Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Зангятия № 1 -4 Microsoft Office Word.doc
Скачиваний:
1
Добавлен:
01.05.2025
Размер:
305.15 Кб
Скачать

Занятие № 2

Дата________________

Тема: МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ.

МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ. СТРОЕНИЕ

БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ

План занятия

1. Микроскопические методы исследования:

1.1. Электронная микроскопия.

1.2. Фазовоконтрастная микроскопия.

1.3. Метод люминесцентной микроскопии.

1.4. Темнопольная микроскопия.

2. Морфология микроорганизмов:

2.1. Морфология бактерий. Демонстрация готовых препаратов.

2.2. Жгутики бактерий. Демонстрация готовых препаратов.

2. 3.Наблюдение подвижности бактерий в препарате "висячая капля" и c помощью фазовоконтраcтного микроскопа. Метод полужидких сред (Пешкова).

3. Сложные методы окраски микробов в изучении их структуры:

3.1. Изучение структуры клеточной стенки бактерий, окраска по Граму.

3.2. Включения у бактерий. Демонстрация препарата «зерна волютина окраска по Нейссеру».

3.3. Капсула бактерий, бактериоскопическое исследование препарата-мазка из культуры палочки Фридлендера по методу Бурри-Гинса

3.4.Споры у бактерий. Исследование спор у Streptobacillus в неокрашенных препаратах (раздавленная капля) и в препаратах-мазках, окрашенных водным фуксином и по Клейну.

Методические указания

1. Микроскопические методы исследования

1.1. Электронная микроскопия

Возможности световых микроскопов ограничены волновой природой света. При оптимальных условиях световые микроскопы позволяют наблюдать, вследствие явления дифракции, объекты размером не менее 1/2 - 1/3 длины световой волны (около 0,2μ).

Наибольшими возможностями в смысле разрешающей способности обладают электронные микроскопы, в которых пучок света заменен пучком электронов, длина волны которых составляет 0,04-0,05Å. Теоретически разрешение просвечивающего электронного микроскопа составляет 0,002 нм, на практике современные электронные микроскопы дают разрешение не более 0,2 – 2 нм (в зависимости от типа объекта).

Принципиальная оптическая схема электронного микроскопа аналогична схеме светового микроскопа, в котором все оптические элементы заменены соответствующими электрическими: источник света заменен источником электронов, стеклянные линзы - линзами электромагнитными, В электронных микроскопах просвечивающего типа различают три системы: электронно-оптическую, электропитания, вакуумную.

Электронно-оптическая система снабжена двумя конденсорными, объективной, промежуточной и проекционной линзами, обеспечивающими увеличение электронного микроскопа от 300 до 200000 крат. Промежуточная и проекционная линзы обеспечивают плавное изменение увеличения при постоянном поле изображения.

Вакуумная система электронного микроскопа позволяет получать и поддерживать в процессе работы рабочий вакуум 2·10-4 мм рт. ст. в колонне микроскопа, производить шлюзование камеры объекта и фотокамеры.

Источником пуска электронов является электронная пушка, состоящая из V -образного вольфрамового термокатода, который при нагревании до 2900° С в результате термоэмиссии испускает свободные электроны, ускоряемые затем электростатическим полем, создаваемым между фокусирующим электродом и анодом. Электронный пучок затем формируется с помощью конденсорных линз и направляется на исследуемый объект. Электроны, проходя сквозь объект, за счет его различной толщины и плотности отклоняются под различными углами и попадают в объективную линзу, которая формирует первое увеличенное изображение объекта. После объективной линзы электроны попадают в промежуточную линзу, которая предназначена для плавного изменения увеличения микроскопа и получения диффракции с участков исследуемых образцов. Проекционная линза создает конечное увеличенное изображение объектов, которое направляется на флуоресцирующий экран. Благодаря взаимодействию быстрых электронов с веществом люминофора Флуоресцирующего экрана на нем возникает видимое изображение объекта. Увеличение конечного изображения на экране определяется как произведение увеличений, даваемых объективной, промежуточной и проекционной линзами.