26. Дифференциальное окрашивание хромосом, применение этого метода.
В зависимости от целей цитогенетического исследования используются различные методы окрашивания хромосом. Наиболее распространенными из них являются рутинная или обычная окраска и ряд методов дифференциального окрашивания хромосом: Q-, G-, С-, R- и NOR- или Ag-окраска. В свою очередь, методы дифференциального окрашивания делятся на 2 группы: 1) приводящие к образованию сегментов вдоль длины всех хромосом (например Q-, G- или R-сегменты); 2) приводящие к окрашиванию специфических хромосомных структур, в результате чего выявляется ограниченное число сегментов (С-, Т- или NOR-сегменты).
Q - окрашивание по Касперссону акрихин-ипритом с исследованием под флуоресцентным микроскопом. Чаще всего применяется для исследования Y-хромосом.
R - используется акридиновый оранжевый и подобные красители, при этом окрашиваются участки хромосом, нечувствительные к G-окрашиванию. Используется для выявления деталей гомологичных G- или Q-негативных участков сестринских хроматид или гомологичных хромосом.
G - модифицированное окрашивание по Романовскому — Гимзе. Чувствительность выше, чем у Q-окрашивания, поэтому используется как стандартный метод цитогенетического анализа. Применяется при выявлении небольших аберраций и маркерных хромосом (сегментированных иначе, чем нормальные гомологичные хромосомы).
27. Классификация мутаций по изменению силы и направленности действия мутантного аллеля.
28. Геномные мутации. Полиплоидии и анеуплоидии, причины их возникновения.
29. Структурные перестройки хромосом: виды, механизмы образования. Делеции, дупликации, инверсии, инсерции, транслокации.
. Делеции (от лат. deletio — уничтожение) — хромосомные перестройки, при которых происходит потеря участка хромосомы. Делеция может быть следствием разрыва хромосомы или результатом неравного кроссинговера. По положению утерянного участка хромосомы делеции классифицируют на внутренние (интерстициальные) и концевые (терминальные).
инсерцией называют вставку новых нуклеотидов в последовательность.
30. Генные мутации: транзиции, трансверсии, сдвиг рамки считывания, нонсенс -, миссенс - и сейсменс - мутации.
Трансзиция мутация, обусловленная заменой азотистого основания в молекуле нуклеиновой к-ты. При Т. одно пуриновое основание заменяется на другое (аденин на тимин, или наоборот), или одно пиримидиновое основание на другое (гуанин на цитозин, или наоборот). В отличие от трансверсий, Т. иногда наз. простыми заменами, т. к. в этом случае не происходит изменения ориентации пурин — пиримидин в мутантном сайте двуцепочечной молекулы нуклеиновой к-ты.
31. Физические, химические и биологические мутагены.
32. Механизмы репарации ДНК. Фотореактивация. Болезни, связанные с нарушением процессов репарации.
33. Механизмы репарации ДНК. Эксцизионная репарация.
34. Хромосомные болезни, общая характеристика. Моносомии, трисомии, нулисомии, полные и мозаичные формы, механизм нарушения распределения хромосом в первом и втором мейозе.
35. Хромосомные болезни, вызванные структурными перестройками хромосом.
36. Пол как менделирующий признак. Типы определения пола.
37. Хромосомное определение пола и его нарушения.
38. Дифференцировка пола на уровне гонад и фенотипа, ее нарушения.
После оплодотворения у человека дифференцировка происходит на уровне гонад (внутренние железы и органы) до 5 недели эмбрионального развития. Формирование этих закладок (первичных гонад: вольфовых и мюллеровых протоков) обеспечивается Х-хромосомой и поэтому идет одинаково у ♂ и ♀.
≈ на 6 недели эмбрионального развития, если 2-ая хромосома – У, то в этой хромосоме на коротком плече находится ген, который и направляет развитие гонад по ♂ типу. Этот ген контролирует синтез регуляторного белка НУ – антигена, который направляет дифференцировку первичных гонад по ♂ типу.
Если НУ – антиген не нарабатывается, то развитие пойдет по ♀ типу (мозговое вещество первичной гонады не получит развития, а развиваться будет корковое вещество).
Дифференцировка внутренних и наружных половых органов из вольфовых и мюллеровых протоков связано с наработкой гормонов яичниками или семенниками. Если сформировались яичники, то вырабатываются эстрогены → из мюллеровых протоков формируютсяматочные трубы, матка, верхняя треть влагалища, формируются также антивольфов фактор → редукция вольфовых протоков.
Если гонада сформирована по ♂ типу, то синтезируются андрогены → из вольфовых протоков формируются семенные протоки, семенные пузырьки, клетки Сертоли; синтезируется антимюллеров фактор.
Если все эти элементы синтезируются в нужное время и в нужной последовательности, то происходит нормальное формирование ♂ и ♀ организма.
Отклонение в работе системы на различных уровнях могут вызвать неполное развитие ♂ фенотипа в организме ХУ – мужской псевдогермофродитизм (генотип - ♂,фенотип - ♀).
Пр.:
синдром тестикулярной феминизации. Аномалии не проявляются, фенотип - ♀. В детском возрасте синдром можно обнаружить, если при паховых грыжах находят семенники. У взрослых рост и пропорции тела типично женские, но ноги длиннее, оволосение по ♀ типу. Хорошо развиты молочные железы, аменорея, внутренние половые органы развиты плохо, наружные половые органы – нормальны. Андрогены секретируются в нормальных количествах, но дефектны рецепторы к этим гормонам.
адреногенитальный синдром – женский ложный гермафродитизм (генотип - ♀, фенотип - ♂)
Истинный гермафродитизм у человека очень редок.