2.2. Особливості епідеміології дифтерії

Джерело збудника — людина (хворий чи носій токсигенних штамів). Хворі на дифтерію заразні з останнього дня інкубаційного періоду до 10—25-го дня хвороби. Бактеріоносійство розвивається після перенесеної хвороби, а також у здорових осіб. Особливу епідеміологічну небезпеку становлять здорові бактеріоносії (не менше ніж 90 % захворювань на дифтерію пов'язані з інфікуванням від них). Розрізняють 5 видів носійства збудників дифтерії: транзиторне (виявляється одно­кратно), короткочасне (до 2 тиж.), середньої тривалості (від 15 діб до 1 міс), затяжне (до 6 міс) і хронічне (більше ніж б міс).

Механізм передачі збудника — повітряно-краплинний; фактор передачі — повітря, в якому міститься бактеріальний аерозоль. Оскільки збудник стійкий у зовнішньому середовищі, зрідка факторами передачі можуть бути предмети побуту, іграшки, білизна. Як виняток, зараження відбувається аліментарним шляхом через інфіковані продукти. Дифтерія шкіри, слизових оболонок, очей, статевих органів, пупка виникає головним чином у країнах із жарким кліматом під час передачі збудника через забруднені руки.

Природна чутливість людей до дифтерії невисока, індекс контагіозності складає 15—25 %. Сприйнятливість визначається наявністю антитоксичного дифтерійного імунітету. Уміст у 1 мл крові 0,03 міжнародних одиниць (МО) специфічних антитіл забезпечує захист від виникнення дифтерії, проте не перешкоджає формуванню носійства патогенних мікробів. Рівень захворюваності обернено пропорційний відсотку щеплених проти цієї інфекції. Хвороба зникає там, де вакцинацію анатоксином проводять систематично й доброякісно. Періодичні (через 10—15 років) та осінньо-зимові підйоми захворюваності спостерігаються за наявності значного прошарку населення, не охопленого вакцинацією. В останні роки, у зв'язку з масовою імунізацією дітей молодших вікових груп, відносно частіше хворіють дорослі, а контингентами ризику стають працівники транспорту, торгівлі, сфери обслуговування та ін. Після перенесеної дифтерії формується імунітет, повторні випадки захворювання реєст­руються рідко [4].

Розділ 3 практичне значення Corynebacterium diphtheriae

3.1. Отримання імуномодулятора

Cимбіонтний штам Corynebacterium diphtheria може бути використаний, як біоматеріал для отримання препарату - імуномодулятора, призначеного для профілактики і лікування інфекційних захворювань сільськогосподарських тварин.

Бактеріальні препарати – пробіотики, що використовуються у ветеринарії для лікування та профілактики багатьох інфекційних захворювань. Широко відомо застосування біфідобактерій, лактобацил, кишкових паличок, ентерококів та інших представників нормальної мікрофлори людини і тварин для приготування пробіотиків, біологічно активних добавок до їжі для профілактики і лікування в основному кишкових інфекцій та дисбіозів шлунково-кишкового тракту.

Штам С. diphtheriae tox-108 зберігається в ліофілізованому стані в ампулах при +4 ° С (у холодильнику). В якості наповнювача при сушінні культури використовується звичайна сахарозо-желатинове середовище (СЖ). Розмножується штам на мартенівському агарі, що містить 10% сироватки великої рогатої худоби, протягом 18 год. при температурі 37 ° С.

Штам Сorynebacterium diphtheriae tox-108 вирощують протягом 16 год. на щільному живильному середовищі на основі рибного гідролізату з додаванням сироватки великої рогатої худоби при температурі 37 ° С. Потім культуру змивають рідким живильним середовищем на основі гідролізату казеїну і після 5 год. культивування вносять в робочі ємності з тією ж рідким живильним середовищем. Проводять вирощування біомаси при постійному перемішуванні при температурі 37 ° С протягом 16 год. Мікробні клітини осаджують центрифугуванням при 5000 g протягом 20 хв. і тричі промивають фізіологічним розчином при центрифугуванні в режимі 5000 g протягом 20 хв. Вологий осад зважують, суспендується в забуференному фізіологічному розчині з рН 7,2 до концентрації клітин 5%. Потім цілі клітини дезінтегруються на ультразвукової установці протягом 20 хв. при частоті 20 кГц, амплітуді 14 мкм і охолодженні (льодом або водою) до 30 ° С. Отриману після ультразвукової обробки гомогенну суспензію дезінтеграту центрифугують при 5000 g протягом 20 хв. з метою відокремлення незруйнованих клітин та їх фрагментів від клітинних стінок.

Осад видаляють, супернатант центрифугують при 14000 g протягом 20 хв. Осад, що представляє собою препарат клітинних стінок, ресуспендують у фізіологічному розчині і знову центрифугують при 14000 g протягом 20 хв. Відмивання клітинних стінок від домішок цитоплазми і живильного середовища повторюють 3 рази. Відмиті клітинні стінки ресуспендують в дистильованої воді, отриманий матковий розчин стерилізують при температурі 100 ° С, і піддають ліофільному висушування. Отриманий сухий препарат - порошок білуватого кольору, після розведення у фізіологічному розчині утворює суспензію [10].

Із штаму С. diphtheriae tox-108 отримують безпечний препарат імуномодулятор, при використанні якого у профілактиці та лікуванні інфекційних захворювань підвищується неспецифічна резистентність молодняку ​​(телят і поросят) і дорослих особин сільськогосподарських тварин і виключаються шкідливі побічні явища.

Технічний результат від реалізації полягає у створенні неспецифічної резистентності сільськогосподарських тварин проти інфекційних захворювань бактеріальної та вірусної природи, що дозволяє знизити захворюваність у сільськогосподарських тварин, скоротити застосування інших лікувальних препаратів, в тому числі реактогенних вакцин та антибіотиків, призводять до сенсибілізації організму, вторинним імунодефіцитів, порушень мікроекології кишечника (дисбіози) і до збільшення щільності циркуляції високо патогенних штамів мікроорганізмів. Крім цього введення імуномодулятора в організм тварин сприяє отриманню екологічно безпечного м'ясомолочного продукту і пропонує безпечну схему виробничого процесу.

Можливість використання штаму С.diphtheriae tox - 108 при приготуванні імуномодулятора, що створює неспецифічну резистентність тварин проти інфекційних захворювань бактеріальної та вірусної природи у сільськогосподарських тварин.

Таким чином, імунізація сільськогосподарських тварин нешкідливим препаратом - імуномодулятором, приготованим з штаму С. diphtheriae tox-108, сприятиме збільшенню виходу натурального екологічно чистого цільового продукту - м'яса і молока, безпечного для споживання людьми і без алергічного компоненту в його складі. Використання препарату - імуномодулятор у профілактичних цілях дозволяє знизити виникнення (особливо в період осінньо-зимових спалахів) інфекційних епізоотій, виключити побічні явища при імунізації тварин (інтоксикацію, алергічні реакції, імунну супресію і т.д.), які, як правило, виявляються при використанні специфічних вакцин, етіотропних препаратів та препаратів антибіотиків.