Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методы и методики (как книжка).doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
3.37 Mб
Скачать

122. Реакция Закса — Витебского (цитохолевая)

Применяется для выявления сифилиса. Основана на образовании осадка при смешивании сыворотки крови больного с антигеном.

Для приготовления антигена мышцы нескольких бычьих сердец очищают от сухожилий, фасций, жира, измельчают на мясорубке и экстрагируют 5-кратным объемом 96 % этилового спирта в течение 15 дней при ежедневном 20-минутном встряхивании. Полученный экстракт выпаривают на водяной бане в фарфоровой чашке под вакуумом. К остатку (ярко-желтой массе липоидов) добавляют горячий 96 % этиловый спирт в количестве 1/3 объема взятых для экстрагирования мышц.

Экстракт держат 3 дня при комнатной температуре, фильтруют (в холодной воде) и добавляют 0,3—0,6 % раствор кристаллического холестерина в зависимости of результатов титрования положительными и отрицательными сыворотками. Хранят цитохолевый антиген при комнатной температуре в запаянных ампулах либо закупоренных пробирках.

Методика. К 2 мл изотонического раствора натрия хлорида быстро приливают 1 мл цитохолевого антигена и оставляют при комнатной температуре на 15 мин до появления хлопьев. В пробирку к 0,2 мл инактивированной сыворотки добавляют 0,1 мл антигенной эмульсии, встряхивают в течение 3 мин и оставляют в покое на 30 мин, после чего добавляют 1 мл изотонического раствора натрия хлорида.

В контрольную пробирку с антигеном добавляют 1,2 мл изотонического раствора натрия хлорида и 0,1 мл антигенной эмульсии. В контроле хлопьев не должно быть. Результаты реакции учитывают визуально или с помощью лупы и обозначают в зависимости от количества выпавших хлопьев плюсами (++++, +++, ++). При отрицательной реакции хлопьев нет, но содержимое пробирки может слегка опалесцировать.

В 1931 г. П. Sachs и Е. Witebsky предложили модификацию данной методики, заключающуюся в том, что антиген разводят двухфазно: к 1 части антигена добавляют 2 части изотонического раствора натрия хлорида, выдерживают при комнатной температуре 5

Схема проведения основного опыта реакции Вассермана

Ингредиенты (в мл). Общий объем 1,25 мл

№ пробирок

I

Ц

III

Испытуемая сыворотка инактивированная, разведенная в пропорции 1 : 5

Антиген I (трепонемный), разведенный

по титру Антиген II (кардиолипиновый), разведенный по титру

Изотонический раствор натрия хлорида

Комплемент, разведенный по рабочей дозе

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25

0,25


Клиническое значение реакции Вассермана трудно переоценить. Ее проводят всем больным до начала лечения, но особое значение она имеет при скрытом сифилисе, поражении внутренних органов и нервной системы.

Результаты реакции Вассермана характеризуют качество проведенного лечения, что дает основание в определенные сроки снимать с учета лечившихся больных.

При первичном сифилисе реакция Вассермана положительная обычно в конце 6-й недели с момента заражения; при вторичном свежем сифилисе она положительная почти в 100 % случаев, при вторичном рецидивном —в 98—100%; третичном активном — в 85%; третичном скрытом — в 60 % случаев.

Реакцию Вассермана проводят двукратно всем беременным, больным с соматическими, нервными, психическими и кожными болезнями, а также декретируемым контингентам населения. В то же время к.положительным и слабоположительным результатам реакции следует относиться критически, так как они могут быть в конце беременности и после родов, при гипертиреозе, малярии, проказе, распаде злокачественной опухоли, инфекционных заболеваниях, коллагенозах и др. Поэтому при наличии клинических проявлений болезни их следует учитывать, наряду с данными бактериоскопии, в первую очередь.

Пробу считают положительной при обнаружении 2—3 типичных клеток красной волчанки, которые значительно больше нормальных лейкоцитов; ядро их интенсивно окрашено и отодвинуто к периферии; в центре, в виде розетки, более выражена окрашенная фагоцитированная масса. Результат считают отрицательным в том случае, когда при просмотре нескольких сотен лейкоцитов в 2—3 мазках клетки красной волчанки не обнаруживают.