Задача № 20

В микробиологическую лабораторию поступили испражнения 2-х летнего ребенка с клиническими признаками колиэнтерита, предположительно эшерихиозной или шигеллезной этиологии. При посеве на среду Плоскирева выросли светлые колонии.

Задания:

1. Как правильно провести забор испражнений у 2-х летнего ребенка?

2. На что указывает рост светлых колоний на среде Плоскирева?

3. Какой углевод входит в состав дифференциально-диагностических сред для возбудителей кишечных инфекций? Почему?

4. Как подтвердить шигеллезную природу возбудителя?

Эталоны ответов к задаче № 20

1. Следует собрать как первые, так и последние порции кала (т. к. для колиэнтеритов характерно поражение тонкого кишечника, а для дизентерии – толстого). 3-5 г испражнений помещают в стерильную пробирку с изотоническим раствором NaCl или 30% глицериновой смесью (30 частей глицерина и 70 частей изотонического натрия хлорида). При невозможности доставить материал в лабораторию в течение 2-х часов, его хранят в холодильнике при t= 4⁰C не более 24 часов.

2. Учитывая условия задачи, рост светлых колоний на среде Плоскирева свидетельствует в пользу шигеллезной природы возбудителя. Следует иметь в виду, что в виде светлых колоний могут, также, расти сальмонеллы и некоторые другие энтеробактерии.

3. В состав дифференциально-диагностических сред для возбудителей кишечных инфекций входит углевод лактоза, т.к. именно этот углевод является дифференциально-диагностическим для возбудителей кишечной группы. Кишечная палочка ферментирует лактозу и приобретает цвет питательной среды, а шигеллы и сальмонеллы не ферментируют лактозу и растут на этих средах в виде бесцветных колоний.

4. Подтвердить шигеллезную природу заболевания можно путем сероидентификации в реакции агглютинации на стекле с адсорбированными сыворотками.

Задача № 21

В микробиологическую лабораторию поступили испражнения от больного 32-х лет с подозрением на брюшной тиф или паратиф. Материал посеяли на дифференциально-диагностические среды: Эндо, Плоскирева, висмут-сульфит агар (ВСА) и на селенитовую среду обогащения. При повторном посеве из селенитовой среды на дифференциально-диагностические среды, на средах Эндо и Плоскирева выросли единичные колонии, а на висмут-сульфит агаре через 48 часов выросли черные колонии.

Задания

1. Как правильно провести забор, доставку и хранение испражнений при подозрении на брюшной тиф или паратиф?

2. Зачем проводят посев на дифференциально-диагностические среды (Эндо, Плоскирева висмут-сульфит агар (ВСА)) и на среду обогащения?

3. О чем свидетельствует рост черных колоний на ВСА через 48 часов?

4. Какую серологическую реакцию используют для идентификации сальмонелл?

Эталоны ответов к задаче № 21

1. 3-5 г испражнений (последней порции, т.к. поражается тонкий кишечник, помещают в стерильную баночку или пробирку с 30% глицериновой смесью). Сохранять собранный материал в глицериновой смеси можно в течение 6-8 часов, лучше в холодильнике при t⁰ = 4⁰C.

2. При подозрении на инфекцию сальмонеллезной этиологии проводят первичный посев на дифференциально-диагностические среды для кишечной группы: Эндо, Плоскирева, висмут-сульфитный агар. Среды Эндо и Плоскирева содержат углевод лактозу, который является дифференциально-диагностическим, т.к. кишечная палочка расщепляет лактозу, а шигеллы и сальмонеллы – не расщепляют. ВСА является элективной средой для сальмонелл. При подозрении на сальмонеллез в качестве среды обогащения используют селенитовый бульон, т.к. он ингибирует рост посторонней микрофлоры, но в нем хорошо растут и размножаются сальмонеллы.

3. Рост черных колоний на висмут-сульфитном агаре через 48 часов могут давать как возбудители брюшного тифа, так и возбудители паратифа В.

4. Для сероидентификации сальмонелл используют реакцию агглютинации на стекле, сначала с поливалентной сывороткой ко всем группам сальмонелл (А, В, С, D, Е), а затем с моновалентными.