Методические указания.

1. Способы стерилизации и дезинфекции лабораторной посуды и

лечебного инструментария

Теоретически разобрать принципы и физико-химические основы деконтаменации, учитывая особенности разрушения бактерий, грибов и их спор, вирусов, вироидов и прионов. Познакомиться с современными методами дезинфекции и контролем над ее эффективностью.

Разобрать последовательность и особенность предстерилизационной обработки в зависимости от объекта стерилизации. Познакомиться и осуществить предстерилизационную обработку и упаковку оборудования для обработки сухим жаром и паром под давлением. Изучить основные методы стерилизации, оборудование, которое используется для ее осуществления.

2. Определить по готовым посевам антибактериальное действие

УФ-лучей в отношении стафилококка и кишечной палочки,

зарисовать демонстрацию

Методика исследования: 1 мл суспензии стафилококка или кишечной палочки в изотоническом растворе хлорида натрия поместить на стерильное часовое стекло и облучить лампой 15 мин на расстоянии 10 – 20 см засеять на МПБ и инкубировать 16 – 24 ч параллельно с контролем из необлученной культуры. Помутнение, свидетельствующее о росте должно наблюдаться только в контрольной пробирке. Просмотреть результаты исследования и зарегистрировать в таблице.

Табл.1. Бактерицидное действие УФ-лучей на взвесь бактерий

№/п.	Культура бактерий	Облучение УФ-лучами
		Опыт	Контроль
1.	E. coli
2.	S. aureus

Заключение:

3. Бактериологическое изучение антибактериального действия спирта,

перманганата калия, хлорамина на культуры стафилококка и кишечной

палочки, зарегистрировать результаты

Методика изучения: диски фильтровальной бумаги смачивают раствором исследуемого дезинфицирующего вещества и помещают на поверхность МПА в чашки Петри, засеянные «газоном» культурами стафилококка и кишечной палочки. Чашки инкубируют при 37⁰ С в течение 24 ч. Зарегистрировать результаты проведенного опыта в таблице.

Табл. 2. Результаты исследования бактерицидных свойств ряда химических дезинфектантов.

№/п.	Культура бактерий	Диаметр задержки роста бактерий, в мм.
		этанол	перманганат калия	хлорамин
1.	E. coli
2.	S. aureus

Заключение:

4. Тестовый контроль по теме: «стерилизация и дезинфекция»

5. Знакомство с питательными средами, применяемыми для выращивания бактерий

Для культивирования бактерий in vitro в бактериологической практике применяют питательные среды.

Питательные среды должны отвечать следующим требованиям: а) содержать все необходимые питательные вещества, витамины и соли; б) иметь оптимальную рН, обладать буферными свойствами; в) быть достаточно влажными (требование для плотной среды); г) достаточно вязкими; д) стерильными; е) изотоничными, ж) быть прозрачными (необязательное условие).

Питательные среды не однородны и классифицируются по нескольким критериям. По назначению выделяют:

1) универсальные среды - растет большинство видов бактерий (мясопептонный агар - МПА, мясопептонный бульон - МПБ);

2)специальные среды (кровяные, сахарные, сывороточные) - для культивирования бактерий, плохо растущих на универсальных средах (среды более богатые по составу);

3) избирательные (элективные, селективные) среды – используют для избирательного култивирования микроорганизмов определенных видов при подавлении роста других микроорганизмов (желчь, желчный бульон, пептонная вода, свернутая сыворотка);

4) дифференциально-диагностические среды – позволяют различать бактерии по их росту, биохимической активности и др. признакам (Эндо, Левина, Плоскирева, среды "пестрого ряда" и др.);

5) накопительные среды – это жидкие питательные среды, применяются для накопления бактерий определенной группы, в результате их преимущественного размножения по сравнению с сопутствующими микробами (селенитовая среда, среда Мюллера и др.).

6) транспортные и консервирующие среды – среды для временного сохранения микроорганизмов после взятия исследуемого материала и до его посева (жидкие среды, не содержащие агар и не предназначенные для культивирования бактерий, обычно содержат только буферные и солевые растворы);

7) среды для хранения культур предназначены для длительного сохранения чистых культур микроорганизмов в условиях лаборатории, состав зависит от требовательности конкретного вида бактерий, для большинства 0,7 % агар, приготовленный на основе сахарного бульона.

По консистенции – жидкие, полужидкие, плотные.

По составу: простые, сложные; по происхождению составляющих их компонентов - синтетические, полусинтетические, натуральные.