1. Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Дифтерии. Факторы вирулентности.

2. Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Туберкулеза. Факторы вирулентности.

3. Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных заболеваний.

4. Микробиологическая диагностика и профилактика стрептококковых заболевании

5. Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Сифилиса.

6. Микробиологическая диагностика и профилактика стфилококковых заболеваний

7. Морфологические культуральные и биохимические свойства стафилококков. Факторы вирулентности.

8. Морфологические культуральные и биохимические свойства стрептококков. Факторы вирулентности. (S. Mutans).

9. Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика менингита.

10. Микробиологическая диагностика и профилактика гонореи.

11. Специфическая профилактика и терапия столбняка.

12. Основные отличия вирусных болезней от бактериальных.

13. Отличия живой системы от неживой. Определение и формула жизни.

14. Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Холеры.

15. Морфологические культуральные и биохимические свойства гонококков. Факторы вирулентности.

16. Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Газовой гангрены. Факторы вирулентности.

17. Микробиологическая диагностика бруцеллеза.

18. Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Столбняка. Факторы вирулентности.

19. Морфологические, культуральные и биохимические свойства возбудителя Ботулизма. Факторы вирулентности.

20. Микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и терапия Газовой гангрены.

21. Морфологические культуральные и биохимические свойства возбудителей бру¬целлеза . Факторы вирулентности.

22. Полимеразоцепная реакция (ПЦР), ИФА.

23. Способы культивирования вирусов.

24. Сущность и этапы бактериологичегого метода исследования.

25. Варианты постановки реакции агглютинации.

26. Способы микроскопического изучения вирусов.

27. Способы культивирования анаэробов.

28. Постановка и использование, реакции торможения гемагглютинации.

29. Метод культуры ткани.

30. Методика постановки реакции связывания комплемента.

31. Способы приготовления мазков для микроскопии.

32. Варианты постановки реакции преципитации.

33. Способы определения токсигенности культур.

34. Состав и цели использования минимальной среды.

35. Постановка и использование реакции пассивной гемагглютинации.

36. Постановка и использование реакции гемагглютинации.

37. Метод окраски препаратов по Цилю-Нильсеиу.

38. Методика получения чистой культуры.

39. Способы идентификации выделенной культуры.

40. Способы стерилизации питательных сред

1 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Дифтерии. Факторы вирулентности. Возбудителем явл коринебактерия. Морфолог св-ва: палочка, на концах имеет утолщения – волютин (по хим составу явл полифосфатами). В чистой культуре располагается под углом. Гр+ , красят ее уксусно-кислой синькой, либо по Нейсеру. Имеет микрокапсулу, и в клеточной стенке факторы адгезии. Культивирование: требовательная, растет на средах с добавлением сыворотки: среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка), среда Леффлера (три части свернутой сыворотки и одна часть сахарного бульона). Эти сыворотки используют для получения чистых культур. Первичный посев делают на кровяно-теллуритовые среды (среда Клауберга), где подавляется рост сопутствующей флоры. На этих средах различают три биовара: 1 – gravis (R-формы, серые с шероховатыми краями), 2 – mitis (S-форма, гладкие, блестящие, с ровными краями, черного цвета), 3 – intermedius. Резиденты – ложная дифтерийная палочка (палочка Гоффмана), обитает на слизистых полости рта. Палочка Xerosis – обитает на слизистой носа. Ложные палочки на этих средах будут коричневого цвета. Биохимическая активность: наряду с другими ферментами возбудитель дифтерии обладает цистиназой и уреазой. Gravis ферментирует крахмал и гликоген в отличие от mitis. Факторы вирулентности: фактор адгезии клеточной стенки, корд-фактор, фактор инвазивности – гиалуронидаза, экзотоксин – действием которого обьясняется патогенез заболевания.

3 Морфологические, культуральные, биохимические свойства возбудителя Туберкулеза. Факторы вирулентности. Источник инфекции – больной человек. Морфологические свойства: тонкая, изящная, слегка изогнутая, гр+. Из–за высокого содержания липидов окрашивается по Цилю-Нильсену (красный цвет). Имеет кислотоустойчивые участки (зерна Муха). Под действием лек препаратов превращается в: L формы, фильтрующиеся формы (проходит через бактериальные фильтры), ветвящиеся формы. Культуральные св-ва: размножается медленно, требовательная (глицерин, желток, картофельная мука, аспарагиновые кислоты и др). Культивируют ее на среде Левенштейн-Йенсена (желток, картофельная мука, аспарагиновая кислота, малахитовая зелень для подавления сопутствующей микрофлоры). Растет 3-4 недели. Биохимические свойства: микобактрии туберкулеза дают положительный результат при ниациновом тесте, редуцируют нитраты, разлагают мочевину, никотинамид, пиразинамид. Факторы вирулентности: к пептидогликану через фосфарные остатки присоединяется вещ-во ЛАМ (липидоарабиноманозный комплекс). Маноза на верхушке ЛАМ дает сродство к макрофагам. Имеется корд-фактор в состав которого входят миколиевые кислоты.. Этот фактор имеется только у вирулентных форм. В кл стенке нах-ся белковые молекулы – туберкулопротеины. Также имеются гликолипиды, которые придают устойчивость во внешней среде. Сульфолипиды – нарушают переваривание туберкулезной палочки в фагосоме (незавершенный фагоцитоз).

8 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика кишечных заболеваний. Для большинства кишечных инфекций ведущим методом диагностики является бактериологический. Исследуемый материал (фекалии) засевают на дифференциально диагностическую среду (Эндо) и ставят в термостат. Через сутки выросли 2 типа колоний: 1 – Lac+ - гладкие, малинового цвета с металлическим отливом, круглой формы Е.Соli. 2 – Lac- - бесцветные колонии (патогенные микробы). Из колонии Lac-: 1 – приготовлен мазок, окрашен по грамму. При микроскопии – Гр- палочки. 2 – Определение подвижности методом “висячей капли”. 3 – Получение чистой культуры (среда Ресселя). Для определения родовой принадлежности Гр- палочек ставят реакцию аггютинации на стекле с поливалентными агглютинирующими сыво-ротками (сальмонеллезными, эшерихиоз-ными, дизентерийными). Допустим реакция положительна с сальмонеллезной сыворот-кой Þ Гр- палочка относится к роду Salmonella. Исследуемую сальмонеллу пересевают на среду Ресселя для выделения чистой культуры. Идентификация сальмонелл: 1 – Посев на среды Api или Enterotest или Enterotube для определения б/х активности. 2 – Для более точного определения вида сальмонелл ставят реакцию агглютинации на стекле с сальмонелезными сыворотками. Профилактика: проведение санитарно-гигиенических мероприятий, заключающихся, в частности, в правильной обработке мяса и др пищевых продуктов.

14 Микробиологическая диагностика и профилактика стрептококковых заболевании

Методы диагностики: Основной метод диагностики – бактериологический. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на кровяной агар для получения изолированных колоний. Затем производят учет результатов посева: характрер колонии, характер гемолиза. По характреу гемолиза на кровяном агаре стрептококки делятся на 3 группы: а – b-гемолитические – образуют вокруг колонии полностью прозразную зону гемолиза, б – a-гемолитические – неполный гемолиз, образующийся метHb дает зеленоватый оттенок (зеленящий стрептококк), в – g – негемолитические стрептококки. Затем выросшие изолированные колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры. Заключительный этап – идентификация чистой культуры по культуральным признакам, сероидентификация и серотипирование (определение серогруппы). Серогруппу стрептококков определяют в реакции преципитации с экстрактом из исследуемой культуры и группоспецифическими сыворотками (4 наиболее распространенные серогруппы – А, В, С, Д). Иммунитет: антитоксический, антимикробный, типоспецифический, нестойкий, с тенденцией к подавлению фагоцитоза, с образованием L-форм, к хронизации процесса. Специфической профилактики нет. Лечение – антибиотикотерапия.

6 Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика Сифилиса.

Методы диагностики: 1 – микроскопический (1-2 ст), 2 – серологический (реагиновые тесты, когда в качестве антигена используют кардиолипиновый антиген из сердечной мышцы быка), 3 – специфические реакции, когда используются трепонемальные тесты (трепонема Никольса – культуральные спирохеты, выращенные на искуственной питательной среде и не обладающие вирулентностью, антигенными св-ми отличаются от бледной спирохеты). Из трепонемальных тестов в настоящее время используют иммунофлюорисцентный адсорбционный тест (ИФАТ) и трепонемальную микрогемагглютинацию. Постановка реакции Вассермана: Для постановки реакции связывания комплемента по Вассерману при подозрении на сифилис необходимы сле­дующие компоненты: 1. Исследуемая сыворотка больного в разведении 1:5. Исследуемую сыворотку необходимо прогреть в тече­ние 30 минут при температуре 56°С для разрушения (инакти

вации) комплемента. 2.Неспецифический антиген – кардиолипиновый анти­ген – холестеринизированный спиртовой экстракт из сердечной мышцы быка. 3.Комплемент – в качестве комплемента используют сыворотку морской свинки. Так как количество ком­племента должно быть строго определенным, компле­мент берут в рабочей дозе (титр, увеличенный на 25-30%). Титр комплемента – это минимальное его коли­чество, при котором еще происходит гемолиз.. 4.Гемолитическая система – это смесь гемолитической сыворотки и эритроцитов барана, которую перед по­становкой РСК выдерживают в термостате при 37°С в течении 30 минут для адсорбции гемолизинов на по­верхности эритроцитов. Реакцию Вассермана ставят по методи­ке РСК. Отсутствие гемолиза в опытной пробирке свидетельствует о положительной реакции Вассер­мана. Наличие гемолиза в опытной пробирке – отрицательная реакция Вассермана (человек здоров). Иммунитет изучен недостаточно 1 ст у 30% болезнь заканчивается самоизличением и повторного заражения не происходит. 2 ст у части людей не происходит заражения на второй стадии, т.к спирохета не изменяет свои антигенные св-ва. Профилактика: специфической профилактики нет, неспецифическая – соблюдени правил гигиены, учет и госпитализация больных сифилисом.

12 Микробиологическая диагностика и профилактика стфилококковых заболеваний. Лечение и профилактика: а – вакцины, сыворотки, g-глобулины – для всех инфекций, б – профилактика – стафилококковый анатоксин – вводится тем лицам, которым предстоят серьезные пластические операции. Смотрим на стойкость иммунитета и на типоспецифичность. С целью лечения стафилококковый анатоксин может использоваться при хронических инфекциях (пиодермия, пневмония, остеомиелит). Для профилактики – искусственный, активный, антитоксический стафилококковый анатоксин; в – аутовакцинотерапия – от больного выделяют его штамм стафилококка, убивает его и вводят собственный аутоштамм; г – стафилококковый g-глобулин (содержит антитела) – применяют для лечения хронических инфекций, д – гиперимунная антитоксическая донорская плазма – получают путем иммунизации донора стафилококковым анатоксином; применяют для лечения стафилококкового сепсиса. Методы диагностики. Основной метод диагностики – бактериологический. Для выделения чистой культуры исследуемый материал засевают на кровяной, молочно-солевой и желточно-солевой агары. Выросшие изолированные колонии пересевают на скошенный агар для получения чистой культуры. Идентификацию чистой культуры проводят по морфологическим, культуральным и б/х св-вам, затем определяют факторы вирулентности. Для определения гемолитических св-в экзотоксина культура стафилококка засевается на кровяной агар и определяется зона гемолиза. Для определния фермента лецитиназы стафилококк засевают на желточно-солевой агар – вокруг колонии – зона помутнения среды за счет ресщепления лецитина. Для определения фермента плазмокоагулазы стафилококк засевают в цитратную плазму – происходит коагуляция плазмы с образованием сгустка фибрина. Для патогенного стафилококка хар-но сбраживание маннита в анаэробных условиях – при расщеплении маннита образуются кислые продукты, которые изменяют цвет индикатора в среде (индикатор Андреде – красная окраска, ВР – синюю). С целью идентификации можно провести фаготипирование. При стафилококковых инфекциях необходимо проверять чувствительность к антибиотикам (метод дисков). Лекарственная резистентонсть обуловлена: синтезом b-лактамазы, R-плазмидами, лизогенной конверсией.