35. Подготовка биологического материала для проведения иммунологических исследований.

К основным иммунологическим методам исследования относятся:

 • определение крови;

 • определение неспецифической иммунологической резистентности;

 • оценка специфической реактивности;

 • определение кластерных маркеров.

Взятый материал должен находиться в соответствующей емкости – пробирка с нужным коагулянтом, консервантом и т.д.

.В пробирках для иммунологических исследований должно соблюдаться правильное соотношение между кровью и антикоагулянтом (до метки).В пробах крови необходимо отсутствие гемолиза, а также сгустков крови с антикоагулянтом.Хранение и транспортировка биоматериала должно выполняться с соблюдением «ХОЛОДОВОЙ цепи»: хранятся и транспортируются только при температуре от+2 до +8.

36Методы исследования функциональной активности фагоцитов.

При изучении фагоцитарной активности нейтрофилов в качестве объекта фагоцитоза применяют самые различные вещества и микробы. Некоторые авторы работают с живыми микробами. Н. И. Латышева и А. А. Гогочкина в качестве объекта фагоцитоза использовали убитые взвеси микробов. Наконец, фагоцитарная активность нейтрофилов определяется по отношению к неорганическим веществам: кармин, тушь и т. д.. Большинство авторов изучало только фазу поглощения микробов. Но для оценки фагоцитарной активности имеет большое значение и оценка переваривающей способности нейтрофилов. Для оценки переваривающей активности все фагоцитированные микробы распределялись по интенсивности окрашивания на три группы: интенсивно окрашенные (непереваренные), слабо окрашенные, измененные микробы (частично переваренные) и, наконец, почти полностью разрушенные (переваренные).

А. Г. Прокофьевой было установлено, что в течение первых 15 минут нейтрофилы преимущественно захватывают микробы, а их переваривание начинается несколько позднее. В дальнейшем, по мере продолжения экспозиции, нара стает их переваривающая активность при продолжающемся фагоцитозе. Переваривающая активность нейтрофилов достигает максимума к концу первого часа, когда около 46% поглощенных микробов оказывается почти полностью переваренными. Пищевая нагрузка существенно не отражается на фагоцитарной активности. После значительного мышечного напряжения (спортивные тренировки) отмечается некоторое уменьшение интенсивности переваривания микробов при неизменном фагоцитозе бактерий.

Уитби (1954) указывает, что активность фагоцитоза стоит в прямой зависимости от общего состояния организма.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ФАГОЦИТОВ

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологиии может быть использовано для оценки пригодности хромогенного реактива - нитросинеготетразолия /НСТ/ для применения в реакции фагоцитоза при оценке иммунного статуса здорового и больного организма.Способ включает: приготовление контрольной смеси /КС/; забор крови с антикоагулянтом; приготовление смеси для исследования фагоцитоза /СИФ/ путем внесения в исследуемую пробу крови предварительно приготовленного 0,1% раствора НСТ, растворенного в 0,9% растворе натрия хлорида; инкубацию СИФ; приготовление мазков изпроинкубированной СИФ с последующим определением количества формазан-положительных фагоцитов в процентах от общего количества фагоцитов и оценкой ФАФ путем сопоставления полученных значений с нормальными величинами.Для приготовления КС часть предварительно приготовленного раствора НСТ объемом не менее 0,05 мл смешивают с дрожжами Saccharomycescerevisiae и выдерживают полученную КС в течение не менее 6 мин при температуре (20±2)°С, затем анализируют окраску КС и используют остальную часть раствора НСТ для приготовления СИФ только при наличии в КС розового окрашивания. Реализация заявленного способа позволяет повысить точность определения ФАФ на 25-33% за счет исключения возможности получения ложнозаниженных результатов, обусловленных применением образцов НСТ с утраченной способностью к восстановлению в формазан. 6 з.п. ф-лы, 8 табл.