4.1 Показатели клеточного, гуморального и фагоцитарного звеньев иммунитета под воздействием магнито-инфракрасно-лазерного облучения при эмоциональном стрессе

Полученные нами экспеpиментальные и литеpатуpные данные свидетель-ствуют о том, что пpи эмоциональном стрессе отчетливо пpоявляется иммуно-депpессоpный Исправить наpушение неспецифической pеистентности оpга-низма, клеточных и гумоpальных фактоpов иммунитета может только иммуно-модулиpующее воздействие, способное огpаничить выpаженность отдельных патологических pеакций и усилить защитно-пpиспособительные механизмы.

Наиболее перспективным является высокоэффективный магнито-инфракрасно-лазерный терапевтический аппарат. Отличительной особенностью его является возможность комплексного воздействия на организм сочетания импульсного лазерного и непрерывного некогерентного излучений инфракрас-ного диапазона совместно с постоянным магнитным полем.

Магнитолазерную терапию с успехом применяли при различных патологических состояниях /171, 225, 226, 279, 34, 227, 228/.

И все же, несмотря на значительные успехи достигнутые в вопросах применения лазеров в медицине, остаются недостаточно изученными иммунологические и биохимические механизмы воздействия низкоэнерге-тического лазерного излучения на организм, а предлагаемые методы лазеро-терапии требуют дальнейшего совершенствования.

В доступной литературе нам не удалось встретить работ по изучению влияния МИЛ-терапии на иммунную систему, и ферменты энергетического обмена в селезенке, печени и надпочечниках при эмоциональном стрессе.

Все выше изложенное свидетельствует о том, что изучение действия магнито-инфракрасно-лазерного излучения при эмоциональном стрессе в эксперименте, представляет по существу не достаточно исследованную проблему. Выявление иммунологических и биохимических механизмов антистрессорного действия указанных физических факторов воздействия, разработка на этой основе способов применения, оптимальных дозировок, показаний и противопоказаний представляют особую актуальность и имеют как теоретическое, так и практическое значение.

В этой связи в наших экспериментах у животных облучали кровеносную сеть наpужной ушной pаковины в течение 3 минут на пpотяжении 5 суток аппаpатом МИЛТа.

Нами в опыт было взято 60 белых половозрелых беспородных крыс в возрасте 3-4 месяцев. После воздействия магнито-инфракрасно-лазерным излучением животных подвергали эмоциональному стрессу. Через 1, 2 и 3 сутки животных забивали и у них определяли соответствующие иммунологические и биохимические показатели. В качестве контрольного для данной серии служили контрольные животные из предыдущей серии.

У интактных животных магнито-инфракрасно-лазерное воздействие вызывало повышение процентного и абсолютного числа лимфоцитов (таблица 15 и рис 6).

Таблица 15

Показатели клеточного иммунитета при эмоциональном стрессе на фоне магнито-инфракрасно-лазерного воздействия

Показатели ( 1мкл)	Исх	После стресс-воздействия 1 сутки 2 сутки 3 сутки
1. Лейкоциты	6861+748	4625+364о*	8125+849,5	7222+251,4
2. Лимфоциты	1. 65,2+2,6* 2. 4405+191*	64+2,4 2950+149,3 о*	64,5+5,3 5092+128,6 о	51,2+2,5 о 3720+137,5 о
3. Т-общие	1. 16+1,3* 2. 714+20*	34,5+2,4 о 1054+139,2 о**	22,3+1,7 о* 1163,7+80,3 о*	30.4+1,5 о 1189+94 о*
4. Т-хелперы	1. 9,0+1,2* 2. 401+40*	29,7+3,1 о** 959+54,4 о	16+0,9 о* 814,3+46,4 о*	19,2+0,8 о 714+25,1 о*
5.Т-супрессоры	1. 8,2+0,8* 2. 315+35*	4,3+0,3 о** 113,5+15,8 о**	6,25+0,73 о* 318.5+33,5 о*	11,4+1.5 о 431+61* о
6. Тх/Тс (ед)	1,13+0,08**	7,4+0,6** о	2.6+0,07** о	1,7+0,06** о
7. РТМЛ (ед)	0,78+0,09	0,66+0,07 о*	0,8+0,05**	0,81+0,04*

Примечание: 1 - %, 2 – абс. числа, ^о – достоверность к исходному (P<0,05), ^{о о} -(P<0,001). *- достоверность к контролю (P<0,05), **-(P<0,001).

При этом в 2 раза отмечалось снижение количества Т-общих лимфоцитов; соответственно были снижены субпопуляции Т-лимфоцитов -Т-хелперы и Т-супрессоры. Хелперно/супрессорный индекс составил 1,13+0,08, что достоверно ниже контрольного уровня.

Через 1 сутки после стрессорного воздействия на фоне магнито-инфракрасно-лазерного излучения число лейкоцитов достоверно снижалось с 6870+750 до 4625+356 в 1 мкл (P<0,05), в последующем их значения нарастали до исходного уровня.

Через 1 сутки после стрессорного воздействия в опытной группе абсолютное число лимфоцитов уменьшилось в 1,5 раза (P<0,05), на 2 сутки количество лимфоцитов достоверно превышало исходный показатель, на 3 сутки этот показатель вновь снижался ниже исходного и контрольного уровней.

Несмотря на повышение абсолютного и относительного числа Т-общих лимфоцитов после стрессорного воздействия на фоне магнито-инфракрасно-лазерного излучения на всем протяжении наблюдения их значения были достоверно ниже контрольных.

В опытной группе через 1 сутки после стрессорного воздействия отно-сительное число Т-хелперов увеличилось в 3,3 раза (P<0,001), через 2 сутки данный показатель был достоверно меньше контрольного, через 3 сутки число Т-хелперов продолжало снижаться, но в то же время достоверно превышала исходный уровень.

Через 1 сутки после стрессорного воздействия в опытной группе в 1,9 раза снижалось относительное и абсолютное число Т-супрессоров (P<0,05) по отношению к исходному данному, в то время в контрольной группе относительное и абсолютное число Т-супрессоров в 3,2 и 9 раза (P<0,001) превышали опытные показатели.

На 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия на фоне магнито-инфракрасно-лазерного излучения относительное и абсолютное количество Т-супрессоров было ниже контрольных величин. Соответственно на всех этапах наблюдения хелперно/супрессорный индекс увеличивался до 7,6+0,6; 2,6+0,07 и 1,7+0,06 (P<0,001).

После завершения стресс-воздействия через 1 сутки и на всем протяжении эксперимента у контрольных животных наблюдалось повышение МИФ продуцирующей активности лейкоцитов, что нашло отражение в снижении индекса миграции лейкоцитов. В опытной группе повышение МИФ продуцирующей активности лейкоцитов тоже наблюдалось через 1 сутки после стрессорного воздействия. На 2 и 3 сутки данный показатель не отличался от своего исходного уровня, тогда как в контрольной группе индекс миграции был достоверно ниже опытного и исходного уровней.

Таким образом, на ранних стадиях стресс-реакции на фоне магнито-инфракрасно-лазерного излучения отмечено лейко- и лимфопения, увеличение Т-общих лимфоцитов с более низким содержанием лимфоцитов с супрессорной

активностью и более высоким содержанием лимфоцитов с хелперной активностью, повышением хелперно/супрессорного индекса и МИФ продуцирующей способности лейкоцитов. Переход в следующую стадию стресс-реакции характеризовалась нормализацией общего числа лейкоцитов, повышением количества Т-общих лимфоцитов за счет субпопуляции Т-хелперов и Т супрессоров и нормализацией МИФ продуцирующей способности лейкоцитов.

Нужно отметить, что у интактных животных под действием магнито-инфракрасно-лазерного излучения снижалась концентрация ЦИК в периферической крови, содержание АТОК в селезенке и индекс супрессии. При этом магнито-инфракрасно-лазерное излучение не оказывало существенного влияния на число В-лимфоцитов в крови (таблица 16 и рис 7).

В опытной группе показатели гуморального иммунитета изучались на фоне магнито-инфракрасно-лазерного излучения и эмоционального стресса. Как и в контрольной группе, в опытной относительное число В-лимфоцитов достоверно возрастало через 1 сутки после стрессорного воздействия. Максимальное повышение относительного и абсолютного числа В-лимфоцитов отмечалось через 2 сутки после стрессорного воздействия. На 3 сутки их количество оставалась на достаточно высоком уровне, но было ниже контрольного.

Показатели клеточного иммунитета при эмоциональном стрессе на фоне МИЛ-терапии

Рисунок 6

Таблица 16.

Показатели гуморального и фагоцитарного иммунитета при эмоциональном стрессе на фоне магнито-инфракрасно-лазерного воздействия

Показатели	Исходное	После стресс- воздействия (в сутках) 1 2 3
1. В-лимфоци-ты( в 1 мкл)	1. 6,1+1,3 2. 272+28	18,8+1,4 о 556.3+54,4 о*	28,5+0,73 о о** 1463,7+69,9 о**	29,5+3,2 о о 713,6+95 о**
2. ЦИК г/л	0,64+0,02**	0,67+0,019	0,83+0,023 о о*	0.92+0,017 о о*
3. АТОК %	10,1+0.5*	14+0,3 о о*	17+0,7 о о*	16,5+0,9 о о*
4. ИС %	80+6,1	46+4,5 о о	29+3,2 о о	5,7+0,9 о о

Примечание: 1 -%, 2 – абс. число. ^о - достоверно к исходному (Р<0,05)

* - достоверно к контрольному Р<0,05)

Концентрация ЦИК в сыворотке крови после стрессорного воздействия снижалась. После магнито-инфракрасно-лазерного облучения у животных отмечалось снижение концентрации ЦИК в сыворотке крови (Р<0,05), но на 2 сутки после стрессорного воздействия наблюдалось ее повышение. Высокая концентрация ЦИК в сыворотке крови отмечалось через 3 сутки после стрессорного воздействия и ее значения были достоверно выше контрольного и исходного уровней.

Одновременно с этим в опытной группе увеличивалось число АТОК в селезенке через 1, 2 и 3 сутки после стрессорного воздействия. Если в контрольной группе через 1 и 2 сутки после стрессорного воздействия число АТОК в селезенке достоверно превышал опытные показатели, то через 3 сутки их значения уравнялись.

В опытной группе индекс супрессии снижался с 80+6,1% на 1 сутки до 45,5+4,5%; на 2 сутки до 29,0+3,2% (Р<0,001); на 3 сутки до 5,7+0,9% (Р<0,001), тогда как в контрольной группе индекс супрессии был выше 50% в наблюдаемые сроки.

Таким образом, под воздействием магнито-инфракрасно-лазерного излучения повышается число В-лимфоцитов, концентрация ЦИК в периферической крови, количество АТОК в селезенке и снижение индекса супрессии.

Нами изучены влияния магнито-инфракрасно-лазерного излучения на показатели фагоцитарного звена иммунитета при эмоциональном стрессе (таблица 17 и рис8).

Из таблицы 17 видно, что у интактных животных магнито-инфракрасно-лазерное излучение не вызывает существенных изменений со стороны фагоцитоза, его числа и показателей НСТ-теста. На фоне магнито-инфракрасно-лазерного излучения при эмоциональном стрессе фагоцитоз увеличивается в 1,9 раза через 1 сутки (Р<0,05); в 2,2 раза через 2 сутки (Р<0,05) и в 1,5 раза на 3 сутки (Р<0.05). Нужно отметить, что несмотря на высокий фагоцитоз в опытной группе, данный показатель был достоверно ниже соответствующего контроля.

Показатели гуморального иммунитета при эмоциональном стрессе на фоне МИЛ-терапии

Рисунок 7

Таблица 17

Показатели фагоцитарного звена иммунитета при эмоциональном стрессе на фоне магнито-инфракрасно-лазерного облучения

Показатели	Исходное		После стресс- воздействия (в сутках) I II III
1. Фагоцитоз %		32+1,8	62+4.9* о	70,7+2,7* о	47.4+2,9* о
2. Ф/ч. (ед)		1,8+0,15	4,0+0,3* о	2,7+0,2 о	2,7+0,21 о*
3. НСТ-тест (ед)		5,0+0.4	11+1,45* о	6,5+0,97	5,2+0,77**

Примечание как и в таблице 16

Фагоцитарное число в опытной группе через 1 сутки после стрессорного воздействия достоверно увеличивалось с 1,08+0,15 до 4,0+0,3; на 2 сутки – до 2.7+0,2 и на этом уровне удерживалось до конца эксперимента. По отношению к контрольной группе фагоцитарное число в опытной группе достоверно было высоким на 1 и 3 сутки после стрессорного воздействия.

Показатели НСТ-теста в обеих группах, как в контрольной, так и в опытной имели аналогичную направленность через 1 сутки после стрессорного воздействия. В опытной группе через 1 сутки НСТ- тест достоверно повысился

в 2,2 раза (Р< 0,05), в контрольной – в 3,7 раза (Р<0,001), на 2 сутки в обоих группах произошло снижение до исходного уровней, на 3 сутки в опытной группе со стороны НСТ-теста существенных изменений не наблюдалось, тогда как в контрольной группе вновь произошло повышение НСТ-теста до 16,3+0,66, что достоверно выше опытного уровня.

Анализ фактического материала показал, что при магнито-инфракрасно-лазерном облучении на ранних стадиях стресс-реакции происходят повышение фагоцитоза, фагоцитарного числа и НСТ-теста в нейтрофилах периферической крови. Переход в последующую стадию адаптации характеризовались нормализацией фагоцитарного звена иммунитета и функциональной способности нейтрофилов.

Таким образом, нами выполнены эксперименты по изучению магнито-инфракрасно-лазерного воздействия на функциональную активность тех или иных звеньев иммунитета при эмоциональном стрессе.