Окраска по Цилю — Нильсену
1. Краски и реактивы:
карболовый фуксин (фуксин Циля): 1 г основного фуксина, 2–
3 капли глицерина, 10 мл 96% этанола, 100 мл 5% раствора фе-
нола. К фуксину, помещенному в фарфоровую ступку, прибавля-
ют глицерин, хорошо растирают, постепенно приливают этанол
и раствор фенола; оставляют на сутки, фильтруют;
3% спиртовой раствор хлористоводородной кислоты: 3 мл концен-
трированной соляной кислоты (относительная плотность 1,19)
и 97 мл 96% этанола.
0,5% водный раствор метиленового синего: 5 г метиленового сине-
го растворяют в одном литре воды.
2. Техника окраски
На фиксированный препарат кладут фильтровальную бумагу, на-
ливают фуксин Циля, пинцетом берут предметное стекло и держат над
пламенем горелки до появления паров, охлаждают и снова нагревают
(3 раза). Дают препарату остыть в течение 3–5 минут, снимают фильтро-
вальную бумагу, промывают водой, погружают в 3% спиртовой раствор
соляной кислоты на 5 минут для обесцвечивания. После этого препарат
промывают водой и вновь проводят обесцвечивания. Материал должен
иметь серовато-розовый цвет. Затем препарат докрашивают метиле-
новым синим в течение 20–30 с, промывают водой и высушивают на
воздухе. Высушенный препарат рассматривают под микроскопом с им-
мерсией с поднятым конденсором.
Микобактерии туберкулеза окрашиваются в красный цвет (все
остальные элементы — в синий), имеют вид тонких, слегка изогнутых
палочек разной длины с утолщением на концах или по середине, распо-
лагаются группами или поодиночке.
В лабораторной практике используется также метод люминесцент-
ной микроскопии для обнаружения микобактерий туберкулеза: на чер-
ном фоне препарата микобактерии туберкулеза имеют вид золотисто-
желтых светящихся палочек.
Окраска по Граму
1. Краски и реактивы
10% раствор карболового фуксина: 1 часть карболового фуксина
(фуксина Циля) + 9 частей дистиллированной воды;
реактив Люголя: 2 г йодида калия растворяют в 300 мл дистилли-
рованной воды, в полученном растворе растворяют 1 г кристалли-
ческого йода; реактив хранят в посуде из темного стекла;
карболовый раствор генцианового фиолетового (генцианвиоле-
та): 1 г красителя растирают в ступке с 2 г карболовой кислоты,
прибавляя небольшими порциями 10 мл 96% этанола; смесь сли-
вают в градуированный цилиндр, смывая ее порциями дистилли-
рованной воды, доводят дистиллированной водой до метки 100 мл;
оставляют на сутки, затем фильтруют.
2. Техника окраски
На фиксированный препарат накладывают фильтровальную бу магу
и поверх наливают карболовый раствор генцианового фиолетового на
1–2 мин. Снимают фильтровальную бумагу, опускают в раствор Люголя
на 2 мин, обесцвечивают в 96% спирте до сероватого цвета, промывают
в воде, затем докрашивают 10% раствором карболового фуксина в тече-
ние 10–15 с. После этого препарат опять промывают водой, высушивают
и микроскопируют с иммерсионным объективом.
В препаратах мокроты, окрашенных по Граму, могут быть об-
наружены стрептококки, стафилококки, диплобациллы (палочки
Фридлендера), диплококки Френкеля и другие микроорганизмы.
Для подтверждения правильности нахождения этих бактерий
и определения чувствительности их к антибиотикам производится по-
сев мокроты на питательные среды.
Изменения в мокроте при бронхите.
Бронхит хронический
Бронхиальной астме.
Хроническая пневмония.
Абсцесс легкого
Туберкулез
Гангрена легких
Бронхоэктатическая болезнь
Актиномикоз
Эхинококкоз
Опухоли