
- •Заключение 103
- •Сокращения, принятые в диссертации
- •1 Обзор литературы
- •Современные представления механизмов стресса
- •Литература
- •Литература
- •1.2 Стресс и иммунитет
- •Литература
- •Литература
- •Литература
- •Стресс и ферменты
- •1.4 Влияние физических методов лечения на резистентность организма
- •2.1 Характеристика экспериментального материала и распределение их по сериям
- •2.3 Методы исследования
- •Действие природной глины на функциональное состояние иммунной системы при эмоциональном стрессе
- •2.1 Влияние эмоционального стресса на клеточное, гуморальное и неспецифическое фагоцитарное звенья иммунитета на фоне тагансорбента
- •3.2. Состояние центральных и периферических лимфоидных органов при эмоциональном стрессе на фоне тагансорбента
- •3.3 Состояние активности ферментов сдг и цхо при эмоциональном стрессе на фоне тагансорбента
- •4.1 Показатели клеточного, гуморального и фагоцитарного звеньев иммунитета под воздействием магнито-инфракрасно-лазерного облучения при эмоциональном стрессе
- •4.2 Воздействие магнито-инфракрасно-лазерного излучения на состояние центральных и периферических лимфоидных органов при эмоциональном стрессе
- •4.2 Динамика активности ферментов в селезенке, печени и надпочечниках при влиянии магнито-инфракрасно-лазерного излучения и стрессорного воздействия
3.3 Состояние активности ферментов сдг и цхо при эмоциональном стрессе на фоне тагансорбента
Биохимические и иммунологические процессы, протекающие в организме человека, весьма сложны, до конца не изучены, и, тем не менее они в значительной мере способствуют пониманию механизмов развития стресс-реакций. Знания нормативов биохимических показателей в норме и при развитии патологического процесса приобретает важное медико-биологичес-кое значение.
Определение иммунологических и биохимических показателей дает воз-можность выявить нарушение физиологических механизмов гомеостаза и целенаправленно использовать лекарственные, физические и другие методы лечения.
Для более широкого понятия развития адаптационного синдрома и разработки дифференцированных методов антистрессорного воздействия физических методов необходимо изучить активность ферментов энерге-тического обмена для определения степени нарушения адаптивных механизмов и восстановления нарушенных функций организма.
В контрольной группе нашего исследования изучалась активность ферментов СДГ и ЦХО в печени, селезенке и надпочечниках после стрессорного воздействия через 1, 2 и 3 сутки (таблица 12-14 и рис 5). Анализ результатов показал (таблица 12), что активность СДГ в селезенке возрастает с 0,024+0,006 нмоль/с на мг белка до 0,044+0,006. нмоль/с на мг белка (Р<0,05) через 1 сутки после стрессорного воздействия, на 2 сутки ее активность снижается до исходного уровня и не изменяется в течение всего периода наблюдения.
В печени активность СДГ повышается с 0,004+0,0001 до 0,0131+0.0015 нмоль/с на мг белка (Р<0,05) через 1 сутки после стрессорного воздействия и
продолжает повышаться дальше на 2 и 3 сутки наблюдения до 0,0156+0,0044 и 0,0213+0,0050 нмоль/с на мг белка (Р< 0,05) соответственно.
Активность фермента ЦХО в селезенке первые сутки после стрессорного воздействия не претерпевает изменения, на 2 сутки повышается и только статистической значимости достигает на 3 сутки.
В печени активность ЦХО снижается в 2,8 раза на 1 сутки после стрессорного воздействия. На 2 сутки ее активность возрастает до исходного уровня и удерживается на высоком уровне до конца эксперимента (таблица 13).
Волнообразная картина изменений активности СДГ представлена в надпочечниках (таблица 14). Из таблицы видно, что через 1 сутки активность СДГ снизилась в 1,4 раза, на 2 сутки возросла до 0,069+0,0034 при исходном 0,040+0,0012 нмоль/с на мг белка (Р<0,001) и на 3 сутки вновь снизилась до 0,032+,0,0017 нмоль/с на мг белка (Р<0,05).
В надпочечниках через 1 сутки после стрессорного воздействия парал-лельно с уменьшением активности СДГ происходило снижение активности ЦХО. На 2 сутки ее активность возрастала до 0,522+0,045 нмоль/с на мг белка (Р<0,001). На 3 сутки эксперимента ее активность снизилась и соответствовала исходому уровню.
Результаты биохимических исследований показывают, что в ранних стадиях адаптационного синдрома повышается активность ферментов СДГ в селезенке и печени, снижается активность ЦХО в печени и надпочечниках. Причем изменения активности СДГ и ЦХО в надпочечниках претерпевают фазные изменения. Переход в последующую стадию ОАС характеризуется: в селезенке
нормализацией СДГ и повышением ЦХО; в печени –высокой активностью СДГ и нормализацией ЦХО; в надпочечниках – снижением активности СДГ и нормализацией ЦХО.
Высокий уровень энергетических затрат в значительной степени связан со специфической и неспецифической стрессорной реакцией целостного организма при действии стрессорного фактора. Возрастание активности, вероятно, связано с увеличением скорости дегидрирования янтарной кислоты в цикле Кребса, а также наблюдаемым в этот период увеличением концентрации глюкокортикоидов /264, 265/.
Представленные данные говорят об отсутствии однонаправленных изме-нений в различных органах в динамике развития общего адаптационного синдрома. Если в селезенке и печени в ранней стадии повышены активность ферментов СДГ и снижены ЦХО, то в надпочечниках активность всех изу-чаемых ферментов энергетического обмена снижены. Данные изменения, видимо обусловлены тем, что либо недостаточность одних факторов компенсируется активацией и/или снижением других механизмов защиты в зависимости от стадии ОАС и характера стрессорного воздействия и реактивности организма.
Дисбаланс клеток, возникающий в pанних стадиях стpесс-pеакции, имеет существенное значение в pазвитии иммунологических pеакций, поскольку субпопуляции с пpотивоположными функциями могут включаться в иммунопатологический пpоцесс одновpеменно и тогда конечный pезультат этого взаимодействия во многом зависит от количественных соотношений этих клеток /263, 266/.
Лимфоциты оказывают непосpедственное повpеждающее действие на ткани (естественные киллеpы в pанних стадиях ОАС) и по меpе pазвития ПЧЗТ могут быть одним из компонентов патогенентических фактоpов оpганных поpажений и аутоаллеpгических пpоцессов пpи облучении. В то же вpемя, нельзя исключить и то, что патогенное действие лимфоцитов на любом этапе pазвития ОАС имеет защитное значение, способствуя в опpеделенной меpе элиминации повpежденных элементов ткани.
Исследованиями H.П.Беклемишева и Г.С.Cуходоевой /267/ показано, что уменьшение в кpови содеpжания Т-лимфоцитов пpи pазличных нозологиях является не pезультатом дефицита, а следствием мобилизации Т-лимфоцитов, пеpеходом их из тимуса и кpови в очаги, в локальные оpганы иммунитета.
Активность гумоpального звена иммунитета наиболее отpажает уpовень ЦИК, котоpый оказывается сниженным в ответ на стpессоpное воздействие
Тем не менее, не вызывает сомнений, что пpи действии стpессоpных фактоpов (эмоциональный стресс) сопpовождается фоpмиpованием втоpичной иммунологической недостаточности с пpеимущественным угнетением pеакции гуморального звена иммунитета.
Возникший под действием чpезвычайных фактоpов интенсивный и пpодолжительный иммунный ответ оказывает неблагопpиятное воздействие на клетки иммунной системы, их коопеpацию и функциональное состояние.
Подведя итоги комплексного изучения иммунного статуса в pазличные пеpиоды стpесс-pеакции, следует отметить, что детальное изучение защитной и повpеждающей функции иммунитета, их взаимосвязей по меpе pазвития ОАС откpывает новые пеpспективы не только для дальнейшей pазpаботки учения об ОАС, но и для обновления эффективных сpедств ее иммунокоppекции, котоpая должна включать целенапpавленную коppекцию как повpеждающей, так и защитной функции иммунного ответа.
Поскольку основными этапами иммуногенеза являются мигpация стволовых кpоветвоpных клеток в лимфоидные оpганы, диффеpенциpовка этих клеток в Т- и В-лимфоциты и взаимодействие последних с макpофагами /263/, то следующий этап pаботы посвящена анализу конктеpных механизмов иммунного ответа пpи его искусственной стимуляции иммуномодулятоpами.
В опытной группе нами изучена динамика активности ферментов СДГ и ЦХО в селезенке, печени и надпочечниках белых крыс при эмоциональном стрессе на фоне глинотерапии (таблица 14-15 и рис 5). Анализ фактического материала показал, что у интактных животных после проведенного курса глинотерапии повышается активность ЦХО в селезенке и СДГ в печени. В надпочечниках у интактных животных после глинотерапии снижается активность СДГ в 1,7 раза и повышается в 2,5 раза активность ЦХО.
Через 1 сутки после стрессорного воздействия на фоне глинотерапии активность СДГ в селезенке не меняется, тогда как в контрольной группе активность СДГ повышалась и была достоверно выше опытного. Через 2 и 3 сутки в опытной группе активность СДГ существенно возрастала и была достоверно выше контрольного и исходного уровней.
Активность ЦХО в селезенке через 1 и 2 сутки после стрессорного воздействия достоверно снижалась с 0,370+0,019 до 0,142+0,014 нмоль/с на мг белка и 0,280+0,009 нмоль/с на мг белка соответственно, не отличаясь от контрольного показателей. На 3 сутки активность ЦХО в селезенке как в контрольной, так и в опытной группе достоверно повышались, причем в опытной группе повышение активности достигала статистической значимости в сравнении с соответствующим контролем.
Таким образом, в ранних стадиях общего адаптационного синдрома на фоне глинотерапии повышается активность ферментов СДГ и снижается активность ЦХО в селезенке, переход в следующую стадию характеризуется повышением активности ферментов СДГ и ЦХО.
Таблица 12
Динамика активности ферментов СДГ и ЦХО в селезенке белых крыс при эмоциональном стрессе на фоне глинотерапии
Время после стресса в сутках. |
СДГ ЦХО (нмоль/с) (нмоль/с)
|
|
(исх.) |
|
0,191±0,042 0,370+0,019* |
I |
|
0,121±0,035 0,142+0,014 о |
II |
1. 0,013±0,001 2. 0,097+0,002 о * |
0,301±0,067 0,280+0,009 о |
III |
2. 0,030+0,002 о * |
0,310±0,032 о о 0,407+0,021* |
Примечание: 1 - подвергнутые стрессу
2 – глинотерапия+ стресс
* - достоверность различий по отношению к 1 серии
( * - P < 0,01; ** - P < 0,001)
о - достоверно к исходному (P < 0,05); оо - P < 0,001
Таблица 13
Динамика активности ферментов СДГ и ЦХО, печени белых крыс при эмоциональном стрессе на фоне глинотерапии
Время после стресса в сутках. |
ПЕЧЕНЬ |
|
|
СДГ (нмоль/с) |
ЦХО (нмоль/с) |
0 (исх.) |
1. 0,003±0,0001 2. 0,028+0,0027* |
0,270±0,028 0,308+0,012 |
1 |
1. 0,0131+0,0015 о о 2. 0,108+0,009 о* |
0,095±0,0013 о о 0,255+0,016 о ** |
2 |
1. 0,0159±0,0044 о о 2. 0,083+0,004 о** |
0,211±0,093 0,215+0,014 о |
3 |
1. 0,0213±0,050 о о 2. 0,029+0.0025** |
0,251±0,025 0,327+0,012* |
Примечание как и в таблице 12
Через 1 сутки после стрессорного воздействия активность СДГ в печени возрастала в обоих группах, затем оставалась высокой в течение 2 суток и нормализовалась на 3 сутки в опытной группе, тогда как в контроле активность
СДГ возрастала на всем протяжении наблюдения. Снижение активности ЦХО в селезенке наблюдалось больше в контрольной группе, на 2 сутки их активность
соответствовали друг другу, и на 3 сутки активность ЦХО в опытной группе
Таблица 14
Динамика активности СДГ и ЦХО белых крыс при эмоциональном стрессе на фоне тагансорбентаглинотерапии.
Время после стресса |
Серии |
НАДПОЧЕЧНИК |
|
|
|
СДГ (нмоль/с) |
ЦХО (нмоль/с) |
0 (исх.) |
1 |
0,040±0,0012 |
0,259±0,014 |
2 |
0,023±0,0023* |
0,660+0,054** |
|
1 |
1 |
0,028±0,0023 о о |
0,174±0,054 о |
2 |
0,035±0,005 о |
0,159±0,012 о о |
|
2 |
1 |
0,069±0,0034 о о |
0,522±0,045 о о |
2 |
0,071±0,0041 о |
0,228+0,061 о о ** |
|
3 |
1 |
0,032±0,0017 о о |
0,263±0,016 |
2 |
0,044±0,0027 о |
0,535+0,023 о* |
Примечание как и в таблице 12
достоверно превышала контрольный показатель.
На ранних стадиях адаптационного синдрома на фоне глинотерапии в печени снижается активность ферментов СДГ и ЦХО, переход в другую фазу
характеризуется повышением активности фермента ЦХО и нормализацией активности СДГ.
Из таблицы 14 видно, что через 1 и 2 сутки после стрессорного воздействия в надпочечниках на фоне глинотерапии в опытной группе, как и в контрольной, на всем протяжении наблюдения постепенно повышается активность СДГ.
Только на 3 сутки ее активность достоверно превышали исходные и контрольные показатели. Совершенно противоположная динамика изменений наблюдалась со стороны фермента ЦХО. Ее активность в опытной группе на всем протяжении эксперимента была ниже исходного, по отношению к контрольной: через 2 сутки после стрессорного воздействия на фоне глинотерапии активность ЦХО была достоверно ниже контрольного уровня, но на 3 сутки ее активность была, наоборот, выше контрольного показателя.
Выявленные нами изменения активности ферментов энергетического обмена в селезенке, печени и надпочечниках по своей значимости в развитии ОАС оказались далеко неравнозначными и интерпретация их с этой точки зрения в настоящее время представляет определенные трудности, но тем не
Активность ферментов СДГ и ЦХО при эмоциональном стрессе на фоне глинотерапии
Рисунок 5
менее не вызывает сомнений их значимость в развитии стресс-реакции.
Таким образом, в надпочечниках на фоне глинотерапии в опытной группе на ранней стадии стресс-реакции повышается активность фермента СДГ, снижается ЦХО-активность, возрастают активность СДГ и ЦХО в последующую стадию стресс-реакции.
Подводя итоги комплексного изучения иммунного статуса и биохимических процессов в различные периоды стресс-реакции, следует отметить, что детальное изучение защитной и повреждающей функции иммунитета, их взаимосвязей по мере развития ОАС открывает новые перспективы не только для разработки учения об ОАС, но и для обновления эффективных средств ее иммунокоррекции, которая должна включать целенаправленную коррекцию как повреждающей, так и защитной функции иммунного ответа.
Выявленные нами количественные и качественные изменения неспеци-фической резистентности организма и нарушения гуморального звена иммуни-тета позволили по новому подойти к иммунокоррекции организма при стрессе, а именно, к обоснованию целесообразности применения неспецифической иммуномодулирующей терапии, воздействующие на конкретные звенья патогенеза с использованием физических методов воздействия, в частности природной глины.
ВЛИЯНИЕ МАГНИТО-ИНФРАКРАСНО-ЛАЗЕРНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ИММУНИТЕТА ПРИ ЭМОЦИОНАЛЬНОМ СТРЕССЕ