Основы клинической иммунологии

подсчет общего числа лимфоцитов (абсолютное и % содержание в крови)

Вручную или с памощью гемоанализатора выявляют и подсчитывают в мазке крови окрашенном по Романовскому –Гимзе, морфология: отсутствие зернистости, ядро округлое, еле заметная цитоплазма голубого цвета. Норма 18-38% (1250-2500 в 1 мкл)

Лимфоцитоз характерен для острых инфекций, лимфопения для новообразований иммунной системы.

определение количества Т- и В-лимфоцитов;

Для подсчета Т-и В-лимфоцитов используют методы выявления поверхностных маркеров - антигенов системы CD. К этим антигенам биопромышленность готовит стандартные моноклональные антитела* и наборы реактивов для РИФ и ИФА.

Так, маркер Т-лимфоцитов антиген CD3, В-лимфоцитов - CD22, Т- хелперов - CD4, Т- киллеров (цитотоксических - CD8), естественных киллеров - CD 16, CD56.

Т- и В лимфоциты выявляют также по их способности фиксировать на своей поверхности эритроциты барана (Т-лимфоциты) или мыши (В-лимфоциты)

Содержание в крови здорового взрослого человека Т-клеток - 40-70%, В-лимфоцитов - 10-30% общего числа лимфоцитов.

Увеличение В-лимфоцитов характерно для острых инфекций, лимфопения для новообразований иммунной системы, состояния после удаления селезенки. Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов в крови свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета, повышение — о гиперактивости иммунитета.

оценка фагоцитарной активности нейтрофилов;

О фагоцитарной активности судят по способности клеток к фагоцитозу нейтральных частиц латекса, эритроцитов или микробных клеток. При этом вычисляют процент фагоцитирующих клеток (фагоцитарное число) и среднее число частиц поглощенных одним фагоцитом (фагоцитарный индекс).

Фагоцитарное число — среднее количество микробов, поглощённых одним нейтрофилом норма — 5-10 микробных частиц. Высокая фагоциарная активность нейтрофилов говорит о начале развития воспалительного процесса. Её снижение свидетельствует о хроническом воспалении и аутоиммунных заболеваниях.

определение основных классов сывороточных иммуноглобулинов (IgA, IgM, IgG);

Используются антисыворотки к тяжелым цепям иммуноглобулинов разных классов, реакцию преципитации или нефелометрии и турбидометрии, выявляющие взаимодействие иммуноглобулина с антителами по светорассеянию или мутности.

Уровень сывороточных иммуноглобулинов отражает функциональное состояние В-системы иммунитета.

определение титра комплемента

Активность комплемента выражают в гемолитических единицах. За одну 50 % гемолитическую единицу комплемента (CH₅₀) принимают такое его количество, которое вызывает гемолиз 50 % 0,5 мл стандартной суспензии сенсибилизированных эритроцитов при 37 °С за 45 мин.

В норме титр комплементой активности в сыворотке крови у взрослых составляет 50−140 ЕД/мл

Снижение титра свидетельствует о недостаточности комплемента, увеличение об аллергических и аутоиммунных процессах

определение Т- и В-лимфоцитов и их субпопуляций (CD4+, CD8+);

В норме относительно количество Т-хелперов (CD4) в крови 33−50%; Т-киллеров (CD8) 16−39%; Индекс CD4/CD8 в норме равен 1,5-2,5 > 2,5 — гиперактивности; < 1 — иммунодефициту. При воспалительном процессе соотношение CD4/CD8 может быть <1

Особое значение это отношение имеет в оценке иммунной системы у больных с ВИЧ-инфекцией. ВИЧ избирательно поражает и разрушает CD4-лимфоциты, в результате чего соотношение CD4/CD8 понижается до значений, значительно меньших 1.

определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК);

ЦИК — комплексы, состоящие из Аг, АТ и связанных с ними компонентов комплемента В норме иммунные комплексы, фагоцитируются и разрушаются. При избытке Аг комплексы могут откладываться в периваскулярном пространстве и корковом слое почек, вызывая активацию комплемента и воспалительные процессы.

Содержание ЦИК в сыворотке крови в норме — 30−90 МЕ/мл.

Повышение ЦИК в крови характерно для острых инфекций и аутоиммунных заболеваний.

постановка реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ);

Потенциальную способность лимфоцитов к активации оценивает после стимуляции митогенами, фитогемагглютином и др., культивируемых вне организма клеток Фитогемагглютинин (ФГА) — растительный лектин, получаемый из семян фасоли. Обычно мононуклеарные лейкоциты, выделенные из периферической крови методом градиентного центрифугирования, культивируют в присутствии ФГА в течение 72 ч. Результаты реакции можно учитывать либо морфологическим методом, либо по включению радиоактивной метки.

Снижение пролиферативного ответа на ФГА свидетельствует о наличии иммунодефицита, однако механизмы ^-последнего могут быть различны.