
- •Миколаївський національний аграрний університет
- •Факультет технології виробництва і переробки продукції тваринництва, сертифікації та біотехнології
- •Кафедра генетики, годівлі тварин та біотехнології
- •Загальна біотехнологія
- •Методичні рекомендації для самостійного вивчення дисципліни
- •І виконання лабораторних робіт студентами денної форми навчання спеціальності 6.051401-"Біотехнологія"
- •1. Загальні правила техніки безпеки в лабораторії на заняттях з біотехнології
- •Правила техніки безпеки в лабораторії при роботі з кислотами і лугами
- •Правила техніки безпеки в лабораторії з легкозаймистими і горючими рідинами (лзр та гр)
- •Правила техніки безпеки в лабораторії з побутовим газом, спиртівкою і сухим пальним
- •Правила техніки безпеки в лабораторії з хімічної посудом
- •Правила техніки безпеки в лабораторії з електрообладнанням та електроприладами
- •Правила техніки безпеки в лабораторії при роботі з реактивами
- •Правила техніки безпеки в лабораторії при роботі з біооб'єктами
- •Заходи першої допомоги при отруєннях неорганічними та органічними речовинами:
- •2. Підготовка посуду і обладнання до роботи з живими об'єктами
- •3. Техніка підготовки і методи стерилізації поживних середовищ
- •3.1. Вимоги, що надаються до поживних середовищ
- •3.2. Склад і спосіб приготування поживних середовищ
- •3.3. Характеристика компонентів поживних середовищ
- •Склад кукурудзяного екстракту
- •Хімічний склад продуктів переробки зерна
- •Склад деревної сировини
- •3.4. Стерилізація поживних середовищ
- •Способи та режими стерилізації
- •Питання для самоперевірки
- •4. Методи генетичної інженерії
- •4.1. Методи отримання генів
- •4.2. Введення гена у вектор і клонування
- •4.3. Методи трансформації клітин рослин і тварин
- •4.4. Скринінг
- •4.5. Експресія (функціонування) чужорідних генів в геномі бактерій, рослин і тварин
- •4.6. Вилучення генних продуктів у «брудній» суміші
- •Питання для самоперевірки
- •5. Методи виділення чистих культур мікроорганізмів
- •5.1. Допоміжні операції
- •5.1.1. Пересівання мікроорганізмів
- •5.1.2. Розлив агарізованих середовищ в чашки Петрі
- •5.2. Виділення чистої культури мікроорганізму
- •5.2.1. Крапельний метод
- •5.2.2. Методи поверхневого посіву на щільні середовища
- •Питання для самоперевірки
- •6. Морфологія мікроорганізмів
- •6.1. Макроморфологічні характеристики
- •6.1.1. Зростання у рідких середовищах
- •6.1.2. Зростання на щільних середовищах
- •6.2. Мікроморфологічні характеристики
- •6.2.1. Приготування препаратів живих культур
- •6.2.2. Приготування постійних (фіксованих) препаратів
- •6.2.3. Фарбування препаратів
- •6.2.4. Приготування розчинів барвників
- •6.2.5. Оцінка фізіологічного стану дріжджів за мікроморфологічними характеристикам.
- •6.2.6. Робота з оптичним мікроскопом
- •6.2.7. Вимірювання дріжджових клітин
- •Питання для самоперевірки
- •7. Біотехнологія і харчова промисловість
- •Найважливіші ферменти та галузі їх використання
- •7.1. Наявність каталази у продуктах рослинного та тваринного походження
- •Результати наявності ферменту
- •7.2. Використання мікроорганізмів у хлібопеченні
- •Питання для теоретичної підготовки
- •7.3. Мікроорганізми і виробництво молока і молочних продуктів
- •Показники якості кисломолочних продуктів
- •Класифікація молока по редуктазної пробі з використанням резазурину
- •Питання для теоретичної підготовки
- •8. Сучасні біотехнологічні методи та виробництва
- •8.1. Розрахунок компонентів цукрового сиропу і кольору та компонентів купажного сиропу
- •8.1.1. Розрахунок компонентів цукрового сиропу і кольору
- •Приклади
- •8.1.2. Розрахунок компонентів купажного сиропу
- •Приклади
- •Індивідуальні завдання до практичних занять
- •8.2. Полісахариди. Крохмаль та клітковина
- •8.2.1. Крохмаль.
- •8.2.2. Клітковина
- •Хід роботи
- •Хід роботи
- •Питання для самоперевірки
- •9. Застосування іммобілізованих ферментів і клітин в біотехнології
- •9.1. Іммобілізація клітин Рseudomonas fluorescens в гелі альгінат кальцію
- •Питання для теоретичної підготовки
- •10. Клітинна інженерія рослин
- •10.1. Метод вегетативного клонування рослин (клонального мікророзмноження)
- •10.2. Культивування калюсних тканин
- •10.3. Приготування поживних середовищ для культивування ізольованих клітин і тканин рослин
- •10.4. Приготування поживного середовища Мурасіге-Скуга (м-с)
- •Склад поживних середовищ, що використовують
- •Питання для самоперевірки
- •10.5. Отримання і культивування калюсної тканини з коренеплодів моркви
- •Питання для самоперевірки
- •11. Екологічна біотехнологія
- •11.1 Очищення стічних вод
- •11.2. Біохімічні методи очищення стічних вод
- •11.3. Розрахунок можливості сумісного очищення виробничих та
- •11.4. Розрахунок витрати стічних вод в аеротенках
- •Питання для самоперевірки
- •12. Сільськогосподарська біотехнологія
- •Питання для самоперевірки
- •Перелік навчальної літератури
- •Додаток Відповіді на завдання
- •Методичні рекомендації
- •54029, М.Миколаїв, вул. Паризької комуни, 9
Способи та режими стерилізації
№ |
Матеріал, що стерилізується |
Спосіб стерилізації |
Режим стерилізації |
Примітка |
1. |
Поживні середовища: - рідкі та агарізовані, що не містять компонентів, що розкладаються при 120°С
- рідкі та агарізовані, з цукрами та іншими речовинами, що не витримують нагрівання 120°С
|
Автоклаву вання
Автоклаву вання
Дробова стерилізація
Автоклаву вання |
120°С (0,1 МПа) 20 хв.
110°С (0,05 МПа) 15…30 хв.
Текучій пар (100°С) 30…60 хв. 3 дня поряд
115°С (0,07 МПа) 25…40 хв. |
У колбах, пробірках, флаконах та ін., що закрити ватними пробками із паперовими ковпачками
Теж саме
|
2. |
Колби, хімічні стакани, флакони, пробірки |
Сухій жар
Автоклаву вання |
160…170°С 90 хв.
120°С (0,1 МПа) 20 хв. |
Теж саме
|
3. |
Чашкі Петрі, піпетки, шпателі |
Сухій жар
Автоклаву вання |
160…170°С 90 хв.
120°С (0,1 МПа) 30 хв. |
Загорнуті у папір
Теж саме |
4. |
Держателі бактеріальних фільтрів, гумові пробки та шланги, фільтри Зейтца |
Автоклаву вання |
120°С (0,1 МПа) 20 хв. |
Загорнуті у папір
|
5. |
Мембранні фільтри |
Автоклаву вання
кип’ятіння |
110°С (0,05 МПа) 15 хв.
30 хв. (2…3 рази змінюють воду) |
У сосуді з дистильованою водою |
Завдання 1.
У загальному вигляді система біотехнологічного виробництва продуктів мікробного синтезу представлена на схемі (рис.4).
1. Скільки стадій біотехнологічного виробництва Ви знаєте? Назвіть їх і охарактеризуйте відбуваються в них процеси.
П |
|
Підготовка посівного матеріалу |
|
Поживне середовище |
||||
|
|
|
|
|
||||
|
|
Культивування |
|
|
||||
|
|
|
|
|
||||
|
|
Розподілення |
|
|
||||
|
|
|
|
|
||||
К |
|
|
|
Клітини |
||||
|
|
|
|
|
||||
|
|
Біомаса вбитих клітин |
|
Біомаса живих клітин |
||||
клітин |
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
||||
Виділення и очищення метаболітів |
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
||||
Концентрування |
|
Концентрування |
|
Концентрування |
||||
|
|
|
|
|
||||
С |
|
Стабілізація продукту |
|
Стабілізація продукту |
||||
|
|
|
|
|
||||
Зневоднення |
|
Зневоднення |
|
Зневоднення |
Сухий продукт |
|
Рідкий продукт |
|
Сухий продукт |
|
Рідкий продукт |
|
Сухий продукт |
|
Рідкий продукт |
З
берігання
Використання
Рис.4. Принципова біотехнологічна схема виробництва продуктів мікробного синтезу
2. Розкажіть про технології приготування поживних середовищ для мікробіологічного синтезу речовини. Що входить до складу поживного середовища? Особливості введення в середу джерел вуглецю.
3. Асептика при приготуванні поживного середовища в процесі мікробіологічного синтезу. Стерилізація газових і рідинних потоків. Вимоги до хімічних антисептиків.
4. Чи потребує стерилізації середовище, в якому субстратами служать метанол, етанол або концентрована оцтова кислота? Чому? Як досягається дотримання асептики в даному випадку?