Фиксация и хранение проб
Для длительного хранения материала каждую пробу помещают в банку с фиксатором, предохраняющим материал от гниения. Собранный материал фиксируется и хранится в зависимости от его специфики. Для широкой практики применяются два фиксатора – формалин и этиловый спирт. Водные беспозвоночные (кроме моллюсков) и черви фиксируются в 4 %-ном растворе формалина либо в 70 %-ном растворе этилового спирта. Для получения 4 %-го формалина формалин, который продается в аптеках, (40 %-ый раствор формальдегида) разбавляется водой в соотношении 1 : 9 (в 9 объемных частях воды входит объем фиксируемого материала; для приготовления любых растворов лучше использовать кипяченую воду, лишь при фиксации морских животных для приготовления раствора используют морскую воду). Для длительного хранения материала фиксатор через сутки – двое полагается заменять. Крупных водных личинок насекомых предпочтительнее фиксировать в 4 %-ном растворе формалина. Моллюски фиксируются только в 70 %-ном (не меньше) растворе этилового спирта, так как формалин разрушает известковые раковины.
Главный недостаток формалина как фиксатора – его неприятный запах и высокая токсичность. Перед тем, как работать с крупными животными, фиксированными формалином, их необходимо промывать в течение нескольких часов проточной водой. Оставлять банки с формалином открытыми, наклоняться над ними и вдыхать пары формалина нельзя. После работы помещение необходимо проветрить.
Для получения 70 %-го раствора спирта можно 70 мл 96 %-го спирта разбавить водой до объема 96 мл. Спирт лишен недостатков формалина, но стоит дороже. Кроме того, при хранении в спирте животные обесцвечиваются.
При отсутствии спирта и формалина в качестве фиксатора может применяться формидрон – жидкость, часто имеющаяся в продаже в аптеках.
Очень важен для длительного хранения материала правильный подбор посуды. Главное требование – герметичность; иначе пробы рано или поздно высохнут. Но и из достаточно герметичной посуды фиксатор испаряется, и время от времени нужно просматривать пробы и доливать его. Высыхание пробы сильно замедляется добавлением небольшого количества глицерина в фиксатор. Необходимо помнить, что для работы материал из банки придется извлекать (в одних случаях – пипеткой или грушей, в других – пинцетом). Нужно подбирать такую посуду, чтобы это было легко сделать.
Особенности сохранения живого материала
Иногда необходимо сохранить материал живым. Например, чтобы его после подсчета выпустить. Кроме того, многие виды определять лучше в живом состоянии, чем после фиксации (например, коловраток или протистов). Для того чтобы сохранить материал живым, необходимо выполнять ряд правил.
В обычных орудиях лова (сачок, планктонная сеть) многие организмы повреждаются. Особенно это касается ракообразных с нежными покровами, и особенно в тех случаях, когда они оказываются (даже на короткое время) вне воды. Травмирующей может оказаться и сильная струя воды, поэтому воду из сетки нужно сливать в сосуд, до половины заполненный водой, причем с небольшой высоты.
Лучший способ пересаживания большинства животных из одного сосуда в другой – с помощью резиновой груши, в которую вдета стеклянная и пластмассовая трубка подходящего диаметра (обычно делается из лабораторных мерных пипеток). Животное нужно осторожно засосать в трубку (но не в глубь груши), а затем выпустить, держа конец трубки ниже уровня воды. Животных с более плотными покровами можно вынимать из сачка руками или мягким пинцетом.
Значительная часть животных гибнет в ходе транспортировки, особенно когда посуда с ними испытывает сильную тряску. Банку с живой пробой следует нести в руке, а не в сумке. Следует избегать попадания в пробу минеральных частиц – песка и глины со дна водоема.
Следующая причина гибели животных – недостаток кислорода. Он может вызываться разными причинами. Во-первых, часто пытаются сохранить в банке весь улов, не задумываясь о том, во сколько раз плотность популяций оказывается выше, чем в природе. «Густые» пробы нужно обязательно разбавлять. Возможной причиной недостатка кислорода может быть и закрытая крышка посуды. Держать закрытыми живые пробы нельзя. Возможной причиной гибели животных от недостатка кислорода – большое количество разлагающейся органики в банке. Часто это трупы погибших животных. Их со дна банки нужно сразу же удалять. Чтобы увеличить доступ кислорода, можно вылить пробу (осторожно, без сильного перемешивания) из банки в более широкий сосуд, где слой воды будет толщиной 2 – 3 см.
Не менее распространенная причина гибели животных – высокая температура. Пробу ни в коем случае нельзя оставлять на солнце. Для охлаждения можно обернуть банки с пробами мокрой марлей или поставить их в более широкий сосуд с водой и регулярно ее сменять.
Необходимо учитывать, что животные могут поедать и калечить друг друга в пробе. Особенно опасны для большинства животных крупные пиявки, клопы-гладыши, жуки-плавунцы и их личинки. Моллюсков также лучше держать отдельно от остальных.
Хотя многие животные довольно устойчивы к голоданию, при длительном содержании их приходится кормить. Некоторые мелкие ракообразные, а также активные хищники гибнут без пищи уже через сутки – двое. В банку личинками насекомых желательно положить несколько палочек или травинок, чтобы они упирались в дно и торчали из воды.
Многие пресноводные животные хорошо переносят колебания pH, жесткости и других показателей, связанных с химическим составом воды. И все-таки вероятность их гибели меньше, если вода взята из их «родного» водоема. Воду из водопровода или из колонки нужно отстаивать не менее суток (лучше – дольше).
Частая причина гибели животных – попадание в пробы ядовитых веществ. Противокомариные репелленты ядовиты практически для всех пресноводных животных. В лаборатории, где есть живые пробы, пользоваться ими нельзя, а руки после их применения нужно мыть.
После разбора собранного материала всех живых животных можно отпустить обратно в водоем.