агглютинации в этой контрольной капле, кровь принадлежит к группе AB/IV/. При наличии спонтанной агглютинации (положительная реакция в контрольной капле) рекомендуется проводить определение группы крови, используя отмытые эритроциты данного образца крови.

Определения групп крови по стандартным эритроцитам

Для определения групп крови применяются стандартные эритроциты с известными агглютиногенами А и В и плазма крови реципиента, в которой определяется наличие агглютининов"" и "".

Техника получения стандартных эритроцитов: У доноров забирается кровь трех групп — 0I, АII, ВIII. Забранную кровь отмывают. Вначале кровь центрифугируют для разделения на фракции — плазму и эритроциты. Плазму удаляют, а к эритроцитам добавляют физиологический раствор поваренной соли и смешивают. Затем кровь вновь центрифугируют и удаляют жидкую часть. К оставшимся эритроцитам повторно добавляют физиологический раствор. Отмывание эритроцитов производят трижды. После окончания приготовления стандартных эритроцитов к ним добавляют консервант и хранят в холодильнике при температуре от +6° до +8 °С в течение 2 месяцев, титр их не должен быть ниже 1:32.

Методика определения групп крови по стандартным эритроцитам:

-На белую планшетку со смачиваемой поверхностью наносятся цифровые изображения групп крови и серологическая формула стандартных эритроцитов рядом с каждой из трех клеток.

- В каждую клетку соответственно подписям слева направо наносятся испытуемая плазма реципиента в количестве 2 капель (0,1 мл)

- Рядом добавляется маленькая капля (0,01 мл) стандартных эритроцитов в соотношении 1 к 10.

- Капли тщательно перемешивают палочками (каждую каплю - отдельной палочкой, углом предметного стекла)и дается экспозиция в течение 3—5 минут

Реакция исследуемой сыворотки(плазмы) со стандартными эритроцитами групп		Группа крови
A(II)	B(III).
+	+	О αβ(I)
-	+	А β(II)
+	-	В α(III)
-	-	АВ(IV)

1. Положительная реакция агглютинации (+)со стандартными эритроцитами групп A(II) и В(III). Следовательно, исследуемая сыворотка (плазма ) содержит агглютинины "" и "" и кровь принадлежит к группе 0(I).

2. Положительная реакция агглютинации (+)со со стандартными эритроцитами группы B(III) Следовательно, исследуемая сыворотка (плазма ) содержит агглютинин ""и кровь принадлежит к группе A(II)

3.Положительная реакция агглютинации (+)со стандартными эритроцитами групп A(II) .Следовательно, исследуемая сыворотка (плазма ) содержит агглютинины "" и кровь принадлежит к группе B(III).

4. Отрицательная реакция агглютинации (-)со стандартными эритроцитами групп A(II) и В(III). Следовательно, в исследуемой сыворотке (плазме ) отсутствуют агглютинины "" и "" и кровь принадлежит к группе AB(IV).