Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
BIOCHIM-int.doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
739.33 Кб
Скачать

4. Реакція відновлення вітаміну в2 (рибофлавіну)

Принцип методу. Водень, який утворюється при додаванні металічного цинку до концентрованої соляної кислоти, відновлює жовтий рибофлавін спочатку до родофлавіну (проміжної сполуки) червоного кольору, а потім до безбарвного лейкофлавіну.

Обладнання та реактиви: Штатив із пробірками, піпетки градуйовані, 0,025 %-ий розчин вітаміну В2 (завись рибофлавіну), концентрована соляна кислота, металічний цинк.

Хід роботи. В пробірку внести 1 мл розчину вітаміну В2, 0,5 мл концентрованої соляної кислоти та опустити в неї шматок металічного цинку. Водень, який виділяється при цьому, реагує з рибофлавіном і відновлює його. При цьому вміст пробірки поступово забарвлюється в рожевий колір, а потім знебарвлюється. При збовтуванні знебарвленого розчину лейкофлавін знову окислюється киснем повітря в рибофлавін.

5. Якісні реакції на вітамін с

Принцип методу. Аскорбінова кислота здатна легко вступати в окисно-відновні реакції та відновлювати 2,6-дихлорфеноліндофенол, гексоціано-(III) феррат калію, нітрат срібла, метиленовий синій. При цьому окислена форма 2,6-дихлорфеноліндофенолу (синій колір) і метиленовий синій відновлюються в безбарвні лейкосполуки, а K3Fe(CN)6 відновлюється до K4Fe(CN)6, який із йонами валентного заліза дає сіль Fe4[Fe(CN)6]3 синього або зеленого забарвлення.

Обладнання та реактиви: Штатив із пробірками, крапельниці, піпетки градуйовані, термостат, 0,4 %-ий розчин аскорбінової кислоти, 0,1 %-ий розчин 2,6-дихлорфеноліндофенолу, 10 %-ий розчин соляної кислоти, 0,01 %-ий розчин метиленового синього, 10 %-ий розчин карбонату натрію, 1 %-ий розчин гексоціано-(III) феррат калію (K3Fe(CN)6), 1 %-ий розчин хлориду заліза (ІІІ), дистильована вода.

Хід роботи:

А. Реакція з 2,6-дихлорфеноліндофенолом. У пробірку внести 0,5 мл розчину 2,6-дихлорфеноліндофенолу, 1-2 краплі розчину соляної кислоти та краплями розчин аскорбінової кислоти. При цьому розчин 2,6-дихлорфеноліндофенолу знебарвлюється.

Б. Реакція з метиленовим синім. У дві пробірки внести по одній краплі розчину метиленового синього та по одній краплі розчину карбонату натрію. В першу пробірку прилити 5 крапель розчину аскорбінової кислоти, в другу – 5 крапель води та обидві пробірки поставити в термостат при температурі 37-40º С. Через деякий час рідина в пробірці з розчином аскорбінової кислоти знебарвиться.

В. Реакція з гексоціано-(III) ферратом калію. До 1 мл розчину аскорбінової кислоти додати 1 мл розчину K3Fe(CN)6 і 0,5 мл розчину хлориду заліза (ІІІ). При цьому спостерігається утворення синьо-зеленого забарвлення.

6. Якісні реакції на вітамін в5 або рр

Принцип методу. Вітамін В5 при нагріванні з розчином ацетату міді утворює погано розчинний синій осад мідної солі. Цей вітамін також відновлює гідросульфіт натрію з утворенням сполуки жовтого кольору. При нагріванні його з 2,4-динітрохлорбензолом у присутності лугу утворюється забарвлена сполука.

Обладнання та реактиви: Ваги технохімічні, штатив із пробірками, крапельниці, піпетки градуйовані, скляні палички, водяна баня, фарфорова чашка, годинник, порошок вітаміну В5, 0,1 %-ий спиртовий розчин нікотинової кислоти або нікотинаміду, 10 %-ий розчин оцтової кислоти, 5 %-ий розчин ацетату міді, 10 %-ий розчин карбонату натрію, 5 %-ий розчин гідросульфіту натрію (NaHSO3), 1 %-ий спиртовий розчин 2,4-динітрохлорбензолу, 4 %-ий спиртовий розчин гідроксиду натрію.

Хід роботи:

А. Реакція з ацетатом міді. В пробірку внести 5-10 мг вітаміну В5 і розчинити його при нагріванні в 1-2 мл оцтової кислоти. До цього розчину, доведеного до кипіння, додати такий же об’єм розчину ацетату міді. Рідина при цьому стає мутною та забарвлюється в голубий колір. При відстоюванні випадає синій осад мідної солі нікотинової кислоти.

Б. Реакція з гідросульфітом натрію. В пробірку внести 5-10 мг вітаміну В5, додати сюди 1,5 мл розчину карбонату натрію, перемішати та додати 1,5 мл свіжоприготовленого розчину гідросульфіту натрію. Рідина при цьому забарвлюється в жовтий колір.

В. Реакція з 2,4-динітрохлорбензолом. У фарфорову чашку для випарювання налити 1 мл спиртового розчину нікотинової кислоти або нікотинаміду. Розчин випарити до сухого на водяній бані. До сухого залишку додати 1 мл спиртового розчину 2,4-динітрохлорбензолу та добре перемішати скляною паличкою. Отриманий розчин знову випарити на водяній бані до сухого під витяжною шафою. Після цього ще продовжити нагрівання впродовж 10-15 хв. Чашку охолодити до кімнатної температури та до осаду додати 5 мл спиртового розчину гідроксиду натрію. При цьому з’являється червоне забарвлення, яке при стоянні суміші світлішає та поступово зникає.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]