Микробиология Туберкулёза

1. Видовое название возбудителя и его систематическое положение.

M. tuberculosis. Род Mycobacterium относится к семейству Mycobacteriaceae.

2. Морфологические свойства.

М. tuberculosis имеет форму тонких, стройных, коротких или длинных, прямых или искривленных палочек, длиной 1,0-4,0 мкм и диаметром 0,3-0,6 мкм. Непо­движны, спор и капсул не образуют. В старых культурах наблюдаются нитевидные, ветвящиеся формы, не­редко зернистые формы (зерна Муха), как в виде свободно лежащих зерен, так и в виде зерен, содержащихся внутриклеточно. В организме больных под влиянием химиопрепаратов часто образуются ультрамалые формы, способные проходить через мелкопористые бактериальные фильтры («фильтрующиеся формы»).

Многие биологические свойства микобактерий объясняются высоким содержа­нием липидов, составляющих до 40 % сухого остатка клеток. Обнаружены три фрак­ции липидов: фосфатидная (растворимая в эфире), жировая (растворимая в эфире и ацетоне) и восковая (растворимая в эфире и хлороформе). В составе липидов имеются различные кислотоустойчивые жирные кислоты, в том числе туберкуло-стеариновая, фтиоидная, миколовая и др. Высокое содержание липидов определяет следующие свойства туберкулезных палочек:

1. Устойчивость к кислотам, щелочам и спирту.

2. Трудная окрашиваемость красителями.

3. Относительно высокая устойчивость к высушиванию и действию солнечных лучей.

4. Устойчивость к действию обычных дезинфицирующих веществ.

5. Высокая гидрофобность, которая находит свое отражение в культуральных свойствах.

6. С высоким содержанием липидов связана и патогенность туберкулезных бак­терий.

3. Тинкториальные свойства.

Грамположительны. Для их окрашивания применяют интенсивные методы. Например, по способу Циля-Нильсена окрашивают кон­центрированным раствором карболового фуксина при подогревании. Восприняв окраску, туберкулезные бактерии, в отличие от других клеток, не обесцвечиваются ни спиртом, ни кислотой, ни щелочью, поэтому при докрашивании метиленовым синим в мазке все бактерии, клеточные элементы и слизь окрашиваются в синий цвет, а туберкулезные палочки сохраняют исходную красную окраску. Этот метод позволяет дифференцировать их от некоторых непатоген­ных микобактерий, например М.smegmatis, содержащихся на слизистой оболочке уретры, но обесцвечивающихся спиртом. Вместе с тем необходимо иметь в виду, что встречаются и кислотоподатливые («синие» при окрашивании по Цилю-Нильсену) формы туберкулезных бактерий (в том числе палочковидные, нитевид­ные и зернистые).

По способности к пигментообразованию микобактерии также делят на 3 группы:

1. Фотохромогенные – образуют пигмент лимонно-желтого цвета при росте на свету.

2. Скотохромогенные – образуют пигмент оранжево-желтого цвета при инкуби­ровании в темноте.

3. Нефотохромогенные – пигмента не образуют (независимо от наличия света), иногда культуры имеют светло-желтоватую окраску.

4. Культуральные свойства.

Для культивирования туберкулезных бактерий предложены различные пита­тельные среды: глицериновые, картофельные с желчью, яичные, полусинтетические и синтетические. Наилучшей считается яичная среда Левенштейна-Иенсена. Кроме того, предложена специальная полужидкая среда для выделения L-форм М.tubercu­losis. На глицериновом бульоне рост в виде пленки желтоватого цвета, которая постепенно утолщается, становится ломкой и приобретает бугристо-морщинистый вид, при этом бульон остается прозрачным. На глицериновом агаре через 7-10 дней образуется сухой чешуйчатый налет, постепенно переходящий в грубые бородав­чатые образования. На щелочном альбуминате (или на стекле, помещенном в цитратную лизированную кровь) рост туберкулезных бактерий, содержащих поверхностный гликолипид (корд-фактор) змеевидный – размножающиеся клетки располагаются, образуя структуру, напоминающую змею, жгут, веревку или женскую косу.

По скорости роста род Mycobacterium подразделяют на три группы:

1. Быстрорастущие — крупные видимые колонии появляются ранее 7-го дня инкубации (18 видов).

2. Медленнорастущие — крупные видимые колонии появляются после 7-ми и бо­лее дней инкубации (20 видов).

3. Микобактерии, которые требуют специальных условий для роста или не растут на искусственных питательных средах. К этой группе относятся два вида: М. leprae и М. lepraemurium.