Задача № 36

В микробиологическую лабораторию поступила мокрота пациента с подозрением на лёгочную форму туберкулеза. Из поступившего материала был приготовлен микроскопический препарат, в котором микобактерии туберкулёза не были обнаружены.

Задания

1. Как правильно собрать мокроту у больного с подозрением на туберкулёзную инфекцию?

2. Как нужно поступить с мокротой, если в препарате из нативного материала микобактерии не обнаружены?

3. Какой метод окраски используется для выявления туберкулёзных микобактерий? Какая особенность туберкулёзных микобактерий лежит в основе этого метода?

4. Является ли отрицательный результат при использовании микроскопического метода диагностическим?

Эталоны ответов к задаче № 36

1. Мокроту собирают в стерильную широкогорлую стеклянную баночку с завинчивающейся крышкой. Перед сбором мокроты пациент должен провести гигиеническую обработку полости рта. Мокроту следует собирать натощак или не раньше, чем через 2 часа после еды. Если мокроту собирают в течение дня, то в перерывах её хранят в холодильнике при +4⁰С.

2. Если в препарате из нативного материала мокроты микобактерии не обнаруживаются, то её обогащают (концентрируют) методом флотации (путём добавления к гомогенизированной мокроте бензола (или ксилола, или толуола), благодаря чему микобактерии концентрируются на поверхности.

3. Для выявления туберкулёзных микобактерий используется окраска по Цилю-Нильсену. В основе этого метода лежит кислотоустойчивость туберкулёзных микобактерий.

4. Отрицательный результат при микроскопическом методе исследования на наличие туберкулёзного возбудителя не является диагностическим, что объясняется его невысокой чувствительностью.

Задача № 37

В микробиологическую лабораторию поступил исследуемый материал от больного с клиническим диагнозом: “ Туберкулёз легких”.

Задания:

1. Какой материал поступил в лабораторию? Правила его взятия на микробиологическое исследование, транспортировки и хранения.

2. Какие методы обогащения применяются для концентрации возбудителя в малом объеме и в чём их сущность?

3. Какая особенность химического состава возбудителей туберкулёза обеспечивает их устойчивость к спирту, кислотам и щелочам?

4. Какой сложный метод окраски применяется для выявления возбудителей туберкулёза в микроскопических препаратах?

Эталоны ответов к задаче № 37

1. В лабораторию поступил исследуемый материал – мокрота больного туберкулёзом легких. На микробиологическое исследование собирают утреннюю мокроту до начала антимикробной терапии после тщательного туалета ротовой полости (тщательно прополоскать рот кипяченой водой) в стерильную посуду с крышкой – плевательницу, чашку Петри. До исследования хранить мокроту необходимо в холодильнике при 4⁰С не более 2-3 часов. Транспортировку любого клинического материала проводить в специальных металлических контейнерах, которые легко очищать и обеззараживать. Не допускается транспортировка случайными людьми или больными, а также в общественном транспорте.

2. С целью концентрации возбудителя из исследуемого материала в малом объеме применяются два метода: гомогенезации и флотации.

Сущность метода гомогенезации заключается в том, что при добавлении к исследуемому материалу 1% щелочи и тщательном встряхивании,погибает сопутствующая микрофлора, а микобактерии туберкулёза остаются жизнеспособными и при центрифугировании они концентрируются в осадке, где их легче можно обнаружить в микроскопических препаратах и при посеве на питательные среды (после нейтрализации).

Сущность метода флотации – добавление ксилола к гомогенезированному патологическому материалу, встряхивание его и отстаивание, приводит к всплыванию ксилола на поверхность, который увлекает и адсорбированные микобактерии. Из сливкообразного слоя с поверхности делают толстые мазки на водяной бане, готовят микроскопические препараты, окрашивают по Цилю-Нильсену.

3. Микобактерии туберкулёза содержат до 40% сухого остатка липидов, в состав которых входят различные кислотоустойчивые жирные кислоты, в том числе миколовая и др. Благодаря этому, микобактерии устойчивы к спирту, кислотам, щелочам, отмечается очень высокая устойчивость их к высушиванию и действию солнечных лучей.

4. Микроскопические препараты, содержащие микобактерии туберкулёза, окрашивают по методу Циля-Нильсена.