Місце Corуnebacterium diphtheriae у філогенетичній класифікації

№ п/п	Таксон	Назва
1	Надцарство	Bacteria
2	Відділ	Actinobacteria
3	Клас	Actinobacteria
4	Підклас	Actinobacteridae
5	Порядок	Actinomycetales
6	Підпорядок	Corуnebacterineae
7	Родина	Corуnebacteriaceae
8	Рід	Corуnebacterium
9	Вид	Corуnebacterium diphtheriae

Розглянемо морфолого-культуральні та фізіолого-біохімічні ознаки бактерій виду Corуnebacterium diphtheriae.

1.2.1. Морфологія Corynebacterium diphtheriae

C. diphtheriae – це прямі або ледь зігнуті поліморфні палички із заокругленими або гострими кінцями, завдовжки 1-8 мкм, діаметром 0,3 – 0,8 мкм, спору не утворюють, нерухливі, мають мікрокапсулу і фімбрії, грампозитивні. Для морфології збудників дифтерії характерна велика різноманітність розміру клітин. У препараті розміщується безладно(Рис. 1.1). Форма пояснюється особливістю їх розходження під час поділу клітин. Для виявлення зернистості фарбують за Нейсером або метиловим синім, який має спорідненість до волютину, тому забарвлює гранули більш інтенсивно, ніж цитоплазму клітини.

Рис.1.1 Пофарбовані клітини C. diphtheriae

1.2.2. Культуральні властивості Corynebacterium diphtheriae

C. diphtheriae вибагливі до поживних середовищ, ростуть на середовищах, що містять кров або сироватку крові. Елективними є середовища: Ру (зсіла цільна кінська сироватка), Леффлера (3 частини сироватки великої рогатої худоби і 1 частина цукрового бульйону), нині використовують 10% сироватковий агар. На зсілій сироватці або сироватковому агарі ріст з'являється через 8-12 годин , стороння мікрофлора за цей час не встигає прорости. На зсілій сироватці утворюються дрібні випуклі колонії сірувато-білого або жовтувато-кремового кольору з гладенькою поверхнею. Колонії не зливаються між собою, тому поверхня культури нагадує вигляд «шагреневої» шкіри. Особливістю збудників дифтерії є їхня резистентність до високих концентрацій калію телуриту, у той час як супутня мікрофлора гине. Тому для первинного культивування використовують селективне середовище, кров'яно-телуритовий агар (KTA) (Рис. 1.2) [7].

Рис.1.2 Колонії C. diphtheriae на кров'яно-телуритовому агарі.

C. diphtheriae відновлюють калій телурит до металевого телуру, який накопичується в мікробних клітинах і надає колоніям темно-сірого або чорного кольору.

За структурою колоній і біохімічними властивостями C. diphtheriae поділяється на 4 біокультивари: gravis, mitis, intermedius i belfanti.

Через 48 годин на кров’яно-телуритовому агарі варіанти mitis і belfanti утворюють дрібні (1,5-2 мм у діаметрі), сірі або чорні, круглі, з рівним краєм, гладенькі, випуклі, маслянистої консистенції, матові колонії, які можна пересувати петлею по поверхні агару, не порушуючи їх цілісності, крихкі, плоскі, з радіальною посіченістю, хвилястими краями – R-форми. Варіант intermedius – утворює дрібні (0,5 – 11 мм), сірі, прозорі, плоскі, гладенькі колонії – перехідна SR-форма.

У рідкому поживному середовищі i belfanti утворюють рівномірне помутніння і порошкоподібний осад , бульйон зазвичай прозорий. Варіант intermedius утворює помутніння, яке згодом просвітлюється, і дрібнозернистий осад [9].