3. Реакция на стероидное ядро (реакция Либермана - Бурхарда)

5 мл фильтрата, полученных в предыдущем опыте, помещают в выпари­тельную чашку и выпаривают на спиртовке. Сухой остаток растворяют в 1 мл ледяной уксусной кислоты и добавляют смесь уксусного ангидрида и конц. серной кислоты (5:1). Через некоторое время появляется розовая окраска, переходящая сначала в зеленую, а затем в синюю.

Определение полисахаридов

1. Приготовить водный отвар 1:10. К 5 мл отвара добавляют 15 мл спирта этилового. Наличие осадка характеризует возможное присутствие слизи, пектиновых веществ или инулина.

2. Определение крахмала

1-2 г сырья растереть в ступке, прибавить 1-2 капли раствора Лю-голя. При наличии крахмала появ-ляется сине-фиолетовое окрашивание.

3. Определение инулина

1-2 г сырья растереть в ступке, перенести в фарфоровую чашку и аккуратно по стенкам добавить 20% раствора α-нафтола и конц. серной кислоты. Появляется красно-фиолетовое окрашивание.

Определение фенольных соединений

Качественный анализ фено-льных соединений имеет свои особен-ности, в связи с тем, что под этим термином подразумеваются вещества с близкими би­огенетическими связями, а результаты реакции с солями железа (III) не всегда позволяют сделать заключение о присутствии фенольных соединений в сырье. Многие соединения имеют свободный фенольный гидроксил (алкалоиды), а в некоторых фенольных соединениях фенольный гидроксил этерифицирован.

Определение флавоноидов

1 г свежего сырья заливают 10-ти кратным количеством 96% спирта этилового, раствор фильтруют, вы-паривают до густого осадка, остаток обрабатывают этим же спиртом. Полученный раствор фильтруют и проводят реакции.

1. Проба Синода (циани-диновая проба)

К 2 мл извлечения добавляют 5-7 капель конц. хлороводородной кислоты и 10-15 мг металлического магния или цинка, через 3-5 минут наблюдается красное, оранжевое или розовое окрашивание. Для усиления окраски смесь подогревают на водяной бане.

2. К 1 мл извлечения добав-ляют 3-5 капель 2% раствора аце-тата гидроксисвинца. Появление желто-оранжевого окрашивания свидетельствует о наличие флаво-ноидов.

Определение антраценпроизводных

Приготовить водный отвар свежего сырья 1:10. Полученную водную вытяжку фильтруют и разливают в две пробирки по 2-3 мл. К одной из них приливают 2-3 капли 10 % раствора гидроксида натрия. Вторая пробирка является контрольной. Появление вишнево-красного окрашивания указывает на присутствие антраценпроизводных (сравнить с контролем).

Определение дубильных веществ

1. Экспресс-метод: кусочек свежего растения закладывают между кусочками индикаторной бумаги и сдавливают плоскогубцами. При наличии дубильных веществ на бумаге образуется окрашенное пятно (синее или зеленое в зависи- мости от группы дубильных веществ).

Приготовление индикаторной бумаги. Полоски хроматографи-ческой фильтровальной бумаги смачивают 0,5% раствором хлорида железа (III) и высушивают. Раствор хлорида железа (III) содержит 1 мл хлороводородной кислоты в 100 мл раствора.

2. Готовят водный отвар свежего сырья (1:10). Извлечение фильтруют. Полу­ченный прозрачный раствор наливают в три пробирки по 2-3 мл (одна из них является контролем). В одну пробирку при-бавляют 2-3 капли железо-ам-мониевых квасцов (окрашивание вытяжки в синий или зеленый цвета указывает на присутствие, как дубильных веществ, так и соединений фенольного характера).

В другую пробирку приливают 1-2 капли 1% раствора желатина в изотони­ческом растворе. Наличие осадка указывает на присутствие дубильных веществ.

Примечание: в реакции с желатином следует избегать избытка реактива, т.к. при этом осадок может раствориться.